Academic literature on the topic 'Transestérification enzymatique'

Les acides gras polyinsaturés (AGPI), de la famille w-3 et w-6, sont essentiels au métabolisme humain. Pour cette raison, un certain nombre de travaux se sont orientés vers la recherche de nouvelles méthodes (séparation, enrichissement, manipulation génétique,. . . ), afin d'obtenir des huiles riches en ces substances. Nous avons retenu l'enrichissement enzymatique associé à la distillation à court trajet. Cette approche présente plusieurs avantages : elle requiert peu d'énergie et n'est pas de polluante par exemple. Cinq huiles ont été sélectionnées (bourrache, cameline, onagre, microalgue : Crypthecodinium cohnii et fongique : Mortierella alpina 1S-4) afin d'obtenir des solutions concentrées en acides gras polyinsaturés (respectivement GLA, ALA, GLA, DHA et AA). Nous avons d'abord, transestérifié chimiquement les TG des huiles en esters d'alcools légers. Ces derniers ont subi par la suite, une transestérification lipasique où les esters d'alcools légers les moins insaturés ont été transformés sélectivement en esters d'alcools lourds. A ce stade une étude poussée des conditions opératoires, du choix des alcools et du criblage des lipases a été menée. Deux distillations ont permis de séparer d'abord l'alcool des esters et ensuite les esters d'alcools légers des esters d'alcools lourds. Finalement, nous avons évalué l'efficacité de l'agitation du réacteur utilisé par une étude numérique des écoulements. De même, nous avons tenté d'expliquer par modélisation moléculaire une des raisons pour lesquelles la lipase transestérifie sélectivement les esters d'acides gras. Le procédé étudié aboutira au développement industriellement de l'enrichissement sélectif d'AGPI spécifique de plusieurs huiles
The w-3 and w-6 polyunsaturated fatty acids (PUFA) are essential for a human metabolism. Several research studies were therefore dedicated to develop new technologies (separation, enrichment, genetic manipulation,. . . ) in order to concentrate these substances in oils. We have chosen the enzymatic enrichment associated to a short pathway distillation. This approach presents several advantages such as a low input of energy and an environment friendly characteristic (solvent free process). Five oils are selected (borage, camelina, primrose, microalgae Crypthecodinium cohnii and fungi Mortierella alpina 1 S-4) in order to obtain a concentrated solution of PUFA (respectively GLA, ALA, GLA, DHA and AA). TG oils were first chemically transesterified into a lower alcohol esters. An enzymatic transesterification was then performed and transformed the lower alcohol esters into heavier ones. At this step, a detailed study was carried out to optimise the experimental conditions, to choice the alcohols and to screen the lipases. Two distillation steps allowed to separate first, the alcohol from the esters and second the lower alcohol esters from the heavier ones. Finally, the efficiency of the reactor mixing to be applied was evaluated using a numerical study of the fluid. The mechanism investigation of lipase's action to selectively transesterify the fatty acid esters was also attempted using molecular modelisation. The process studied and described herein led to an industrial development of the selective enrichment of specific PUFA in several oil extracts

Une voie d'accès aux cires est proposée et évaluée par catalyse enzymatique. Elle s'effectue à partir d'un mélange d'esters méthyliques (colza/tournesol) et d'alcool stéarique via une réaction de transestérification en présence de Lipozyme. L'originalité de ces travaux réside dans la simple mise en oeuvre des substrats et de l'enzyme immobilisée en réacteur contrôlé en température sans addition de solvant organique. L'obtention de rendements élevés est réalisée avec une faible quantité d'enzyme, des taux de conversion de 80 à 100 %, suivant le rapport molaire des substrats sont obtenus en 2 heures à 60 °C. L'influence du rapport molaire 1 oléate de méthyle : alcool stéarique 1 ainsi que de la température sont étudiés et donnent des valeurs optimales pour le ratio 1 1 : 0,5 1 à 60 °C. L'effet inhibiteur de l'alcool stéarique a été mis en évidence par une étude cinétique. La présence de limitations diffusionnelles de type externes a été montrée (milieu réactionnel/surface du support enzymatique). Après l'évaluation, l'optimisation de la mise en oeuvre a permis de faire progresser les performances. La validation du procédé a été vérifiée à plus grande échelle. Une autre enzyme immobilisée a été testée, le Novozym, qui permet d'obtenir un rendement optimal pour le mélange équimolaire. Cet avantage conduit à un produit exempt de substrat en fin de réaction. De plus, l'efficacité catalytique du Novozym (0,213 miri-1) est supérieure à celle du Lipozyme (0,144 miri ). Enfin, la réaction de transestérification a été examinée avec élimination simultanée du co-produit, le méthanol, au fur et à mesure de sa formation. Les deux préparations enzymatiques ont été testées en réacteurs fermé, ouvert et sous vide. Quelque soient les conditions, la réaction a'alcoolyse est plus rapide si le méthanol produit pendant la réaction est retiré du mélange. L'utilisation des ratios S1/S2=1 convient à un procédé particulièrement simple puisqu'il amène une production de cire exempte de co-substrat
