Academic literature on the topic 'Transferencia de embriones congelados'

Los avances en los protocolos de vitrificación y los resultados obtenidos tras la transferencia de embriones congelados han dado lugar a una versión distinta de los ciclos estándar de reproducción asistida: los ciclos freeze-all. Independientemente de su uso frente a las indicaciones más comunes (progesterona elevada, riesgo de hiperestimulación, entre otros), este nuevo concepto hoy representa una práctica habitual en muchas clínicas siendo aplicado a todas las pacientes. En este artículo analizaremos los distintos factores que pudieron haber contribuido a este cambio de política y la evidencia científica en relación al tema. Basados en esta evidencia concluiremos si las clínicas deberían cambiar su forma de trabajo pasando de transferencias de embriones frescos a solo transferencia de embriones congelados o si deberíamos mantener el protocolo estándar.

Durante los años 2012-2017 se aplicó la técnica de multiovulación y transferencia de embriones (MOET) en animales Holstein y Girolando F1 en la Unidad de Reproducción Animal (URA), de la Escuela de Zootecnia de la Universidad de Costa Rica, para la creación y evaluación de un hato Girolando en las condiciones del Atlántico costarricense. Las hembras donantes de embriones se seleccionaron tanto en fincas externas como en la URA. La selección en fincas externas se realizó a través de la información de los registros de raza y de finca, mientras que en URA, a través de los datos de lactancia y desarrollo de las crías. Además, se realizó una estimación parcial de costos para la producción de embriones. En los animales evaluados en URA, como parte del análisis para la selección de donantes de embriones, el promedio de producción diaria de leche fue de 11,1 kg, con una duración de la lactancia promedio de 296 días, a 1 ordeño diario y con ternero al pie. El destete de las crías se realizó a los 7 meses de edad, con un peso promedio de las crías de 255 kg (promedio de 244 kg en hembras y 262 kg en machos). En total, tanto en URA como en fincas externas, se realizaron 38 colectas en 24 donadoras seleccionadas, de las cuales se colectaron 381 estructuras, un 73,5 % fertilizadas y un 26,5 % infertilizadas. De aquellas estructuras fertilizadas (embriones), un 47,3% fueron consideradas transferibles (calidad 1 y 2 de acuerdo a la Sociedad Internacional de Transferencia de Embriones, IETS), para un promedio general de 4,8 embriones transferibles por colecta. Se realizaron 83 transferencias de embrión en fresco y 34 transferencias de embriones congelados, de los cuales se obtuvo tasas de preñez de 33,7% (28/83) y 5,9% (2/34), respectivamente. Las bajas tasas de preñez obtenidas, comparadas con lo visto en literatura, no son resultados normales, pero son las relacionadas con este estudio en particular. El costo para producir un embrión, por concepto de productos consumibles, hormonales y semen fue de US$62,5 dólares. La producción y transferencia de embriones colaboró en la creación y desarrollo del hato Girolando de la Unidad de Reproducción Animal de la Universidad de Costa Rica.

<p>El presente estudio se realizó con el fin de evaluar la eficiencia reproductiva, medida en porcentaje de novillas preñadas, de tres razas bovinas, como receptoras de embriones. En el altiplano Cundiboyacense se han realizado pocos estudios tendientes a determinar cuáles razas, aptas para el medio, son las que pueden brindar mejores tasas de concepción, como receptoras, en transferencia de embriones. Los resultados se sometieron a un análisis estadístico descriptivo, utilizando los programas Excel y Minitab (Chi cuadrado x2), con variables de tipo cuantitativo. La selección de receptoras se hizo con base en la calidad de cuerpo lúteo, normalidad del tracto reproductivo, CC entre 2 y 3 en una escala de 1 (muy flaca) a 5 (cebada). La transferencia de embriones se realizó por el método no quirúrgico y se obtuvo un porcentaje de gestación en la raza Normando de 63%; en la Holstein, de 55.5%, y en la raza Brangus, de 44.4%. El protocolo utilizado fue Ovisynch, y los embriones transferidos fueron congelados y descongelados para el momento de transferirlos.</p>

La inseminación intrauterina (IIU) es la primera opción de tratamiento de la pareja infértil, en pacientes con infertilidad inexplicada, endometriosis mínima y leve, subfertilidad por factor cervical o subfertilidad por factor masculino leve. Pero su efectividad ha sido cuestionada por sus bajas tasas de éxito y los probables riesgos como el embarazo múltiple y el síndrome de hiperestimulación ovárica. A pesar de ello, sigue siendo una técnica ampliamente usada por su simplicidad y su bajo costo, lo cual le da algunas ventajas sobre la fertilización in vitro. La FIV ofrece ventajas, como obtener mayores tasas de éxito y la posibilidad de transferencia de embrión único y transferencia posterior de embriones congelados, con lo cual disminuyen los riesgos, a pesar de ser mucho más costosa. Esta revisión trata de establecer cuál es el estado de la inseminación intrauterina en el momento actual, si es que todavía sigue vigente y tiene un espacio dentro de los tratamientos de la pareja infértil o si esta en retirada a costa de la FIV.

