Dissertations / Theses on the topic 'Transferencia de embriones congelados'

Introducción: La fecundación in vitro (FIV) se asocia a peores resultados maternos y perinatales, existiendo controversia sobre la causas. El advenimiento de nuevos estudios en el tema justifican la investigación de la seguridad de la FIV. El objetivo principal de esta tesis es evaluar los efectos de las técnicas de reproducción asistida sobre los resultados maternos y perinatales en pacientes sometidas a FIV autóloga (FIV AO) con transferencia de embriones en fresco (TEF) y congelados (TEC) y FIV con donación de ovocitos (FIV DO). Material y métodos: A fin de poder alcanzar el objetivo principal, esta tesis ha sido dividida en tres capítulos. Capítulo 1: Se realizó un estudio de cohortes retrospectivo utilizando datos del Registro Nacional de Actividad en Reproducción Humana Asistida de España entre el año 2010 y 2015, analizando la edad gestacional parto y tasa de parto prematuro (PP) de dos poblaciones diferentes: FIV AO y FIV DO. Capítulo 2: Revisión sistemática y metanálisis de estudios que compararon los resultados maternos y perinatales de embarazos únicos obtenidos por FIV con TEF versus TEC. Las variables incluyeron: PP, bajo peso al nacer (BPN), muy bajo peso al nacer (MBPN), pequeño para la edad gestacional (PEG), grande para la edad gestacional (GEG), macrosomía, preeclampsia (PE), preeclampsia severa (PES), diabetes gestacional (DG), desprendimiento prematuro de placenta normoinserta (DPPNI), placenta previa, hemorragia postparto y ruptura prematura de membranas (RPM). Capítulo 3: Revisión sistemática y metanálisis de estudios que compararon los resultados maternos y perinatales de embarazos únicos obtenidos por FIV DO versus FIV AO. Las variables incluyeron síndrome hipertensivo del embarazo (SHE), hipertensión inducida por el embarazo (PIH), PE, PES, PP, PP temprano, BPN, MBPN, cesárea, DG, RPM, placenta previa, DPPNI, y hemorragia postparto. Resultados: Capítulo 1: Se analizaron 41022 FIV AO (28754 TEF y 12268 TEC) observándose una mayor proporción de PP en TEF comparado con el grupo TEC (P .01). En el grupo de FIV DO, con un total de 19941 casos (12394 TEF y 7547 TEC) no se observaron diferencias en cuanto al parto prematuro en ninguno de los grupos al comparar TEF versus TEC. Capítulo 2: 35 estudios se incluyeron en el análisis. TEC se asoció con un riesgo menor para PP (RR 0.89; IC95% 0.82, 0.97), BPN (RR 0.73; IC95% 0.69, 0.78), MBPN (RR 0.63; IC95% 0.60, 0.66), PEG (RR 0.63; IC95% 0.60, 0.66); y un riesgo mayor para GEG (RR 1.53; IC95% 1.48, 1.58), macrosomía (RR 1.72; IC95% 1.65, 1.78), PE (RR 1.20; IC95% 1.06, 1.35) y PES (RR 1.96; IC95% 1.33, 2.88). No hubo diferencias estadísticamente significativas para el riesgo de DG y RPM. Capítulo 3: 23 estudios fueron incluidos en el análisis. FIV DO se asocia con un riesgo mayor de SHE (OR 2.63, 2.17-3.18), PE (OR 2.64; 2.29-3.04), PES (OR 3.22; 2.30-4.49), PP (OR 1.57; 1.33-1.86), BPN (OR 1.25, 1.20-1.30). No hubo diferencias estadísticamente significativas en cuanto al riesgo de PP ni BPN luego de ajustar por PE. Conclusiones: Los embarazos obtenidos por FIV AO con TEC presentan un menor riesgo de PP y BPN comparado con FIV AO con TEF. Los embarazos obtenidos por FIV AO con TEC presentan mayor riesgo de SHE y PE comparado con FIV AO con TEF. Los embarazos obtenidos por FIV DO presentan mayor riesgo de PP, BPN y SHE y PE comparado con FIV AO.
Introduction: In vitro fertilization (IVF) is associated with adverse maternal and perinatal outcomes and there is controversy about the causes. The publication of new studies on the subject justify the investigation of the safety of IVF. The main objective of this thesis is to evaluate the effects of assisted reproduction techniques on maternal and perinatal outcomes in patients undergoing autologous IVF (IVF AO) with fresh embryo transfer (ET) and frozen embryo transfer (FET); and IVF with oocyte donation (IVF OD). Methods: In order to achieve the main objective, this thesis has been divided into three chapters. Chapter 1: A retrospective cohort study was conducted using data from the National Registry of Activity in Assisted Human Reproduction of Spain between 2010 to 2015, analyzing the gestational age at delivery and the preterm birth (PB) rate of two different populations: IVF AO and IVF OD. Chapter 2: Systematic review and meta-analysis of studies comparing maternal and perinatal outcomes of singleton pregnancies after IVF with fresh ET versus FET. Outcomes included PB, low birth weight (LBW), very low birth weight (VLBW), small for gestational age (SGA), large for gestational age (LGA), macrosomia, preeclampsia (PE), severe PE, gestational diabetes (GD), placental abruption, placenta previa, postpartum hemorrhage and premature rupture of membranes (PROM). Chapter 3: Systematic review and meta-analysis of studies comparing maternal and perinatal outcomes of singleton pregnancies obtained by IVF OD versus IVF AO. Outcomes included hypertensive disorders of pregnancy (HDP), PE, PES, pregnancy induced hypertension (PIH), PB, early PB, LBW, VLBW, cesarean section, GD, PROM, placenta previa, placental abruption, and postpartum hemorrhage. Results: Chapter 1: 41022 IVF AO cases (28754 fresh ET and 12268 FET) were analyzed, with a higher proportion of PB in fresh ET group compared to FET group (P .01). In the IVF OD group, with a total of 19941 cases (12394 fresh ET and 7547 FET), no differences were observed between fresh ET and FET. Chapter 2: 35 studies were included in the analysis. FET was associated with a lower risk of PB (RR 0.89, 95%CI 0.82, 0.97), LBW (RR 0.73, 95%CI 0.69, 0.78), VLBW (RR 0.63, 95%CI 0.60, 0.66) and SGA (RR 0.63, 95%CI 0.60, 0.66); and a higher risk of LGA (RR 1.53; 95%CI 1.48, 1.58), macrosomía (RR 1.72; 95%CI 1.65, 1.78), PE (RR 1.20, 95%CI 1.06, 1.35) and severe PE (RR 1.96, 95%CI 1.33, 2.88). There were no statistically significant differences for the risk of GD and PROM. Chapter 3: 23 studies were included. IVF-OD is associated with a higher risk of hypertensive disorders in pregnancy (OR 2.63, 2.17-3.18), preeclampsia (OR 2.64; 2.29-3.04), severe preeclampsia (OR 3.22; 2.30-4.49), pregnancy induced hypertension (OR 2.16; 1.79-2.62), preterm birth (OR 1.57; 1.33-1.86), low birth weight (OR 1.25, 1.20-1.30). There was no significant difference in the risk of preterm birth or low birth weight when adjusted for preeclampsia.. Conclusions: Pregnancies after IVF AO and FET have a lower risk of PB and LBW compared to IVF AO and fresh ET. Pregnancies after IVF AO and FET have a higher risk of PE compared with IVF AO and fresh ET. Pregnancies after IVF OD have a higher risk of PB, LBW and HDP and PE compared to IVF AO.