Wax ester production has been investigated. Transesterification reaction has been realized from methyl ester mix (vegetable oils of rape and sunflower) and stearyl alcohol with Lipozyme. The alcoholysis reaction is controlled in solvent-free medium that is exclusively composed of the reactants and the enzyme. The transesterification is performed by simply mixing the two substrates in a temperature-controlled water bath under stirring. High yields are obtained with a Iow amount of Lipozyme, rate conversion from 80 to 100 % depending on molar ratio in 2 hours at the temperature of 60 °C. The balance between optimal working temperature and the molar ratio of substrates in such a complex medium appears to be 60 °C with a molar ratio I methyl oleate : stearyl alcohol of I 1: 0,5I. Substrate inhibition due to stearyl alcohol has been confirmed by a study of kinetic parameters. More, external diffusional limitations have been showed (reaction medium/surface of enzymatic support). Then, after evaluation, optimization of process has been performed. The validation of results has been verified at a large-scale process. Another enzymatic preparation has been tested. Novozym permits to obtain optimal yield for the equimolar mixing. This advantage directly led to a final product exempted of substrates. More, catalytic efficiency of Novozym (0,213 min-1) is higher than catalytic efficiency of Lipozyme (0,144 min-1). Finally, transesterification reaction has been examined with the elimination of the co-product formed, the methanol in proportion of producing. The two immobilised enzymes have been investigated in covered reactor, cap-opened reactor and under vacuum. More rapid is the methanol elimination, higher is the rate production of stearyl oleate. The use of substrate ratio S 1/Sz=l leads to direct stearyl waxes production exempted from reactive using simple but efficient way

Le biodiesel, considéré comme une solution pour remplacer le pétrodiesel est un sujet de recherche mondial. Un des principaux problèmes associés au développement industriel du biodiesel est la source de matière première ainsi que le procédé de transformation. Ainsi, la présente étude a pour but de trouver une source de matière première durable pour la production industrielle de biodiesel et de déterminer le procédé de transformation de la matière première, le plus approprié, ainsi que les meilleures conditions opératoires. Durant la première étape de ce projet, une source de matière première durable a été sélectionnée : les microalgues. Le procédé de transformation étudié est la transestérification enzymatique. L’huile d’olive, huile ayant une composition en acides gras similaires à celle de l’huile de la microalgue Chlorella protothecoides, a été choisie pour effectuer les réactions. Pendant la deuxième étape, le procédé de standardisation de la réaction (bioréacteur de 5 mL) consistait à faire varier : le type de catalyseur (lipases de Candida antarctica (Novozym® 435) et de Thermomyces lanuginosus (TL I150)), la concentration du catalyseur (7 à 14 % m/mhuile), la température de réaction (25 à 50 °C) et le ratio molaire alcool:huile (3:1 à 4:1) ; la vitesse d’agitation étant de 150 rpm pour toutes les réactions. Des techniques d’optimisation telle que la preincubation de l’enzyme ont été également essayées. Le rendement en esters alkyliques de la réaction de transestérification enzymatique de l’huile en fonction du temps est la variable de contrôle pour toutes les réactions. La standardisation des variables du procédé a été faite en fonction de la réduction du temps de réaction et du rendement en esters alkyliques. Un rendement élevé en esters alkyliques de 92 % (m/m) a été obtenu sous les conditions opératoires suivantes : une concentration de catalyseur (TL I150) de 7 % (m/mhuile), une température de réaction de 25 °C, un ratio molaire alcool:huile de 3:1 et un temps de réaction de 4 h ; la lipase a été preincubée pendant 6 h avant la réaction de transestérification. Le temps de réaction, un des paramètres importants lors du procédé de standardisation des variables, a été réduit de 24 à 4 h. Un autre paramètre significatif de la réaction est la température : une température de 25 °C a été utilisée; cette température de réaction est faible et rend le procédé au niveau industriel plus attrayant.