El objetivo de este artículo es informar sobre el éxito de un procedimiento de criopreservación de embriones equinos, a fin de conseguir una preñez viable. Se colectaron embriones equinos al día 6‑6,5 (< 300 μm; n = 24) y se sometieron a dos técnicas de criopreservación: grupo 1 (n = 12), vitrificados exponiéndolos a una solución VS1 (Gli [1,4 M]) 5 min, VS2 (Gli [1,4 M] + EG [3,6 M]) y VS3 (Gli [3,4 M] + EG [4,6 M] 1 min. Se empacaron en pajillas de 0,25 ml y se sumergieron en nitrógeno líquido; grupo 2 (n = 12), congelación lenta: expuestos a una solución de congelación (1,8 M de EG + 0,1 M sucrosa) por 10 min, empacados en pajillas de 0,25 ml, llevados al congelador de embriones, exponiéndolos a una curva de congelación y sumergidos en nitrógeno líquido. Posterior a la descongelación, a los 24 embriones se les removió el crioprotector mediante un paso; fueron sumergidos en medio de cultivo DMEM/F12 + 10 % de suero fetal bovino (SFB) e incubados bajo atmosfera controlada (5 % CO2, 5 % N2, 90 % O2) por 48 h. Se evaluó el desarrollo embrionario en el 75 % de los embriones vitrificados (n = 4); el 20 % de los embriones fueron sometidos a congelación lenta (n = 1). No se observaron diferencias significativas en los grupos respecto al desarrollo embrionario, pero sí mayor tendencia de supervivencia en los embriones vitrificados. Igualmente, uno de estos embriones vitrificados fue transferido a una receptora, se logró una preñez viable y el nacimiento de un potro vivo.

Objetivos: Conocer las tasas de embarazo e implantación del procedimientos de ovodonación en un solo intento y comparar con los resultados de otros centros. Diseño: Estudio descriptivo, retrospectivo. Lugar: Centro de infertilidad y Reproducción Procrear. Participantes: Pacientes que se sometieron a su primer intento de fecundación in vitro con ovodonacion. Intervenciones: Estudio de la 26 pacientes que se sometieron a su primer intento de fecundación in vitro con ovulación el año 2005. La pacientes que tenían menstruación recibion supresión hipofisiaria el día 21 del ciclo previo, para luego iniciar la preparación endometrial el primer día del ciclo menstrual, sincronizando al ciclo de estimulación ovárica controlada de la donante. Se hizo firmar los consentimientos informados en cada caso y se uso el programa spss12 para el análisis. Principales medidas de resultados: Tasas de embarazo implantación. Resultados: Se revisó 26 ciclos de ovodonación. La edad promedio fue 41,7 ± 3,7 años (rango 32 a 50 años), 20% menor de 40 años y 80% mayor o igual a 40 años. Los diagnósticos fueron 8 (30,8%) con menopausia fisiológica, 17 (65,4%) bajas respondedoras o con reserva ovárica disminuida y 1 (3,8%), enfermedad congénita hereditaria. La preparación del endometrio duró 21,7 ± 6,1 días (rango 12 a 32 días), logrando un grosor endometrial de 11,9 ± 2,9 mm (rango 8 a 19 mm). Se aspiró por donante 11,8 ± 6,4 óvulos (rango 4 a 24 óvulos), fecundándose por paciente 7,7 ± 4,4 óvulos (rango 3 a 18 óvulos); en 2 pacientes se congeló los óvulos, por lo que se realizó ICSI. Se transfirió por paciente 2,8 ± 0,4 embriones (rango 2 a 3 embriones). La transferencia embrionaria se realizó 24 casos (92,3%) en el día 3 y en 2 (7,7%) en el día 5. Se logró una tasa de embarazo de 65,4 (17/26), con una tasa de implantación de 61,5% (16/26); 31,3% (5/16) fue embarazo único, 56,3% (9/16) embarazo gemelar y 12,5% (2/16) embarazo triple. En los 2 casos que se fecundó con óvulos congelados, no hubo embarazo. Conclusiones: La ovodonacion resultó una técnica muy eficaz, con tasa de embarazo en un solo intento de 65,4%, tasa de embarazo clínico de 61,5% y una tasa de implantación de 39,7%: se transfirió un máximo de 3 embriones. El embarazo múltiple resultó elevado, lo que requiere plantear estrategias para disminuirlo, sin afectar la tasa de éxito.