Orientador: Vivaldo Silveira Junior
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos
Made available in DSpace on 2018-07-27T07:58:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Resende_JaimeVilelade_D.pdf: 62778372 bytes, checksum: aaa45871b399f2a9e6a5b643791dace6 (MD5) Previous issue date: 2001
Resumo: O resumo podera ser visualizado no texto completo da tese digital
Abstract: The abstract is available with the full electronic digital document
Doutorado
Doutor em Engenharia de Alimentos

Las técnicas de producción artificial (TRA) generan vida humana desprovista de familia. Nuestro objetivo general fue establecer los criterios bioéticos y biojurídicos para modificar la norma sobre las TRA en el Perú. Nos propusimos tres objetivos específicos: 1) Analizar el contenido y consecuencias de las TRA; 2) Analizar el vigente artículo 7° de la Ley N° 26842 – Ley General de Salud (LGS) y una de sus propuestas modificatorias de la comisión del Ministro de Justicia y Derechos Humanos, y 3) Establecer los criterios bioéticos y biojurídicos para regular las TRA, derogando el artículo 7 de la LGS. Y, proponiendo un proyecto de ley. La investigación de tipo cualitativa mediante el método bibliográfico, para establecer relaciones teórico-doctrinarias, nos permitió conocer en profundidad el artículo 7 de la LGS, e identificar la naturaleza profunda del problema de las TRA. Para el abordaje descriptivo, explicativo e interpretativo, recurrimos a las fichas bibliográficas, textuales y de resumen; para recoger, almacenar, organizar y presentar la información extraída de fuentes provenientes de 51 autores desde: 26 libros, 2 artículos de revistas, 5 tesis, 12 normas legales, 28 linkografías. El procedimiento se destinó a elegir el tema de la investigación. La primera recopilación de datos bibliográficos nos permitió conocer en profundidad las TRA y el contenido del Artículo 7° de la LGS. La bibliografía adicional nos otorgó una sólida base de conocimiento sobre las TRA. El análisis cualitativo y de documentos nos permitió conocer la situación legal y de hecho de las TRA en el Perú. Mediante el abordaje metodológico antropológico y jurídico, analizamos los documentos mediante un enfoque científico-humanista. Los criterios éticos para el tema de fondo se enmarcaron en la interdisciplinariedad de la bioética y la búsqueda de un estatuto jurídico del concebido y los límites éticos que deben regir la ciencia y la tecnología. Los criterios éticos para la investigación formal fueron la verdad del registro y análisis de documentos de la referencia bibliográfica, y el uso de la información con respeto a la propiedad intelectual. Los criterios de rigor científico fueron la claridad para el desarrollo de los objetivos, y la credibilidad y profundidad de las fuentes de información. Los principales resultados apuntan a comprender que el ordenamiento jurídico del Perú es proteccionista del concebido, pero no el artículo 7 de la LGS que autorizó las TRA, las que han escapado del control normativo, por lo que implican riesgos para la vida y la salud de los embriones humanos producidos. Nuestra investigación se centra en determinar los criterios bioéticos y biojurídicos, para que una norma regule las biotecnologías del inicio de la vida prohibiendo las TRA, por respeto al derecho de los embriones humanos, acorde a su estatuto biológico, ontológico y jurídico.
Tesis

El presente trabajo se realizó con el propósito de evaluar el efecto de la transferencia embrionaria ipsilateral y contralateral a la posición del cuerpo lúteo sobre la tasa de preñez en llamas. Se utilizaron 43 llamas hembras receptoras de 4 a 6 años, distribuidas aleatoriamente en 4 grupos de estudio: G1 (n=10): Cuerpo lúteo en ovario derecho y transferencia ipsilateral, G2 (n=10): Cuerpo lúteo en ovario derecho y transferencia contralateral, G3 (n=15): Cuerpo lúteo en ovario izquierdo y transferencia ipsilateral y G4 (n=8): Cuerpo lúteo en ovario izquierdo y transferencia contralateral. Se utilizaron 10 llamas hembras como donadoras de embriones, las cuales fueron sincronizadas con LH (1ml), superovuladas con 1000 UI de eCG y se provocó luteólisis con prostaglandina (1ml), siendo empadradas posteriormente. El día del empadre las llamas receptoras recibieron tratamiento con LH, con el propósito de sincronizarlas con las donadoras. Siete días post empadre se realizó el lavado uterino para la recolección, evaluación y transferencia de los embriones. La transferencia embrionaria a los grupos experimentales se realizó con embriones frescos el mismo día. Los resultados obtenidos señalan una tasa de preñez de 60% (G1) y 75% (G3) en las hembras con transferencia embrionaria ipsilateral derecha e izquierda respectivamente, mientras que en la transferencia contralateral derecha e izquierda fueron 30% (G2) y 25%(G4) respectivamente. Sin embargo, no se registraron diferencias significativas (p>0.05) entre el grupo G1 con los grupos G2, G3 y G4, además G2 no muestra diferencias significativas (p>0.05) con G4. Mientras que se encontró diferencia (p menor 0.05) entre el grupo G3 con los grupos G2 y G4. Estos resultados indicarían una mayor tasa de sobrevivencia embrionaria en llamas al realizar la transferencia en el cuerno ipsilateral a la posición del cuerpo lúteo ubicado en el ovario izquierdo.