Cette étude a porté sur le développement de procédés continus performants de production d’esters à partir de l’huile de tournesol hautement oléique vierge ou raffinée en réacteurs enzymatiques à lit fixe, très productifs et stables dans le temps. Un procédé de transestérification continue en réacteur à lit fixe utilisant Novozyme 435 (lipase B de candida antarctica immobilisée sur Lewatit VP OC 1600), biocatalyseur non régio-spécifique, a été optimisé pour transformer de l’huile vierge de tournesol hautement oléique en esters butyliques. Les phénomènes de partition des composés polaires (phospholipides présents initialement dans l’huile, du glycérol co-produits etc.) entre milieu réactionnel et support enzymatique ont été gérés grâce à l’utilisation de tert-butanol, un solvant polaire. Les conditions assurant le meilleur compromis entre stabilité, productivité et rendements de production d’esters ont été obtenues pour une concentration initiale en huile de 500mM et un rapport molaire entre substrats de 5. De telles conditions permettent une productivité de 13,8 tonnes.an-1.kg de Novozyme 435-1. Le réacteur ainsi dimensionné s’est avéré stable pendant 50 jours consécutifs sans aucune perte d’activité, permettant de minimiser le coût élevé de l’enzyme. L’originalité du procédé est l’utilisation d’huiles vierges contenant des antioxydants naturels (phospholipides, tocophérols etc.). Nous avons démontré que ces composés mineurs sont préservés au cours du procédé de transestérification. Cela confère aux esters formés de remarquables propriétés de résistances à l’oxydation.La pertinence économique du procédé a été améliorée grâce au développement d’un nouveau biocatalyseur sur support hydrophobe (l’Accurel MP) permettant d’éviter toute adsorption de composés polaires. Une analyse économique du procédé (maximisation de la valeur nette actualisée) a permis de rationaliser les conditions optimales d’immobilisation. Une économie de l’ordre de 50% sur les coûts générés tout au long du temps de vie du procédé a pu ainsi être obtenue. En conditions de transestérification continue, aucune différence dans le profil de produits par rapport à Novozyme 435 n’a été observée. Finalement, une alternative à la transestérification directe de l‘huile a été envisagée. Une première phase d’hydrolyse de l’huile est suivie d’un procédé de récupération des acides gras qui sont dans un second temps estérifiés enzymatiquement. Pour réaliser cette dernière étape, le meilleur système réactionnel s’est avéré être le milieu sans solvant. Un réacteur continu d’estérification de l’acide oléique avec l’isobutanol a été optimisé. Cela a permis un réacteur stable pendant 54 jours consécutifs et respectant les critères des biotechnologies blanches. Une productivité annuelle de 126 tonnes.kg de Novozyme 435-1 a été atteinte. Cela représente une amélioration de la productivité d’un facteur 9,2 par rapport au procédé de transestérification développée précédemment
This work focused on the development of efficient continuous processes for the production of esters from crude or refined high oleic sunflower oil with enzymatic packed bed reactor presenting high levels of productivity and stability. A process of continuous transesterification in packed bed reactor using Novozyme 435 (lipase B from Candida antarctica immobilized onto Lewatit VP OC 1600), a non-specific biocatalyst, was optimized to transformation of high-oleic sunflower oil into butylic esters. The phenomena of partition of polar compounds (phospholipids found in crude oils, produced glycerol etc.) between the reaction medium and the enzymatic support were managed using tert-butanol, a polar solvent. The conditions that enabled the best compromise between stability, productivity and production yields were obtained with an initial oil concentration of 500 mM and a