Introducción: La fecundación in vitro (FIV) se asocia a peores resultados maternos y perinatales, existiendo controversia sobre la causas. El advenimiento de nuevos estudios en el tema justifican la investigación de la seguridad de la FIV. El objetivo principal de esta tesis es evaluar los efectos de las técnicas de reproducción asistida sobre los resultados maternos y perinatales en pacientes sometidas a FIV autóloga (FIV AO) con transferencia de embriones en fresco (TEF) y congelados (TEC) y FIV con donación de ovocitos (FIV DO). Material y métodos: A fin de poder alcanzar el objetivo principal, esta tesis ha sido dividida en tres capítulos. Capítulo 1: Se realizó un estudio de cohortes retrospectivo utilizando datos del Registro Nacional de Actividad en Reproducción Humana Asistida de España entre el año 2010 y 2015, analizando la edad gestacional parto y tasa de parto prematuro (PP) de dos poblaciones diferentes: FIV AO y FIV DO. Capítulo 2: Revisión sistemática y metanálisis de estudios que compararon los resultados maternos y perinatales de embarazos únicos obtenidos por FIV con TEF versus TEC. Las variables incluyeron: PP, bajo peso al nacer (BPN), muy bajo peso al nacer (MBPN), pequeño para la edad gestacional (PEG), grande para la edad gestacional (GEG), macrosomía, preeclampsia (PE), preeclampsia severa (PES), diabetes gestacional (DG), desprendimiento prematuro de placenta normoinserta (DPPNI), placenta previa, hemorragia postparto y ruptura prematura de membranas (RPM). Capítulo 3: Revisión sistemática y metanálisis de estudios que compararon los resultados maternos y perinatales de embarazos únicos obtenidos por FIV DO versus FIV AO. Las variables incluyeron síndrome hipertensivo del embarazo (SHE), hipertensión inducida por el embarazo (PIH), PE, PES, PP, PP temprano, BPN, MBPN, cesárea, DG, RPM, placenta previa, DPPNI, y hemorragia postparto. Resultados: Capítulo 1: Se analizaron 41022 FIV AO (28754 TEF y 12268 TEC) observándose una mayor proporción de PP en TEF comparado con el grupo TEC (P .01). En el grupo de FIV DO, con un total de 19941 casos (12394 TEF y 7547 TEC) no se observaron diferencias en cuanto al parto prematuro en ninguno de los grupos al comparar TEF versus TEC. Capítulo 2: 35 estudios se incluyeron en el análisis. TEC se asoció con un riesgo menor para PP (RR 0.89; IC95% 0.82, 0.97), BPN (RR 0.73; IC95% 0.69, 0.78), MBPN (RR 0.63; IC95% 0.60, 0.66), PEG (RR 0.63; IC95% 0.60, 0.66); y un riesgo mayor para GEG (RR 1.53; IC95% 1.48, 1.58), macrosomía (RR 1.72; IC95% 1.65, 1.78), PE (RR 1.20; IC95% 1.06, 1.35) y PES (RR 1.96; IC95% 1.33, 2.88). No hubo diferencias estadísticamente significativas para el riesgo de DG y RPM. Capítulo 3: 23 estudios fueron incluidos en el análisis. FIV DO se asocia con un riesgo mayor de SHE (OR 2.63, 2.17-3.18), PE (OR 2.64; 2.29-3.04), PES (OR 3.22; 2.30-4.49), PP (OR 1.57; 1.33-1.86), BPN (OR 1.25, 1.20-1.30). No hubo diferencias estadísticamente significativas en cuanto al riesgo de PP ni BPN luego de ajustar por PE. Conclusiones: Los embarazos obtenidos por FIV AO con TEC presentan un menor riesgo de PP y BPN comparado con FIV AO con TEF. Los embarazos obtenidos por FIV AO con TEC presentan mayor riesgo de SHE y PE comparado con FIV AO con TEF. Los embarazos obtenidos por FIV DO presentan mayor riesgo de PP, BPN y SHE y PE comparado con FIV AO.
Introduction: In vitro fertilization (IVF) is associated with adverse maternal and perinatal outcomes and there is controversy about the causes. The publication of new studies on the subject justify the investigation of the safety of IVF. The main objective of this thesis is to evaluate the effects of assisted reproduction techniques on maternal and perinatal outcomes in patients undergoing autologous IVF (IVF AO) with fresh embryo transfer (ET) and frozen embryo transfer (FET); and IVF with oocyte donation (IVF OD). Methods: In order to achieve the main objective, this thesis has been divided into three chapters. Chapter 1: A retrospective cohort study was conducted using data from the National Registry of Activity in Assisted Human Reproduction of Spain between 2010 to 2015, analyzing the gestational age at delivery and the preterm birth (PB) rate of two different populations: IVF AO and IVF OD. Chapter 2: Systematic review and meta-analysis of studies comparing maternal and perinatal outcomes of singleton pregnancies after IVF with fresh ET versus FET. Outcomes included PB, low birth weight (LBW), very low birth weight (VLBW), small for gestational age (SGA), large for gestational age (LGA), macrosomia, preeclampsia (PE), severe PE, gestational diabetes (GD), placental abruption, placenta previa, postpartum hemorrhage and premature rupture of membranes (PROM). Chapter 3: Systematic review and meta-analysis of studies comparing maternal and perinatal outcomes of singleton pregnancies obtained by IVF OD versus IVF AO. Outcomes included hypertensive disorders of pregnancy (HDP), PE, PES, pregnancy induced hypertension (PIH), PB, early PB, LBW, VLBW, cesarean section, GD, PROM, placenta previa, placental abruption, and postpartum hemorrhage. Results: Chapter 1: 41022 IVF AO cases (28754 fresh ET and 12268 FET) were analyzed, with a higher proportion of PB in fresh ET group compared to FET group (P .01). In the IVF OD group, with a total of 19941 cases (12394 fresh ET and 7547 FET), no differences were observed between fresh ET and FET. Chapter 2: 35 studies were included in the analysis. FET was associated with a lower risk of PB (RR 0.89, 95%CI 0.82, 0.97), LBW (RR 0.73, 95%CI 0.69, 0.78), VLBW (RR 0.63, 95%CI 0.60, 0.66) and SGA (RR 0.63, 95%CI 0.60, 0.66); and a higher risk of LGA (RR 1.53; 95%CI 1.48, 1.58), macrosomía (RR 1.72; 95%CI 1.65, 1.78), PE (RR 1.20, 95%CI 1.06, 1.35) and severe PE (RR 1.96, 95%CI 1.33, 2.88). There were no statistically significant differences for the risk of GD and PROM. Chapter 3: 23 studies were included. IVF-OD is associated with a higher risk of hypertensive disorders in pregnancy (OR 2.63, 2.17-3.18), preeclampsia (OR 2.64; 2.29-3.04), severe preeclampsia (OR 3.22; 2.30-4.49), pregnancy induced hypertension (OR 2.16; 1.79-2.62), preterm birth (OR 1.57; 1.33-1.86), low birth weight (OR 1.25, 1.20-1.30). There was no significant difference in the risk of preterm birth or low birth weight when adjusted for preeclampsia.. Conclusions: Pregnancies after IVF AO and FET have a lower risk of PB and LBW compared to IVF AO and fresh ET. Pregnancies after IVF AO and FET have a higher risk of PE compared with IVF AO and fresh ET. Pregnancies after IVF OD have a higher risk of PB, LBW and HDP and PE compared to IVF AO.