The study was carried out with the objective of to evaluate the embryo survival after the embryo transfer to the uterine horn ipsilateral and contralateral to the corpus luteum (CL) in llamas. Fourtythree llamas recipient females, from 4 to 6 years old were randomly assigned in 4 groups: G1 (n=10): CL in right ovary and ipsilateral embryo transfer, G2 (n=10): CL in right ovary and contralateral transfer, G3 (n=15): CL in left ovary and ipsilateral transfer, and G4 (n=8): CL in left ovary and contralateral transfer. Ten llamas were used as embryo donors, they were synchronized with LH (1ml), then superovulated with 1000 UI eCG and induced to luteolysis with PGF2α; after that, all of them were mated. The same day of mating, the recipients were treated with LH, with the purpose of synchronization with donors. Seven days postmating, the uterine horns were flushed to recover, evaluate and transfer the embryos. The nonsurgical embryo transfer was used the same day with fresh embryos. The results of pregnancy rate were 60% (G1) and 75% (G3) in recipient females with ipsilateral embryo transfer right and left respectively. On the other hand, contralateral embryo transfer right and left were 30% (G2) and 25% (G4) respectively. However, the differences did not reach significance (p>0.05) between G1 with G2, G3 and G4. Furthermore, G2 not differ (p>0.05) from G4. Whereas, there is difference (p less 0.05) between G3 with G2 and G4. These results indicate that pregnancy rate is major in llamas when the embryo transfer was to the uterine horn ipsilateral to the CL in the left ovary.
Tesis

Las técnicas de producción artificial (TRA) generan vida humana desprovista de familia. Nuestro objetivo general fue establecer los criterios bioéticos y biojurídicos para modificar la norma sobre las TRA en el Perú. Nos propusimos tres objetivos específicos: 1) Analizar el contenido y consecuencias de las TRA; 2) Analizar el vigente artículo 7° de la Ley N° 26842 – Ley General de Salud (LGS) y una de sus propuestas modificatorias de la comisión del Ministro de Justicia y Derechos Humanos, y 3) Establecer los criterios bioéticos y biojurídicos para regular las TRA, derogando el artículo 7 de la LGS. Y, proponiendo un proyecto de ley. La investigación de tipo cualitativa mediante el método bibliográfico, para establecer relaciones teórico-doctrinarias, nos permitió conocer en profundidad el artículo 7 de la LGS, e identificar la naturaleza profunda del problema de las TRA. Para el abordaje descriptivo, explicativo e interpretativo, recurrimos a las fichas bibliográficas, textuales y de resumen; para recoger, almacenar, organizar y presentar la información extraída de fuentes provenientes de 51 autores desde: 26 libros, 2 artículos de revistas, 5 tesis, 12 normas legales, 28 linkografías. El procedimiento se destinó a elegir el tema de la investigación. La primera recopilación de datos bibliográficos nos permitió conocer en profundidad las TRA y el contenido del Artículo 7° de la LGS. La bibliografía adicional nos otorgó una sólida base de conocimiento sobre las TRA. El análisis cualitativo y de documentos nos permitió conocer la situación legal y de hecho de las TRA en el Perú. Mediante el abordaje metodológico antropológico y jurídico, analizamos los documentos mediante un enfoque científico-humanista. Los criterios éticos para el tema de fondo se enmarcaron en la interdisciplinariedad de la bioética y la búsqueda de un estatuto jurídico del concebido y los límites éticos que deben regir la ciencia y la tecnología. Los criterios éticos para la investigación formal fueron la verdad del registro y análisis de documentos de la referencia bibliográfica, y el uso de la información con respeto a la propiedad intelectual. Los criterios de rigor científico fueron la claridad para el desarrollo de los objetivos, y la credibilidad y profundidad de las fuentes de información. Los principales resultados apuntan a comprender que el ordenamiento jurídico del Perú es proteccionista del concebido, pero no el artículo 7 de la LGS que autorizó las TRA, las que han escapado del control normativo, por lo que implican riesgos para la vida y la salud de los embriones humanos producidos. Nuestra investigación se centra en determinar los criterios bioéticos y biojurídicos, para que una norma regule las biotecnologías del inicio de la vida prohibiendo las TRA, por respeto al derecho de los embriones humanos, acorde a su estatuto biológico, ontológico y jurídico.
Tesis

Tesis por compendio de publicaciones
La industria porcina tiene un considerable interés en el uso de la transferencia de embriones, incluyendo la criopreservación de los mismos. Sin embargo, la utilización comercial de la transferencia de embriones en esta especie ha sido muy limitada debido principalmente a la necesidad de utilizar procedimientos quirúrgicos para la obtención y transferencia de los embriones, y a las dificultades encontradas para la criopreservación de dichos embriones mediante los protocolos tradicionales. Últimamente, se han abierto nuevas expectativas para la utilización comercial de esta tecnología gracias al desarrollo de un procedimiento para transferir embriones por vía no quirúrgica y al desarrollo de la vitrificación como método alternativo a los procedimientos tradicionales de criopreservación. El objetivo de esta tesis es mejorar la transferencia vía no quirúrgica de embriones vitrificados-calentados y, desarrollar un protocolo de vitrificación eficiente para los estadios tempranos de desarrollo de embriones porcinos obtenidos, pudiendo aumentar su viabilidad post-calentamiento.