molar ratio between co-substrates of 5. Such conditions enabled a productivity of 13.8 tons.kg-1.kg of Novozyme 435-1 to be reached. The reactor exhibited great stability for 50 consecutive days without any loss of activity. That enabled to minimize the high costs of the enzyme. The novelty of the process was the use of crude oils, containing high levels of natural antioxidants (phospholipids, tocopherols etc.). We demonstrated that these minor components of oils were preserved during the transesterification process. It conferred the synthesized esters some remarkable properties of oxidative resistance.The economic relevance of the process was improved thanks to the development of a new biocatalyst onto a very hydrophobic support (Accurel MP) in order to avoid any adsorptions of polar compounds. An economic analysis (maximisation of the net present value) enabled to rationalize the optimal immobilisation conditions. Over the whole process, it enabled a 50% saving on the global expenses.__ In continuous transesterification conditions, no difference in the product profile was noticed between the new biocatalyst and Novozyme 435.Finally, an alternative to direct transesterification of oil was considered. A first stage of oil hydrolysis is followed by a process of fatty acid recovery and a stage of enzymatic esterification into esters. In order to realize/complete this last stage, the best reaction system was a solvent-free medium. A continuous reactor for the esterification of oleic acid with isobutanol was optimized. It enabled a reactor stable/a stable reactor for 54 consecutive days, respecting the conditions of white biotechnologies. An annual productivity of 126 tons.year-1.kg of Novozyme 435-1 was reached. That represented a productivity improvement by a factor of 9.2 in comparison with the transesterification process

La synthèse enzymatique de triacylglycérols d'acides gras polyinsatures n-3 (trieicosapentaénoylglycerol) et tridocosahexaénoylglycerol), molécules d'intérêt nutritionnel et thérapeutique, a partir de glycérol et d'ester éthylique d'acide gras a été étudiée dans différents milieux non-conventionnels (milieux a faible teneur en eau). La lipase b immobilisée de Candida antarctica (novozym sp 435) a été choisie comme biocatalyseur. Trois procédés ont été développés et compares pour mettre en oeuvre cette transestérification. Tout d'abord, l'étude de la réaction s'est faite sans solvant, dans un réacteur ouvert, avec un barbotage d'azote dans la partie inferieure du réacteur. Ce flux d'inerte permet de disperser correctement le glycérol et le biocatalyseur dans la phase lipidique, d'entrainer l'éthanol forme et donc d'orienter la réaction, réversible, vers la synthèse de triacylglycérols, et enfin, de limiter les réactions d'oxydation des acides gras. Après 10 heures de réaction, a 80°c, l'ester éthylique d'acide gras est totalement consomme et le milieu réactionnel constitue majoritairement de triacylglycérol (rendement de conversion : 80%). Dans un deuxième temps la transestérification a été effectuée, sans solvant, sous pression réduite. Des problèmes d'homogénéisation du milieu et de dégradation des acides gras ont été rencontrés. Après 10 heures de réaction, à 80°c et 100 mbar, le pourcentage de conversion de l'ester éthylique d'acide gras en triacylglycérol n'est que de 37%. Enfin, la synthèse a été envisagée en réacteur ferme avec comme solvant le dioxyde de carbone proche de l'état supercritique. Les meilleurs résultats ont été obtenus après 5 heures de réaction à 80°c et 100 bars, le pourcentage de conversion de l'ester éthylique d'acide gras en triacylglycérol est alors de 24%. Au-delà de 5 heures, l'éthanol étant présent en trop grandes quantités dans le milieu, la réaction inverse de synthèse d'ester éthylique d'acide gras a partir de triacylglycérol a lieu.