Orientador: Vivaldo Silveira Junior
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos
Made available in DSpace on 2018-07-27T07:58:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Resende_JaimeVilelade_D.pdf: 62778372 bytes, checksum: aaa45871b399f2a9e6a5b643791dace6 (MD5) Previous issue date: 2001
Resumo: O resumo podera ser visualizado no texto completo da tese digital
Abstract: The abstract is available with the full electronic digital document
Doutorado
Doutor em Engenharia de Alimentos

Las técnicas de producción artificial (TRA) generan vida humana desprovista de familia. Nuestro objetivo general fue establecer los criterios bioéticos y biojurídicos para modificar la norma sobre las TRA en el Perú. Nos propusimos tres objetivos específicos: 1) Analizar el contenido y consecuencias de las TRA; 2) Analizar el vigente artículo 7° de la Ley N° 26842 – Ley General de Salud (LGS) y una de sus propuestas modificatorias de la comisión del Ministro de Justicia y Derechos Humanos, y 3) Establecer los criterios bioéticos y biojurídicos para regular las TRA, derogando el artículo 7 de la LGS. Y, proponiendo un proyecto de ley. La investigación de tipo cualitativa mediante el método bibliográfico, para establecer relaciones teórico-doctrinarias, nos permitió conocer en profundidad el artículo 7 de la LGS, e identificar la naturaleza profunda del problema de las TRA. Para el abordaje descriptivo, explicativo e interpretativo, recurrimos a las fichas bibliográficas, textuales y de resumen; para recoger, almacenar, organizar y presentar la información extraída de fuentes provenientes de 51 autores desde: 26 libros, 2 artículos de revistas, 5 tesis, 12 normas legales, 28 linkografías. El procedimiento se destinó a elegir el tema de la investigación. La primera recopilación de datos bibliográficos nos permitió conocer en profundidad las TRA y el contenido del Artículo 7° de la LGS. La bibliografía adicional nos otorgó una sólida base de conocimiento sobre las TRA. El análisis cualitativo y de documentos nos permitió conocer la situación legal y de hecho de las TRA en el Perú. Mediante el abordaje metodológico antropológico y jurídico, analizamos los documentos mediante un enfoque científico-humanista. Los criterios éticos para el tema de fondo se enmarcaron en la interdisciplinariedad de la bioética y la búsqueda de un estatuto jurídico del concebido y los límites éticos que deben regir la ciencia y la tecnología. Los criterios éticos para la investigación formal fueron la verdad del registro y análisis de documentos de la referencia bibliográfica, y el uso de la información con respeto a la propiedad intelectual. Los criterios de rigor científico fueron la claridad para el desarrollo de los objetivos, y la credibilidad y profundidad de las fuentes de información. Los principales resultados apuntan a comprender que el ordenamiento jurídico del Perú es proteccionista del concebido, pero no el artículo 7 de la LGS que autorizó las TRA, las que han escapado del control normativo, por lo que implican riesgos para la vida y la salud de los embriones humanos producidos. Nuestra investigación se centra en determinar los criterios bioéticos y biojurídicos, para que una norma regule las biotecnologías del inicio de la vida prohibiendo las TRA, por respeto al derecho de los embriones humanos, acorde a su estatuto biológico, ontológico y jurídico.
Tesis

El presente trabajo se realizó con el propósito de evaluar el efecto de la transferencia embrionaria ipsilateral y contralateral a la posición del cuerpo lúteo sobre la tasa de preñez en llamas. Se utilizaron 43 llamas hembras receptoras de 4 a 6 años, distribuidas aleatoriamente en 4 grupos de estudio: G1 (n=10): Cuerpo lúteo en ovario derecho y transferencia ipsilateral, G2 (n=10): Cuerpo lúteo en ovario derecho y transferencia contralateral, G3 (n=15): Cuerpo lúteo en ovario izquierdo y transferencia ipsilateral y G4 (n=8): Cuerpo lúteo en ovario izquierdo y transferencia contralateral. Se utilizaron 10 llamas hembras como donadoras de embriones, las cuales fueron sincronizadas con LH (1ml), superovuladas con 1000 UI de eCG y se provocó luteólisis con prostaglandina (1ml), siendo empadradas posteriormente. El día del empadre las llamas receptoras recibieron tratamiento con LH, con el propósito de sincronizarlas con las donadoras. Siete días post empadre se realizó el lavado uterino para la recolección, evaluación y transferencia de los embriones. La transferencia embrionaria a los grupos experimentales se realizó con embriones frescos el mismo día. Los resultados obtenidos señalan una tasa de preñez de 60% (G1) y 75% (G3) en las hembras con transferencia embrionaria ipsilateral derecha e izquierda respectivamente, mientras que en la transferencia contralateral derecha e izquierda fueron 30% (G2) y 25%(G4) respectivamente. Sin embargo, no se registraron diferencias significativas (p>0.05) entre el grupo G1 con los grupos G2, G3 y G4, además G2 no muestra diferencias significativas (p>0.05) con G4. Mientras que se encontró diferencia (p menor 0.05) entre el grupo G3 con los grupos G2 y G4. Estos resultados indicarían una mayor tasa de sobrevivencia embrionaria en llamas al realizar la transferencia en el cuerno ipsilateral a la posición del cuerpo lúteo ubicado en el ovario izquierdo.
The study was carried out with the objective of to evaluate the embryo survival after the embryo transfer to the uterine horn ipsilateral and contralateral to the corpus luteum (CL) in llamas. Fourtythree llamas recipient females, from 4 to 6 years old were randomly assigned in 4 groups: G1 (n=10): CL in right ovary and ipsilateral embryo transfer, G2 (n=10): CL in right ovary and contralateral transfer, G3 (n=15): CL in left ovary and ipsilateral transfer, and G4 (n=8): CL in left ovary and contralateral transfer. Ten llamas were used as embryo donors, they were synchronized with LH (1ml), then superovulated with 1000 UI eCG and induced to luteolysis with PGF2α; after that, all of them were mated. The same day of mating, the recipients were treated with LH, with the purpose of synchronization with donors. Seven days postmating, the uterine horns were flushed to recover, evaluate and transfer the embryos. The nonsurgical embryo transfer was used the same day with fresh embryos. The results of pregnancy rate were 60% (G1) and 75% (G3) in recipient females with ipsilateral embryo transfer right and left respectively. On the other hand, contralateral embryo transfer right and left were 30% (G2) and 25% (G4) respectively. However, the differences did not reach significance (p>0.05) between G1 with G2, G3 and G4. Furthermore, G2 not differ (p>0.05) from G4. Whereas, there is difference (p less 0.05) between G3 with G2 and G4. These results indicate that pregnancy rate is major in llamas when the embryo transfer was to the uterine horn ipsilateral to the CL in the left ovary.
Tesis