The swine industry has a considerable interest for the use of embryo transfer and cryopreservation since these technologies may allow the transport and storage of valuable genetic material with minimal health risks and cost. However, the commercial application of embryo transfer in pig has been traditionally limited due to the need of surgical transfer procedures and the difficulties for long-term storage of pig embryos by using traditional cryopreservation methods. However, new perspectives for embryo transfer and embryo cryopreservation have occurred with the development of a new device, for non-surgical embryo transfer and with the development of vitrification as an alternative to traditional cryopreservation methods. This thesis was designed to improve the non-surgical deep intrauterine embryo transfer procedure with vitrified embryos and develop an efficient and practical vitrification protocol for porcine embryos at very early developmental stages.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor
Pretende obtener una tasa de concepción superior al 50% utilizando la técnica no quirúrgica de transferencia de embriones en vacas lecheras bajo las condiciones de un establo de la Cuenca Lechera de Lima. Se utilizaron 8 vacas donadoras de primer a quinto parto, distribuidas al azar en 2 grupos por año de estudio: 4 donadoras en el 2008 y 4 donadoras en el 2009. Todas las donadoras fueron sincronizadas con estrógenos, progestágenos y agentes luteolíticos; superovuladas con 400 mg de FSH, e inseminadas con 2 dosis de semen congelado. Se utilizaron 28 hembras receptoras (22 vaquillas mayores de 13 meses de edad y 6 vacas de primer a tercer parto), distribuidas en 2 grupos por año de estudio: en el año 2008 se utilizaron 10 vaquillas y 6 vacas, que fueron tratadas con el protocolo Presynch y en el año 2009 se utilizaron 12 vaquillas, que fueron tratadas con el protocolo CIDRsynch. Ambos tratamientos se realizaron con el fin de sincronizar el celo de las receptoras con las vacas donadoras. Siete días posteriores a la inseminación de las donadoras, se realizó la recolección de embriones en las donadoras mediante la técnica no quirúrgica de transferencia de embriones. Se realizó la búsqueda y clasificación de los embriones, e inmediatamente fueron transferidos a las hembras receptoras. El diagnóstico de gestación se realizó mediante ultrasonografía transrectal al día 28 post transferencia. Se obtuvieron un total de 23 embriones, consiguiendo una tasa de recuperación de embriones de 53.84% (14 embriones de 26 cuerpos lúteos) en el año 2008 y de 24.32% (9 embriones de 37 cuerpos lúteos) en el año 2009. Los embriones transferidos fueron 11 (2008) y 6 (2009), utilizando 9 y 6 vaquillas receptoras respectivamente. El primer año se obtuvo una tasa de concepción de 22.22% (2/9) y en el segundo año de 66.67% (4/6). En conclusión, la respuesta variada de las vacas donadoras al protocolo de super ovulación es uno de los factores más importantes de la transferencia de embriones, mientras que la tasa de concepción en vaquillas receptoras es superior al 50% cuando se utiliza el protocolo de sincronización CIDRsynch.
Tesis

[EN] In vitro production (IVP) of embryos has multiple applications, including the development of transgenic / genetically modified animals that are of broad utility in the biomedical field and could reach to be so in agriculture. In this sense, the intracytoplasmic sperm injection (ICSI) with transfected sperm, such as somatic cell nuclear transfer (SCNT) with transfected cells, have proved to be valid strategies to generate animals with stably integrated exogenous DNA, capable of transmitting to their offspring. However, to make it feasible the availability of a large number of IVP embryos it's necessary. Despite the development of IVP systems of pig embryos for these strategies in the last decades, and a high variety of protocols, there are still some critical issues that limit embryonic development and therefore its application on a large scale. The main objective of this thesis has then pursued, optimizing the ICSI and SCNT protocols in order to improve the viability of IVP porcine embryos. The initial approach was to address the study both in vitro maturation (IVM) and oocyte activation within the SCNT frame. To this end, the most efficient electrical activation protocol under our working conditions was selected from among three proposals, and we then studied the effect of serum supplement on IVM medium, noticing that it doesn't increase the development of partenogenetic embryos produced by electrical activation nor of those produced by SCNT. Moreover, and in order to optimize the ICSI technique, different aspects such as Ca2+ concentration in the microinjection medium, sperm pretreatment with Triton X-100 (TX) and the addition of cysteine or caffeine supplements to the in vitro culture (IVC) medium post-ICSI, were studied in order to promote sperm nucleus decondensation and oocyte activation. Noticing that: i) the concentration of Ca2+ did not influence the cleavage rate, or the development of partenogenic embryos from microinjected oocytes without sperm (sham injection); ii) caffeine did not increase either the pronuclear formation neither the subsequent embryo development, in combination with TX sperm pre-treatment it reduced oocyte activation and embryo development rates; iii) the pronuclear formation was not increased by the sperm pre-treatment with TX nor by the cysteine treatment, regardless of the time of the study assessment.
[ES] La producción in vitro (PIV) de embriones goza de múltiples aplicaciones, entre las que cabe destacar la obtención de animales transgénicos/modificados genéticamente que resultan de amplia utilidad en el ámbito biomédico y podrían llegar a resultarlo en el agropecuario. En este sentido, tanto la inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) con espermatozoides transfectados, como la transferencia nuclear de células somáticas (SCNT) con células transfectadas, han demostrado ser estrategias válidas para generar animales con ADN exógeno integrado de manera estable, capaces de transmitirlo a su descendencia. Sin embargo, para lograrlo es necesario disponer de un gran número de embriones PIV. A pesar del desarrollo durante las últimas décadas de sistemas de PIV de embriones de porcino para estas estrategias, y la disponibilidad de gran variedad de protocolos, persisten aún ciertos puntos críticos que limitan el desarrollo embrionario y por lo tanto su aplicación a gran escala. El objetivo principal de esta tesis ha perseguido por lo tanto, la optimización de los protocolos de ICSI y SCNT con el fin de mejorar la viabilidad de los embriones PIV de porcino. El planteamiento inicial consistió en abordar el estudio tanto de la maduración in vitro (MIV) como de la activación oocitaria en el marco de la SCNT. Para ello se seleccionó de entre tres propuestas de activación artificial, el protocolo de activación eléctrica (que resultó ser el más eficiente bajo nuestras condiciones de trabajo), y se estudió a continuación el efecto del suplemento de suero en el medio de MIV, constatando que no se incrementaba el desarrollo de embriones partenogenotas producidos mediante activación eléctrica ni de aquellos producidos mediante SCNT. Por otra parte, y con el fin de optimizar la técnica de ICSI se abordaron diferentes aspectos como la concentración de Ca2+ en el medio de microinyección, el pre-tratamiento espermático con Triton X-100 (TX), así como la adición de suplementos de cafeína o cisteína al medio de cultivo in vitro (CIV) pos-ICSI, con el fin de favorecer la descondensación del núcleo espermático y la activación oocitaria. Observando que: i) la concentración de Ca2+ no influyó en la tasa de división, ni en la de desarrollo de embriones partenogenotas procedentes de oocitos microinyectados sin espermatozoide (sham injection); ii) la cafeína no incrementó la formación pronuclear ni en el desarrollo embrionario posterior, y en combinación con el pre-tratamiento espermático con TX redujo la activación oocitaria y el desarrollo embrionario; iii) la formación pronuclear no se vio incrementada por el pre-tratamiento espermático con TX ni por el tratamiento con cisteína, independientemente del momento de la evaluación estudiado.