L'étude était centrée sur les effets de l'eau sur l'activité de la lipase en milieu peu hydraté. Trois modèles réactionnels été comparés : l'estérification, qui conduit à une production d'eau au niveau du site catalytique de l'enzyme, la transestérifacation, qui ne conduit pas à une production d'eau, et le couplage de ces deux réactions. Le système testé comprenait uniquement une phase solide contenant la préparation enzymatique et une phase liquide ne contenant que les surfactants. Des réacteurs fermés et ouverts ont été utilisés. L’étude a montré que dans ce type de milieu, la lipase peut catalyser la transestérification et l'estérification sur un grand nombre d'acides gras, d'esters et d'alcools primaires et secondaires. L'eau produite au cours de l'estérification est un activateur des préparations enzymatiques peut hydratées. L'enzyme est très sensible à l'activité de l'eau (aw) de son environnement. De très faibles quantités d'eau produites peuvent accroître sensiblement l'aw et activer l'enzyme. Pour la première fois, l'aw a été mesurée en continu, et diverses méthodes ont été mises au point pour réguler l'activité enzymatique en jouant sur l'eau produite au cours de la catalyse ou présente dans les phases solide et liquide au début de la réaction. Nous avons montré que la polarité des substrats très concentrés doit être prise en compte car elle affecte la partition de l'eau entre les deux phases du système et l'état d'hydratation de la préparation enzymatique. Cette étude a permis de mettre au point une méthode pour comparer les vitesses initiales de réaction en présence de substrats de polarité différente

L’objectif général de ce travail est l'étude d'un procédé de synthese enzymatique de nouveaux tensioactifs non ioniques : les sucroesters. Ce procédé met en œuvre une lipase immobilisée de Candida antartica et se déroule dans un milieu présentant une faible teneur en eau. Cette étude comporte quatre parties au cours desquelles les paramètres biochimiques et physico-chimiques de cette synthese, le procédé de purification et quelques propriétés tensioactives de ces molécules ont été étudiés. Cette étude a porté plus particulièrement sur la synthese d'oléates de fructose, mais le procédé est applicable à la synthese d'autres sucroesters. Nous avons notamment montré que l'estérification directe est moins performante que la transestérification car elle s'accompagne d'une production d'eau favorisant l'hydrolyse des liaisons esters. Le rapport molaire sucre/donneur d'acyle affecte l'activité de la lipase en modifiant l'hydrophobicité du milieu. Par ailleurs, le méthanol produit par transestérification doit être éliminé car il inhibe l'enzyme. En augmentant la température ou en réduisant la pression, le rendement de conversion est amélioré (environ 90%) et la concentration finale en monooléates de fructose est supérieure a 50 g L-1. Toutefois, l'élimination du méthanol par réduction de la pression est préférable pour limiter la dénaturation de l'enzyme. La réalisation de ces synthèses avec addition de fructose pendant la réaction permet de produire 85 g. L-1 monooléates de fructose, soit 72% de conversion. Il semble qu'au-delà de cette concentration, les sucroesters inhibent l'enzyme. Un procédé de purification combinant des techniques de filtration, de distillation, d'extraction liquide/liquide et de chromatographie liquide a été envisagé. L'analyse structurale des produits purifiés a montré la présence de quatre différents isomères du monooleylfructose. La dernière partie de cette étude vise à caractériser quelques unes de leurs propriétés tensioactives, dont la tension de surface de solutions aqueuses et leur pouvoir émulsifiant.