Las técnicas de producción artificial (TRA) generan vida humana desprovista de familia. Nuestro objetivo general fue establecer los criterios bioéticos y biojurídicos para modificar la norma sobre las TRA en el Perú. Nos propusimos tres objetivos específicos: 1) Analizar el contenido y consecuencias de las TRA; 2) Analizar el vigente artículo 7° de la Ley N° 26842 – Ley General de Salud (LGS) y una de sus propuestas modificatorias de la comisión del Ministro de Justicia y Derechos Humanos, y 3) Establecer los criterios bioéticos y biojurídicos para regular las TRA, derogando el artículo 7 de la LGS. Y, proponiendo un proyecto de ley. La investigación de tipo cualitativa mediante el método bibliográfico, para establecer relaciones teórico-doctrinarias, nos permitió conocer en profundidad el artículo 7 de la LGS, e identificar la naturaleza profunda del problema de las TRA. Para el abordaje descriptivo, explicativo e interpretativo, recurrimos a las fichas bibliográficas, textuales y de resumen; para recoger, almacenar, organizar y presentar la información extraída de fuentes provenientes de 51 autores desde: 26 libros, 2 artículos de revistas, 5 tesis, 12 normas legales, 28 linkografías. El procedimiento se destinó a elegir el tema de la investigación. La primera recopilación de datos bibliográficos nos permitió conocer en profundidad las TRA y el contenido del Artículo 7° de la LGS. La bibliografía adicional nos otorgó una sólida base de conocimiento sobre las TRA. El análisis cualitativo y de documentos nos permitió conocer la situación legal y de hecho de las TRA en el Perú. Mediante el abordaje metodológico antropológico y jurídico, analizamos los documentos mediante un enfoque científico-humanista. Los criterios éticos para el tema de fondo se enmarcaron en la interdisciplinariedad de la bioética y la búsqueda de un estatuto jurídico del concebido y los límites éticos que deben regir la ciencia y la tecnología. Los criterios éticos para la investigación formal fueron la verdad del registro y análisis de documentos de la referencia bibliográfica, y el uso de la información con respeto a la propiedad intelectual. Los criterios de rigor científico fueron la claridad para el desarrollo de los objetivos, y la credibilidad y profundidad de las fuentes de información. Los principales resultados apuntan a comprender que el ordenamiento jurídico del Perú es proteccionista del concebido, pero no el artículo 7 de la LGS que autorizó las TRA, las que han escapado del control normativo, por lo que implican riesgos para la vida y la salud de los embriones humanos producidos. Nuestra investigación se centra en determinar los criterios bioéticos y biojurídicos, para que una norma regule las biotecnologías del inicio de la vida prohibiendo las TRA, por respeto al derecho de los embriones humanos, acorde a su estatuto biológico, ontológico y jurídico.
Tesis

Tesis por compendio de publicaciones
La industria porcina tiene un considerable interés en el uso de la transferencia de embriones, incluyendo la criopreservación de los mismos. Sin embargo, la utilización comercial de la transferencia de embriones en esta especie ha sido muy limitada debido principalmente a la necesidad de utilizar procedimientos quirúrgicos para la obtención y transferencia de los embriones, y a las dificultades encontradas para la criopreservación de dichos embriones mediante los protocolos tradicionales. Últimamente, se han abierto nuevas expectativas para la utilización comercial de esta tecnología gracias al desarrollo de un procedimiento para transferir embriones por vía no quirúrgica y al desarrollo de la vitrificación como método alternativo a los procedimientos tradicionales de criopreservación. El objetivo de esta tesis es mejorar la transferencia vía no quirúrgica de embriones vitrificados-calentados y, desarrollar un protocolo de vitrificación eficiente para los estadios tempranos de desarrollo de embriones porcinos obtenidos, pudiendo aumentar su viabilidad post-calentamiento.
The swine industry has a considerable interest for the use of embryo transfer and cryopreservation since these technologies may allow the transport and storage of valuable genetic material with minimal health risks and cost. However, the commercial application of embryo transfer in pig has been traditionally limited due to the need of surgical transfer procedures and the difficulties for long-term storage of pig embryos by using traditional cryopreservation methods. However, new perspectives for embryo transfer and embryo cryopreservation have occurred with the development of a new device, for non-surgical embryo transfer and with the development of vitrification as an alternative to traditional cryopreservation methods. This thesis was designed to improve the non-surgical deep intrauterine embryo transfer procedure with vitrified embryos and develop an efficient and practical vitrification protocol for porcine embryos at very early developmental stages.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor
Pretende obtener una tasa de concepción superior al 50% utilizando la técnica no quirúrgica de transferencia de embriones en vacas lecheras bajo las condiciones de un establo de la Cuenca Lechera de Lima. Se utilizaron 8 vacas donadoras de primer a quinto parto, distribuidas al azar en 2 grupos por año de estudio: 4 donadoras en el 2008 y 4 donadoras en el 2009. Todas las donadoras fueron sincronizadas con estrógenos, progestágenos y agentes luteolíticos; superovuladas con 400 mg de FSH, e inseminadas con 2 dosis de semen congelado. Se utilizaron 28 hembras receptoras (22 vaquillas mayores de 13 meses de edad y 6 vacas de primer a tercer parto), distribuidas en 2 grupos por año de estudio: en el año 2008 se utilizaron 10 vaquillas y 6 vacas, que fueron tratadas con el protocolo Presynch y en el año 2009 se utilizaron 12 vaquillas, que fueron tratadas con el protocolo CIDRsynch. Ambos tratamientos se realizaron con el fin de sincronizar el celo de las receptoras con las vacas donadoras. Siete días posteriores a la inseminación de las donadoras, se realizó la recolección de embriones en las donadoras mediante la técnica no quirúrgica de transferencia de embriones. Se realizó la búsqueda y clasificación de los embriones, e inmediatamente fueron transferidos a las hembras receptoras. El diagnóstico de gestación se realizó mediante ultrasonografía transrectal al día 28 post transferencia. Se obtuvieron un total de 23 embriones, consiguiendo una tasa de recuperación de embriones de 53.84% (14 embriones de 26 cuerpos lúteos) en el año 2008 y de 24.32% (9 embriones de 37 cuerpos lúteos) en el año 2009. Los embriones transferidos fueron 11 (2008) y 6 (2009), utilizando 9 y 6 vaquillas receptoras respectivamente. El primer año se obtuvo una tasa de concepción de 22.22% (2/9) y en el segundo año de 66.67% (4/6). En conclusión, la respuesta variada de las vacas donadoras al protocolo de super ovulación es uno de los factores más importantes de la transferencia de embriones, mientras que la tasa de concepción en vaquillas receptoras es superior al 50% cuando se utiliza el protocolo de sincronización CIDRsynch.
Tesis