[CAT] La producció in vitro (PIV) d'embrions gaudeix de múltiples aplicacions, entre les quals cap assenyalar l'obtenció d'animals transgènics/modificats genèticament que resulten d'àmplia utilitat en el àmbit biomèdic y podrien arribar a ser-ho en el àmbit agropecuari. En aquest sentit, tant la injecció intracitoplasmàtica d'espermatozoïds (ICSI) amb espermatozoïds transfectats, com la transferència nuclear de cèl.lules somàtiques (SCNT) amb cèl.lules transfectades, han demostrat ser estratègies vàlides per a l'obtenció d'animals amb ADN exogen integrat de manera estable, capaços de transmetrela a la seva descendència. No obstant això, per aconseguir-ho és necessari disposar d'un gran nombre d'embrions PIV. Malgrat el desenvolupament durant les últimes dècades de sistemes de PIV d'embrions de porcí per a aquestes estratègies, i la disponibilitat de gran varietat de protocols, persisteixen encara certs punts crítics que limiten el desenvolupament embrionari i per tant la seva aplicació a gran escala. L'objectiu principal d'aquesta tesi ha perseguit per tant, l'optimització dels protocols d' ICSI i SCNT per tal de millorar la viabilitat dels embrions PIV de porcí. El plantejament inicial va consistir en abordar l'estudi tant de la maduració in vitro (MIV) com de l'activació oocitària en el marc de la SCNT. Per a això es va seleccionar entre tres propostes d'activació artificial, el protocol d'activació elèctrica (que va resultar ser el més eficient sota les nostres condicions de treball), i es va estudiar a continuació l'efecte del suplement de sèrum en el medi de MIV, constatant que no va incrementar el desenvolupament d'embrions partenogenotes produïts mitjançant activació elèctrica ni d'aquells produïts mitjançant SCNT. D'altra banda, i per tal d'optimitzar la tècnica de l'ICSI es van abordar diferents aspectes com la concentració de Ca2 + en el medi de microinjecció, el pretractament espermàtic amb Triton X-100 (TX), així com l'addició de suplements de cafeïna o cisteïna al mitjà de cultiu in vitro (CIV) pos-ICSI, per tal d'afavorir la descondensació del nucli espermàtic i l'activació oocitària. Observant que: i) la concentració de Ca2+ no va influir en la taxa de divisió, ni en la de desenvolupament d'embrions partenogenotes procedents d'oòcits microinjectats sense espermatozoïd (sham injection); ii) la cafeïna no va incrementar la formació pronuclear ni en el desenvolupament embrionari posterior, i en combinació amb el pretractament espermàtic amb TX va reduir l'activació oocitària i el desenvolupament embrionari; iii) la formació pronuclear no es va veure incrementada pel pretractament espermàtic amb TX ni pel tractament amb cisteïna, independentment del moment de l'avaluació estudiat.
García Mengual, ME. (2016). OPTIMIZACIÓN DE LAS ESTRATEGIAS REPRODUCTIVAS DE MICROMANIPULACIÓN PARA LA PRODUCCIÓN IN VITRO DE EMBRIONES PORCINOS [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/61448
TESIS

Busca realizar una adecuada selección del número de embriones, así como del día y estadío de desarrollo embrionario que permitirá escoger embriones de alta calidad con la finalidad de conseguir una mayor incidencia de embarazos exitosos en pacientes con problemas de infertilidad y simultáneamente reducir la incidencia de embarazos multiples los cuales tienen mayores riesgos obstétricos y neonatales. Presenta un estudio observacional, descriptivo, retrospectivo y comparativo en el cual se revisaron 555 historias clínicas de pacientes a las que se les realizó la transferencia de un embrión único y que recibieron tratamiento por problemas de infertilidad en el Servicio de Ginecología de la Unidad de Fertilidad del Hospital de la Universidad de Hirosaki, Aomori, Japón; en el periodo comprendido desde enero de 1995 hasta Enero del 2006. Determina la incidencia de embarazos y recién nacidos vivos después de realizar la transferencia de un embrión en estadío de blastocisto el día 5 de desarrollo embrionario. Determina la frecuencia de embarazos y recién nacidos vivos después de realizar la tranferencia de un embrión único el día 3 y el día 4 de desarrollo embrionario. Evalúa que estadio de desarrollo embrionario proporciona la mayor incidencia de embarazos y recièn nacidos vivos. Se obtiene que el 14.3% de embarazos cuando se realizó la transferencia de un embrión el día 3 ( 4-16 blastómeras), 23.4 % de embarazos cuando se realizó la transferencia de un embrión el día 4 (estadío de Morula) y 45% de embarazos cuando se realizó la transferencia de un embrión el día 5 (estadío de blastocisto). El porcentaje de recién nacidos vivos fue de un 42.9% el día 3( 4-16 blastómeras), 42.3 % el día 4 (estadío de Morula) y 77.8% el día 5 (estadío de blastocisto). En cuanto a la paridad principalmene las pacientes fueron nulíparas: 75% (día 3), 69.2% (día 4) y 55.6% (día 5). Encuentra que el grupo etáreo más frecuente estuvo comprendido entre los 36 a 40 años con un 46.4% el día 3( 4-16 blastómeras), un 42.3% el día 4 (estadío de Morula) un 44.4% el día 5 (estadío de blastocisto). La técnica de reproduccion asistida más utilizada fue la fecundacion in vitro: 75% (día 3), 80.8% (día 4) y 77.8% (día 5). El factor de tubárico y masculino fueron los más frecuentes: 42.85% (día 3), 42.3% (día 4) y 66.6% (día 5). Concluye que realizar la transferencia de un embrión en el dia 5 y durante el estadío de blastocisto de desarrollo embrionario permite obtener un mayor número de embarazos y nacimientos vivos, asì como el menor nùmero de complicaciones obstètricas en las parejas con problemas de infertilidad.