L'etude comparative du comportement cinetique de l'enzyme dans un solvant organique conventionnel (n-hexane) et un fluide supercritique (co#2sc) a ete realisee. Deux reactions enzymatiques, l'esterification modele simple et la transesterification pour la synthese de l'acetate de geranyle catalysee par la lipase immobilisee de mucor miehei (lyposyme) sont etudiees. La stabilite enzymatique est excellente et similaire dans les deux milieux. La pression (130 bars) n'affecte pas sensiblement la stabilite de l'enzyme, par contre, des facteurs tels que la temperature et la quantite d'eau. Selon le milieu considere, la quantite d'eau optimale ajoutee est differente. Les isothermes d'adsorption nous ont permis de determiner la quantite d'eau reelle autour du support enzymatique. Le meme optimum en eau de 10% (g/g) est obtenu dans les deux milieux et dans les deux reactions etudiees. L'etude des reactions d'esterification et transesterification realisees en milieu supercritique et dans l'hexane, contenant une teneur en eau optimale identique, nous a permis de montrer la similitude du mecanisme catalytique de la lipase de type ping-pong bi-bi avec inhibition par un des substrats dans les deux solvants. Cependant la vitesse maximale et les constantes cinetiques apparentes d'affinite sont differentes. Plusieurs hypotheses sont suggerees pour expliquer ce phenomene

Le travail rapporté concerne la synthèse stéréosélective d'acides alpha-aminocyclobctanecarboxyliques béta-substitués, notamment deux dérivés cyclobutaniques d'aminoacides naturels (ornithine, sérine). Ces acides aminés ont des activités biologiques potentielles. L'étape clé de leur synthèse est une réaction asymétrique de Strecker sur des cyclobutanones 2-substituées. La première partie expose deux nouvelles méthodes de synthèse de cyclobutanones 2-substituées opt. Actives. La première est basée sur une transestérification enzymatique de la 2-hydroxyclobutanone ou de dérivés pour donner l'alcool et l'acétate correspondants énantiopurs avec d'excellents excès énantiomériques. Ces deux composés sont ensuite transformés en les deux énantiomères de la 2-benzyloxycyclobutanone. La deuxième méthode est basée sur l'alkylation asymétrique d'imines ou hydrazones chirales dérivées de la cyclobutanone. Les diverses 2-alkyl-cyclobutanones opt. Actives, dont certaines sont détectées dans les aliments irradiés, sont obtenues avec de bons rdts et de bons excès énantiomériques. La seconde partie décrit la synthèse d'analogues cyctobutaniques de la serine et de l'otnithine dont l'étape clé est une réaction de Strecker sur des cyclobutanones chirales ou racémiques. La diastéréosélectivé de cette réaction en fonction des conditions expérimentales est précisée. L a configuration absolue de chaque aminonitrile obtenu est déterminée par diffraction de RX. Ces nitriles donnent pour la première fois en 3 étapes les analogues de la serine et de l'omithine. Dans cette partie est aussi rapportée une séquence asymétrique one-pot alkylation-Strecker pour obtenir rapidement des acides aminés
This work deals with the stereoselective synthesis of alpha-aminocyclobutanecarboxylic acids in particular two cyclobutanic derivatives of natural amino acids: ornithine and serine. These aminoacids could potentially have biological properties. In the new pathway the key-step is based on a stereoselective one-pot asymmetric Strecker-reaction from 2-substituted cyclobutanones. In the first part, we report two new synthetic methods of optically active 2-substituted cyclobutanones. The first one is based on enzymatic transesterification of 2-hydroxyclobutanone or derivatives to give corresponding enantiopure alcohol and acetate with good yields and excellent enantiomeric excesses. Both compounds are transformed in few steps into both enantiomers of 2-benzyloxycyclobutanone. The second method describes an asymmetric alkylation of chiral imines or hydrazones prepared from cyclobutanones. Thus optically active 2-alkyl-cyclobutanones, some of them are detected in irradiated foodstuffs, are obtained with good yields and good enantiomeric excesses. In the second part, we describe the synthesis of cyclobutanic amino acid analogues of serine and ornithine. The key-step is an asymmetric Strecker reaction from chiral or racemic cyclobutanones, in which the diastereoselectivity under various conditions is specified and absolute configurations of amino nitriles are determined by X-ray crystallographic analysis. These amino nitriles give for the first time in 3 steps serine and ornithine derivatives. In this part we also report a one-pot asymmetric alkylation-Strecker reaction to obtain optically active beta-alkylated amino nitriles, which are potentially precursors of aminoacids