[EN] In vitro production (IVP) of embryos has multiple applications, including the development of transgenic / genetically modified animals that are of broad utility in the biomedical field and could reach to be so in agriculture. In this sense, the intracytoplasmic sperm injection (ICSI) with transfected sperm, such as somatic cell nuclear transfer (SCNT) with transfected cells, have proved to be valid strategies to generate animals with stably integrated exogenous DNA, capable of transmitting to their offspring. However, to make it feasible the availability of a large number of IVP embryos it's necessary. Despite the development of IVP systems of pig embryos for these strategies in the last decades, and a high variety of protocols, there are still some critical issues that limit embryonic development and therefore its application on a large scale. The main objective of this thesis has then pursued, optimizing the ICSI and SCNT protocols in order to improve the viability of IVP porcine embryos. The initial approach was to address the study both in vitro maturation (IVM) and oocyte activation within the SCNT frame. To this end, the most efficient electrical activation protocol under our working conditions was selected from among three proposals, and we then studied the effect of serum supplement on IVM medium, noticing that it doesn't increase the development of partenogenetic embryos produced by electrical activation nor of those produced by SCNT. Moreover, and in order to optimize the ICSI technique, different aspects such as Ca2+ concentration in the microinjection medium, sperm pretreatment with Triton X-100 (TX) and the addition of cysteine or caffeine supplements to the in vitro culture (IVC) medium post-ICSI, were studied in order to promote sperm nucleus decondensation and oocyte activation. Noticing that: i) the concentration of Ca2+ did not influence the cleavage rate, or the development of partenogenic embryos from microinjected oocytes without sperm (sham injection); ii) caffeine did not increase either the pronuclear formation neither the subsequent embryo development, in combination with TX sperm pre-treatment it reduced oocyte activation and embryo development rates; iii) the pronuclear formation was not increased by the sperm pre-treatment with TX nor by the cysteine treatment, regardless of the time of the study assessment.
[ES] La producción in vitro (PIV) de embriones goza de múltiples aplicaciones, entre las que cabe destacar la obtención de animales transgénicos/modificados genéticamente que resultan de amplia utilidad en el ámbito biomédico y podrían llegar a resultarlo en el agropecuario. En este sentido, tanto la inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) con espermatozoides transfectados, como la transferencia nuclear de células somáticas (SCNT) con células transfectadas, han demostrado ser estrategias válidas para generar animales con ADN exógeno integrado de manera estable, capaces de transmitirlo a su descendencia. Sin embargo, para lograrlo es necesario disponer de un gran número de embriones PIV. A pesar del desarrollo durante las últimas décadas de sistemas de PIV de embriones de porcino para estas estrategias, y la disponibilidad de gran variedad de protocolos, persisten aún ciertos puntos críticos que limitan el desarrollo embrionario y por lo tanto su aplicación a gran escala. El objetivo principal de esta tesis ha perseguido por lo tanto, la optimización de los protocolos de ICSI y SCNT con el fin de mejorar la viabilidad de los embriones PIV de porcino. El planteamiento inicial consistió en abordar el estudio tanto de la maduración in vitro (MIV) como de la activación oocitaria en el marco de la SCNT. Para ello se seleccionó de entre tres propuestas de activación artificial, el protocolo de activación eléctrica (que resultó ser el más eficiente bajo nuestras condiciones de trabajo), y se estudió a continuación el efecto del suplemento de suero en el medio de MIV, constatando que no se incrementaba el desarrollo de embriones partenogenotas producidos mediante activación eléctrica ni de aquellos producidos mediante SCNT. Por otra parte, y con el fin de optimizar la técnica de ICSI se abordaron diferentes aspectos como la concentración de Ca2+ en el medio de microinyección, el pre-tratamiento espermático con Triton X-100 (TX), así como la adición de suplementos de cafeína o cisteína al medio de cultivo in vitro (CIV) pos-ICSI, con el fin de favorecer la descondensación del núcleo espermático y la activación oocitaria. Observando que: i) la concentración de Ca2+ no influyó en la tasa de división, ni en la de desarrollo de embriones partenogenotas procedentes de oocitos microinyectados sin espermatozoide (sham injection); ii) la cafeína no incrementó la formación pronuclear ni en el desarrollo embrionario posterior, y en combinación con el pre-tratamiento espermático con TX redujo la activación oocitaria y el desarrollo embrionario; iii) la formación pronuclear no se vio incrementada por el pre-tratamiento espermático con TX ni por el tratamiento con cisteína, independientemente del momento de la evaluación estudiado.
[CAT] La producció in vitro (PIV) d'embrions gaudeix de múltiples aplicacions, entre les quals cap assenyalar l'obtenció d'animals transgènics/modificats genèticament que resulten d'àmplia utilitat en el àmbit biomèdic y podrien arribar a ser-ho en el àmbit agropecuari. En aquest sentit, tant la injecció intracitoplasmàtica d'espermatozoïds (ICSI) amb espermatozoïds transfectats, com la transferència nuclear de cèl.lules somàtiques (SCNT) amb cèl.lules transfectades, han demostrat ser estratègies vàlides per a l'obtenció d'animals amb ADN exogen integrat de manera estable, capaços de transmetrela a la seva descendència. No obstant això, per aconseguir-ho és necessari disposar d'un gran nombre d'embrions PIV. Malgrat el desenvolupament durant les últimes dècades de sistemes de PIV d'embrions de porcí per a aquestes estratègies, i la disponibilitat de gran varietat de protocols, persisteixen encara certs punts crítics que limiten el desenvolupament embrionari i per tant la seva aplicació a gran escala. L'objectiu principal d'aquesta tesi ha perseguit per tant, l'optimització dels protocols d' ICSI i SCNT per tal de millorar la viabilitat dels embrions PIV de porcí. El plantejament inicial va consistir en abordar l'estudi tant de la maduració in vitro (MIV) com de l'activació oocitària en el marc de la SCNT. Per a això es va seleccionar entre tres propostes d'activació artificial, el protocol d'activació elèctrica (que va resultar ser el més eficient sota les nostres condicions de treball), i es va estudiar a continuació l'efecte del suplement de sèrum en el medi de MIV, constatant que no va incrementar el desenvolupament d'embrions partenogenotes produïts mitjançant activació elèctrica ni d'aquells produïts mitjançant SCNT. D'altra banda, i per tal d'optimitzar la tècnica de l'ICSI es van abordar diferents aspectes com la concentració de Ca2 + en el medi de microinjecció, el pretractament espermàtic amb Triton X-100 (TX), així com l'addició de suplements de cafeïna o cisteïna al mitjà de cultiu in vitro (CIV) pos-ICSI, per tal d'afavorir la descondensació del nucli espermàtic i l'activació oocitària. Observant que: i) la concentració de Ca2+ no va influir en la taxa de divisió, ni en la de desenvolupament d'embrions partenogenotes procedents d'oòcits microinjectats sense espermatozoïd (sham injection); ii) la cafeïna no va incrementar la formació pronuclear ni en el desenvolupament embrionari posterior, i en combinació amb el pretractament espermàtic amb TX va reduir l'activació oocitària i el desenvolupament embrionari; iii) la formació pronuclear no es va veure incrementada pel pretractament espermàtic amb TX ni pel tractament amb cisteïna, independentment del moment de l'avaluació estudiat.
García Mengual, ME. (2016). OPTIMIZACIÓN DE LAS ESTRATEGIAS REPRODUCTIVAS DE MICROMANIPULACIÓN PARA LA PRODUCCIÓN IN VITRO DE EMBRIONES PORCINOS [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/61448
TESIS