Trabajo de investigación

Este trabalho propõe um modelo de transferência de calor e massa para prever a formação de gelo em um container preenchido com legumes congelados. O problema físico é modelado como um meio poroso composto pelo próprio produto e o ar em seu entorno. O regime de convecção natural é assumido dentro do container, o qual promove o transporte de massa. Como uma primeira validação, o modelo é simulado considerando diferentes temperaturas de ar externo, causadas por flutuações da vizinhança. Resultados para quatro ciclos de temperaturas foram comparados, variando separadamente a temperatura média do ar, amplitude e frequência de oscilação. De modo geral, é observado que a temperatura do produto se comporta assim como era esperado e este resultado é diretamente associado à formação de gelo dentro do container. A formação de gelo cresce com uma maior amplitude de oscilação, porém decresce com um aumento na frequência e na temperatura média. Os parâmetros do modelo foram obtidos para dois diferentes produtos: fatias de cenouras congeladas e vagens congeladas, ambos em meio ao ar. As definições de parâmetros são oriundas de revisão bibliográfica, medições experimentais e simulações numéricas. Os parâmetros encontrados para a caracterização desses meios porosos foram similares para ambos os produtos, mesmo eles possuindo diferentes geometrias. A validação experimental foi feita para as fatias de cenoura considerando dois ciclos de temperatura O modelo numérico é capaz de prever o campo de velocidades do ar, as temperaturas do produto e a formação de gelo local. Os resultados foram validados em relação a um grupo independente de resultados numéricos, tal comparação apresentou uma boa concordância. A circulação de ar encontrada é, de fato, devido à convecção natural. O comportamento da temperatura dos produtos simulados concorda com os valores medidos e os valores de temperaturas diferem por menos de 12%. Com respeito à formação de gelo, o modelo é capaz de prevê-la corretamente nas regiões mais suscetíveis a este fenômeno. Porém, a quantidade de gelo formado prevista pelo modelo (1,56 g/semana) é menor do que a experimental (4,67 g/semana), apesar de serem de mesma ordem de magnitude. O efeito de cada parâmetro no modelo é estudado visando detectar maneiras de aprimorar o modelo. Foi encontrado que os parâmetros mais importantes para a formação de gelo total são a difusividade de massa efetiva e o coeficiente de transferência de calor convectivo dentro do container. Ajustando estes parâmetros duas vezes foi possível encontrar resultados melhores com respeito à formação de gelo (3,09 g/semana).
A model of heat and mass transfer is proposed in order to predict frost formation into a closed container filled with frozen vegetables. The physical problem is modeled as a macroporous media composed by the product itself and the surrounding air. Natural convection air flow is assumed into the container, who promotes water mass transport. As a first validation, the model is simulated for several exterior air temperatures, under environmental fluctuations (boundary conditions). Results of four temperature cycles were compared, varying average air temperature, amplitude and frequency of oscillation, one by one. As a general result, it is observed that the product temperature behavior is as expected, and it is directly associated with frost formation into the container. Frost formation increases with large amplitude of oscillation, but decreases with higher frequencies and higher mean temperatures. Model parameters were obtained for two assembling: frozen slices of carrots and air, and frozen extra thin green beans and air. Parameter definition and evaluation combines literature review, measurements and numerical simulation. In general, parameters which characterize these porous media were similar for both products, even though they display different geometries. The experimental validation is performed for carrot slices with two temperature cycles The numerical model is able to predict air velocity field, air and product temperatures, and local frost formation. Results are validated in respect to a set of independent experimental results that shown a good agreement. Air flow circulation is as expected due to natural convection. Product temperature simulated behavior agrees with measurements, and temperature values differ by less than 12%. Respect to frost formation predictions, the model predicts correctly the most susceptible regions to frost formation. However, the quantity of frost formed predicted by the model (1.56 g/ week)is lower than the experimental one (4.67g/week), despite being of the same order of magnitude. The effect of each parameter in the model is study in order to detect how to improve the model. The most important parameters affecting total frost formation are effective mass diffusivity and convective heat coefficient into the storage container. Adjusting these parameters to twice, better results in terms of frost formation could be obtained (3.09 g/ week).