Les lipases présentent un grand intérêt pour la synthèse du Biodiesel, carburant alternatif au gasoil, généralement obtenu d’une transestérification des triacylglycérols avec un alcool, la plupart du temps le méthanol. Pour avoir un ester issu totalement de la biomasse végétale, l’éthanol peut être utilisé comme accepteur d’acyle. L’objectif de cette étude est de développer des procédés enzymatiques de synthèses d’esters éthyliques catalysés par les lipases végétales sous leur forme brute avec des intrants (huile et alcool) d’origine végétale. D’abord, elle a consisté à la mise en évidence d’une activité lipasique pour des réactions d’éthanolyse et d’hydrolyse par les graines d’A. suarezensis, d’A. grandidieri, de J. curcas, de J. mahafalensis, de M. oleifera et de M. drouhardii. Ensuite, les influences de certains facteurs sur la capacité des extraits le(s) plus actif(s) à réaliser des réactions d’éthanolyse en milieux non aqueux, aqueux et en utilisant comme substrat leurs lipides natifs ont été étudiées. Enfin, des essais de combustion ont été menés sur un moteur monocylindre à injection directe pour l’étude des performances, des émissions et de la combustion du biodiesel produit et de ses mélanges avec le gasoil. Toutes les graines germées sont dotées d’une activité en hydrolyse et éthanolyse. La poudre d’A. grandidieri est la plus active en éthanolyse. Avec cette dernière, deux procédés ont pu être développés : un en milieu non aqueux et un en milieu aqueux (respectivement un rendement de 96,2 % et 96,3 %). Elle est aussi capable de transformer ses lipides natifs sans extraction au préalable en esters éthyliques (rendement de 91,6%). Les performances et la combustion du biodiesel et de ses mélanges sont similaires à celle du gasoil. Une réduction significative des émissions de CO, NOX, CO2 et SO2 au cours de la combustion du biodiesel et de ses mélanges est observée. Ces résultats montrent que les lipases végétales exploitées sous leurs formes brutes peuvent être une alternative aux lipases microbiennes et aux catalyseurs chimiques
There is a great interest in the use of lipase in the production of Biodiesel, alternative diesel fuel, usually obtained from a transesterification of triacylglycerol with an alcohol which is mostly methanol. To have a biodiesel derived totally from vegetable biomass, ethanol must be explored as acyl acceptor. The objective of this work is to develop enzymatic processes for the synthesis of ethyl esters catalyzed by plant lipases in their crude form with all inputs (oil and alcohol) of origin plant. Firstly, the hydrolysis and ethanolysis activities of A. suarezensis, A. grandidieri, J. curcas, J. mahafalensis, M. oleifera and M. drouhardii seeds were assessed. Subsequently, the most active(s) plant lipase(s) was selected to study the effects of some factors on their ability to carry out ethanolysis reactions in nonaqueous, aqueous media and using as substrate their lipids. Finally, combustion tests were carried out on a single cylinder direct injection engine to study the performance, emissions and combustion of biodiesel and its mixture with diesel. All germinated seeds have hydrolysis and ethanolysis activity. The most active in ethanolysis is the powder from A. grandidieri seed. With this powder, two processes were developed: one in nonaquous medium and the other in aqueous medium (yield of 96.2 % and 96.3 %, respectively). Lipase from A. grandidieri seed is able to transesterify its oils without an extraction thereof into ethyl ester. Performance and combustion characteristics of biodiesel and its mixtures are similar to that of diesel fuel. A significant reduction in CO, NOX, CO2 and SO2 emissions during the combustion of biodiesel and its mixtures is observed. These results show that plant lipases exploited in their crude form can be an alternative to microbial lipases and chemical catalysts