Busca realizar una adecuada selección del número de embriones, así como del día y estadío de desarrollo embrionario que permitirá escoger embriones de alta calidad con la finalidad de conseguir una mayor incidencia de embarazos exitosos en pacientes con problemas de infertilidad y simultáneamente reducir la incidencia de embarazos multiples los cuales tienen mayores riesgos obstétricos y neonatales. Presenta un estudio observacional, descriptivo, retrospectivo y comparativo en el cual se revisaron 555 historias clínicas de pacientes a las que se les realizó la transferencia de un embrión único y que recibieron tratamiento por problemas de infertilidad en el Servicio de Ginecología de la Unidad de Fertilidad del Hospital de la Universidad de Hirosaki, Aomori, Japón; en el periodo comprendido desde enero de 1995 hasta Enero del 2006. Determina la incidencia de embarazos y recién nacidos vivos después de realizar la transferencia de un embrión en estadío de blastocisto el día 5 de desarrollo embrionario. Determina la frecuencia de embarazos y recién nacidos vivos después de realizar la tranferencia de un embrión único el día 3 y el día 4 de desarrollo embrionario. Evalúa que estadio de desarrollo embrionario proporciona la mayor incidencia de embarazos y recièn nacidos vivos. Se obtiene que el 14.3% de embarazos cuando se realizó la transferencia de un embrión el día 3 ( 4-16 blastómeras), 23.4 % de embarazos cuando se realizó la transferencia de un embrión el día 4 (estadío de Morula) y 45% de embarazos cuando se realizó la transferencia de un embrión el día 5 (estadío de blastocisto). El porcentaje de recién nacidos vivos fue de un 42.9% el día 3( 4-16 blastómeras), 42.3 % el día 4 (estadío de Morula) y 77.8% el día 5 (estadío de blastocisto). En cuanto a la paridad principalmene las pacientes fueron nulíparas: 75% (día 3), 69.2% (día 4) y 55.6% (día 5). Encuentra que el grupo etáreo más frecuente estuvo comprendido entre los 36 a 40 años con un 46.4% el día 3( 4-16 blastómeras), un 42.3% el día 4 (estadío de Morula) un 44.4% el día 5 (estadío de blastocisto). La técnica de reproduccion asistida más utilizada fue la fecundacion in vitro: 75% (día 3), 80.8% (día 4) y 77.8% (día 5). El factor de tubárico y masculino fueron los más frecuentes: 42.85% (día 3), 42.3% (día 4) y 66.6% (día 5). Concluye que realizar la transferencia de un embrión en el dia 5 y durante el estadío de blastocisto de desarrollo embrionario permite obtener un mayor número de embarazos y nacimientos vivos, asì como el menor nùmero de complicaciones obstètricas en las parejas con problemas de infertilidad.
Trabajo de investigación