INTRODUCCIÓN: En la práctica clínica de la Reproducción Asistida, cada vez es más habitual la realización de ciclos de transferencia de embriones. Este incremento no solo sucede por la edad avanzada de las pacientes y la consecuente indicación de ovodonación y embriodonación, sino también por el aumento del número de ciclos de criotransferencia. La introducción de la vitrificación como técnica de criopreservación y el aumento de la supervivencia y desarrollo embrionario permiten la existencia de un excedente de embriones, que pueden ser criopreservados para su posterior transferencia. La preparación endometrial previa a la transferencia puede realizarse siguiendo el ciclo natural de la paciente o administrando estrógenos exógenos durante la fase proliferativa. La vía de administración de los estrógenos más popular es la oral, si bien la transdérmica podría ofrecer ciertas ventajas sobre ella. OBJETIVOS: Nuestro objetivo principal es confirmar que la vía transdérmica es igual o superior a la vía oral para la administración de estrógenos en los ciclos de preparación endometrial para la transferencia de embriones, teniendo como variable principal el número de días necesarios para obtener un endometrio trilaminar de más de 7 mm. Como variables secundarias, evaluaremos la comodidad de la vía y satisfacción de la paciente, los niveles plasmáticos de estradiol y las tasas de embarazo, aborto y parto. MATERIAL Y MÉTODOS: Planteamos un estudio prospectivo, randomizado y comparativo, en el que 140 pacientes que van a realizar un ciclo de transferencia de embriones son aleatorizadas en 2 grupos: al grupo I se le asignará una pauta con comprimidos de valerato de estradiol; el grupo II recibirá una pauta con parches de estradiol hemidrato. Se medirá el grosor endometrial, mediante ecografía transvaginal, el día 10+1 de ciclo y, en caso de que no se haya alcanzado un endometrio de más de 7 mm, se realizará una segunda medición el día +15. Se realizará una determinación de los niveles de estradiol en sangre el día que la línea endometrial sea superior a 7 mm. Las pacientes rellenarán un cuestionario de satisfacción, en el que evaluarán la comodidad y efectos secundarios del tratamiento. RESULTADOS: Las pacientes del grupo II alcanzaron un endometrio significativamente mayor el día del primer control que las del grupo I (7.59 mm vs 7.01 mm; p:0.026), con menores niveles de estradiol en sangre (159.16 pg//ml vs 237.14 pg/ml; p:0.000) . Las pacientes del grupo I encontraron su tratamiento más cómodo que las del grupo II. En el grupo II, se reportaron más casos de mastalgia y dermatitis. No hubo diferencias significativas en cuanto a tasa de embarazo, aborto y parto. CONCLUSIONES: El tratamiento con estrógenos transdérmicos permite alcanzar un mayor grosor endometrial en menor número de días, con menores niveles plasmáticos de estradiol, aunque es peor tolerado por las pacientes.
INTRODUCTION: In the clinical practice of Assisted Reproduction, it is more and more frequent the performance of embryos transfer’s cycles. This increment is due not only to the patient’s advanced age and the subsequent indication of egg donation and embryos donation, but also to the increasing number of frozen embryos transfer. The introduction of vitrification as cryopreservation technique and the increment of embryo survival and development allow the existence of extra embryos that can be cryopreserved for its posterior transfer. Previous endometrial preparation can be performed following patient’s natural cycle or administering exogenous estrogens during the proliferative phase. The most common way of estrogens administration is the oral one, although the transdermal way might offer some advantages over the oral one. OBJECTIVE:Our fundamental aim is to confirm that the transdermal way is equal or superior than the oral way for the estrogens administration in endometrial preparation cycles for embryos transfer, taking as principal variable the number of days necessary for obtaining a triple line endometrium thicker than 7mm. As secondary variables, we evaluate comfort and patient’s satisfaction, plasmatic levels of estradiol as well as pregnancy, miscarriage and delivery rates. MATERIALS AND METHODS: We outlined a prospective, randomized and comparative study. In this study, 140 patients who are going to undergo an embryo transfer cycle are randomized in 2 groups: group I will follow a protocol with pills of estradiol valerate; group II will receive a protocol with patches of estradiol hemihydrate. Endometrial thickness will be measured with transvaginal ultrasound on day 10 of the cycle. Should the lining not measure more than 7mm, a second measurement will be performed on day 15 of the cycle. A blood analysis of estradiol level will be performed when the lining is thicker than 7mm. Patients will complete a satisfaction survey to evaluate treatment’s comfort and side effects. RESULTS: Patients of group II reached a significantly thicker endometrium on the day of first control compared to group I’s patients (7.59 mm vs 7.01 mm; p:0.026), with lower level of estradiol in blood (159.16 pg//ml vs 237.14 pg/ml; p:0.000). Patients of group I found their treatment more comfortable than patients of group II. In group II more cases of mastalgia and dermatitis were detected. No significant differences were found in terms of pregnancy, miscarriage and birth rates. CONCLUSIONS:Treatment with transdermal estrogens allows to reach a higher endometrial thickness in less days, with lower plasmatic levels of estradiol, although it is worst tolerated by patients.

Tesis por compendio de publicaciones
La transferencia de embriones debería jugar un crítico papel en los sistemas actuales de producción porcina ya que posibilita el movimiento nacional e internacional de material genético. El objetivo principal de esta tesis fue desarrollar un procedimiento práctico y efectivo de transferencia intrauterina profunda de embriones frescos. En el primer trabajo estudiamos el efecto de dos dosis de eCG para inducir una respuesta superovulatoria en donantes y el rendimiento reproductivo de las receptoras después de la transferencia intrauterina profunda de embriones. En el segundo estudiamos el efecto de la sincronía del ciclo estral en el rendimiento reproductivo de las receptoras. Las transferencias se realizaron en receptoras que salieron en celo 24 h antes o 0 h, 24 h o 48 h después de las donantes. Finalmente, en el tercer estudio se evaluó la transferencia intrauterina profunda no quirúrgica con mórulas producidas in vivo y cultivadas durante 24 h en un medio líquido. En el experimento 1, se estudiaron dos temperaturas y dos medios. En el experimento 2, las mórulas obtenidas se cultivaron en el medio definido a 37 ºC y los blastocistos resultantes de ese se transfirieron a las receptoras. Los resultados de demuestran que el número de donantes para transferir 30 embriones por receptora por vía no quirúrgica se puede reducir mediante los tratamientos de superovulación. Concretamente, una dosis de 1000 UI de eCG es suficiente para obtener unos resultados reproductivos satisfactorios en las receptoras. Los embriones porcinos toleran mejor un ambiente uterino más temprano del que les corresponde cuando son transferidos por vía no quirúrgica en la profundidad de un cuerno uterino. El medio TL-PVA es un medio químicamente definido capaz de mantener una elevada viabilidad in vitro de mórulas porcinas cultivadas a 37 ºC durante 24 h. El rendimiento reproductivo de las receptoras tras la transferencia no quirúrgica en la profundidad de un cuerno uterino reportados en estos estudios representa un avance muy importante para la difusión y comercialización de esta tecnología por la industria porcina. Palabras clave: transferencia de embriones, no-quirúrgica
The use of porcine embryo transfer should play a critical role in pig production because it allows the movement of genetic resources. The main objective of this thesis was to develop an efficient and practical procedure for nonsurgical deep-uterine embryo transfer with fresh embryos. In the first study we evaluated the effect of two doses of eCG to induce superovulation in donor sows and evaluate the reproductive performance of recipients after nonsurgical deep-uterine embryo transfer. In the second study we studied the effect of recipient-donor estrous cycle synchrony on the reproductive performance of recipients. The transfers were conducted in recipients sows that started estrus 24 h before or 0 h, 24 h or 48 h after the donors. Finally, in the third experimental study we evaluated the potential application of non-surgical deep uterine transfers with in vivo-derived morulae cultured for 24 h. In Experiment 1, two temperatures and two media were assessed. In Experiment 2, morulae were cultured in the defined medium at 37 ºC for 24 h, and the resulting blastocysts were transferred to the recipients. The results achieved in these three studies demonstrate that the number of donors needed to nonsurgically transfer 30 embryos per recipient can be decreased and that a dosage of 1000 IU eCG is enough to obtain a satisfactory reproductive performance of the recipients. Porcine embryos tolerate better a less advanced uterine environment if they are nonsurgically transferred deep into a uterine horn. The TL-PVA medium provided a chemically defined medium capable of maintaining a high in vitro viability of porcine morula cultured at 37ºC for 24 h. The excellent reproductive performance of the recipients following NsDU–ETs reported in these three studies represents an important advance for the widespread commercial use of ET by the pig industry.