Este trabalho propõe um modelo de transferência de calor e massa para prever a formação de gelo em um container preenchido com legumes congelados. O problema físico é modelado como um meio poroso composto pelo próprio produto e o ar em seu entorno. O regime de convecção natural é assumido dentro do container, o qual promove o transporte de massa. Como uma primeira validação, o modelo é simulado considerando diferentes temperaturas de ar externo, causadas por flutuações da vizinhança. Resultados para quatro ciclos de temperaturas foram comparados, variando separadamente a temperatura média do ar, amplitude e frequência de oscilação. De modo geral, é observado que a temperatura do produto se comporta assim como era esperado e este resultado é diretamente associado à formação de gelo dentro do container. A formação de gelo cresce com uma maior amplitude de oscilação, porém decresce com um aumento na frequência e na temperatura média. Os parâmetros do modelo foram obtidos para dois diferentes produtos: fatias de cenouras congeladas e vagens congeladas, ambos em meio ao ar. As definições de parâmetros são oriundas de revisão bibliográfica, medições experimentais e simulações numéricas. Os parâmetros encontrados para a caracterização desses meios porosos foram similares para ambos os produtos, mesmo eles possuindo diferentes geometrias. A validação experimental foi feita para as fatias de cenoura considerando dois ciclos de temperatura O modelo numérico é capaz de prever o campo de velocidades do ar, as temperaturas do produto e a formação de gelo local. Os resultados foram validados em relação a um grupo independente de resultados numéricos, tal comparação apresentou uma boa concordância. A circulação de ar encontrada é, de fato, devido à convecção natural. O comportamento da temperatura dos produtos simulados concorda com os valores medidos e os valores de temperaturas diferem por menos de 12%. Com respeito à formação de gelo, o modelo é capaz de prevê-la corretamente nas regiões mais suscetíveis a este fenômeno. Porém, a quantidade de gelo formado prevista pelo modelo (1,56 g/semana) é menor do que a experimental (4,67 g/semana), apesar de serem de mesma ordem de magnitude. O efeito de cada parâmetro no modelo é estudado visando detectar maneiras de aprimorar o modelo. Foi encontrado que os parâmetros mais importantes para a formação de gelo total são a difusividade de massa efetiva e o coeficiente de transferência de calor convectivo dentro do container. Ajustando estes parâmetros duas vezes foi possível encontrar resultados melhores com respeito à formação de gelo (3,09 g/semana).
A model of heat and mass transfer is proposed in order to predict frost formation into a closed container filled with frozen vegetables. The physical problem is modeled as a macroporous media composed by the product itself and the surrounding air. Natural convection air flow is assumed into the container, who promotes water mass transport. As a first validation, the model is simulated for several exterior air temperatures, under environmental fluctuations (boundary conditions). Results of four temperature cycles were compared, varying average air temperature, amplitude and frequency of oscillation, one by one. As a general result, it is observed that the product temperature behavior is as expected, and it is directly associated with frost formation into the container. Frost formation increases with large amplitude of oscillation, but decreases with higher frequencies and higher mean temperatures. Model parameters were obtained for two assembling: frozen slices of carrots and air, and frozen extra thin green beans and air. Parameter definition and evaluation combines literature review, measurements and numerical simulation. In general, parameters which characterize these porous media were similar for both products, even though they display different geometries. The experimental validation is performed for carrot slices with two temperature cycles The numerical model is able to predict air velocity field, air and product temperatures, and local frost formation. Results are validated in respect to a set of independent experimental results that shown a good agreement. Air flow circulation is as expected due to natural convection. Product temperature simulated behavior agrees with measurements, and temperature values differ by less than 12%. Respect to frost formation predictions, the model predicts correctly the most susceptible regions to frost formation. However, the quantity of frost formed predicted by the model (1.56 g/ week)is lower than the experimental one (4.67g/week), despite being of the same order of magnitude. The effect of each parameter in the model is study in order to detect how to improve the model. The most important parameters affecting total frost formation are effective mass diffusivity and convective heat coefficient into the storage container. Adjusting these parameters to twice, better results in terms of frost formation could be obtained (3.09 g/ week).

El crecimiento de los tratamientos con embriones congelados ha sido exponencial en los últimos años por lo que la elección de la correcta preparación endometrial es uno de los puntos críticos en los procesos de FIV. Dicha preparación puede realizarse mediante ciclo natural sin la administración de medicación alguna (con su variante «ciclo natural modificado») o con la administración secuencial de estrógenos y progestágenos «ciclo sustituido o artificial». Si bien no se han descrito diferencias entre ambas aproximaciones en términos de eficacia, cada uno presenta ventajas e inconvenientes, tanto para la paciente como para el equipo que la trata. El ciclo natural presentaría ventajas en cuanto a comodidad y coste mientras que el sustituido permitiría una mayor flexibilidad en la programación de la transferencia. En los próximos años la seguridad para la salud de la gestante y el RN será clave para dilucidar la superioridad de un protocolo u otro.

Desde la introducción de los tratamientos de reproducción asistida, hace ya más de 40 años, ha habido un creciente interés por conocer la función de la P, tanto en los ciclos naturales como en los de FIV y de transferencia de embriones criopreservados. Su impacto directo en los resultados clínicos en varios niveles activó varias líneas de investigación, con algunas de ellas aún abiertas hoy en día. En este capítulo describimos la evidencia disponible actualmente para valorar la implicación de la P en TRA y revisamos los factores que pueden modificar los niveles de P sérica, así como los que pueden interferir en su lectura correcta a la hora de analizar el resultado obtenido del laboratorio.

En el momento actual, aún desconocemos si el incremento tardío de P folicular es causa o consecuencia. La definición de «progesterona elevada» y los niveles críticos de corte son inconsistentes en la literatura. La explicación más plausible de este incremento reside en que los folículos con una mayor expresión de receptores de LH, debida a una alta exposición a la FSH durante la estimulación ovárica, se muestran «hipersensibles» al trigger ovulatorio, lo que resulta en altos niveles circulantes de P en fase folicular tardía y en un avance endometrial que determina peores resultados reproductivos. Para evitarlo, resulta fundamental evitar la sobreestimulación ovárica con FSH al final de la fase folicular aplicando protocolos de step‑down, así como no demorar el trigger ovulatorio más allá de folículos ≥16-17 mm. El efecto deletéreo endometrial de la elevación de la P es más manifiesto cuando la transferencia de embriones se realiza en el estadio de células en comparación con la etapa de blastocisto.