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Determina la utilidad de la Eco Doppler de las arterias uterinas como predictor de éxito de Fertilización In Vitro, y determina cuáles son los valores de Índice de Pulsatilidad (IP) que estén asociados con los resultados positivos (embarazo) y negativos (no embarazo), determinados previamente a la transferencia de embriones, en las pacientes del Servicio de Infertilidad en el Hospital Nacional San Bartolomé durante el periodo 2010 al 2011. La presente es una investigación aplicada, cuyo diseño es observacional, analítico y retrospectivo. Se realiza la revisión de las historias clínicas del servicio de Infertilidad del Hospital San Bartolomé durante el período 2010 – 2011, serán incluidas las historias clínicas de las pacientes con estudio Doppler del índice de Pulsatilidad y con registro del resultado de la Técnica de Reproducción Asistida empleada. Se colecta los datos mediante una ficha elaborada para este estudio y luego se procesan con ayuda del programa SPSS 15.0. Se observa que el 26.7% de las pacientes en estudio tienen entre 28 y 35 años, mientras el 73.3% tiene entre 36 y 50 años de edad, el IP uterino promedio es menor a 2.7 en el 53.3% de las pacientes, siendo mayor en el 46.7%, mientras la IP uterino mayor es menor a 2.7 en el 37.1% y el 62.9% es superior a 2.7. Él éxito de la gestación se dio en el 45.7% y el fracaso en el 54.3%. Los días de la transferencia de embriones se dio un día después del examen en el 36.2% y fue dentro de 2 días en el 63.8%. Según el estudio realizado, no existe diferencia significativa media (p>0.05) entre las pacientes con éxito y fracaso con los IP uterino derecha, IP uterino izquierda, IP uterino Promedio e IP uterino Mayor, es decir que el IP uterino es igual en ambos grupos por lo cual no se observa que sea un indicador para determinar el fracaso o éxito. De acuerdo al estudio comparativo se observa que no existe relación (p=0.814) entre el IP Promedio (< 2.7) y el resultado de éxito, de la misma forma el IP mayor (< 2.7) no presenta asociación (p=0.458) con la posibilidad de éxito del resultado, es decir que el nivel de IP uterino es de similar proporción tanto en los grupos de pacientes con éxito y fracaso. Sin embargo se puede observar descriptivamente que el grupo de éxito de gestación es ligeramente mayor en los IP promedio <2.7 en comparación de los IP promedio > 2.7, no obstante este comportamiento no se repite con el IP uterino mayor. Se concluye que no existe diferencia significativa entre los índices uterinos promedios y mayores en comparación de los pacientes con resultados de éxito y fracaso, como se observa en el presente trabajo el IP uterino promedio y el IP uterino mayor no está correlacionado, ni presenta asociación con el resultado de la transferencia de embriones, es decir el IP no es un buen indicador para determinar el resultado de éxito o fracaso, no se ha podido determinar según nuestro análisis de relación los rangos de valores de IP de las arterias uterinas que son indicativos de éxito o fracaso de embarazo en el manejo de la mujer infértil.
Trabajo académico

La transgénesis es una potente herramienta biotecnológica para la generación de animales modificados genéticamente con aplicaciones en diversas áreas como veterinaria, biomedicina y agricultura. La técnica de transgénesis mediada por espermatozoides (SMGT) se basa en la habilidad intrínseca de las células espermáticas para unir e interiorizar ADN exógeno y permitir su transferencia al interior de los ovocitos tras la fecundación, e integrarse en el genoma del nuevo embrión. El objetivo global de este estudio fue desarrollar un método eficiente de producción in vitro de embriones porcinos y lechones transgénicos aprovechando la capacidad de transferencia de ADN exógeno que presenta el espermatozoide.La combinación de la técnica de ICSI y SMGT es un método eficiente para la producción de lechones y embriones transgénicos, viéndose incrementada su eficiencia mediante el uso de la recombinasa RecA, obteniendo los primeros lechones nacidos en España mediante ICSI, de los cuales 2 fueron transgénicos.
The transgenesis is a powerful biotechnological tool for the generation of genetically modified animal with applications in different areas such as veterinary medicine, biomedicine and agriculture. The technique of sperm mediated gene transfer (SMGT) is based on the intrinsic ability of the spermatozoa to bind exogenous DNA and to allow its transference to the oocytes after fertilization, and to integrate in the genome of the new embryo. The global objective of this study was to develop an efficient method of in vitro production of transgenic embryos and piglets using the spermatozoa capacity to bind to exogenous DNA.The combination of the ICSI technique and SMGT is an efficient method for the production of transgenic embryos and pigs. The efficiency was increased by the use of recombinase RecA, obtaining the first piglets born in Spain by means of ICSI and two of them were transgenic.

Tesis (Maestría en Reproducción Bovina) -- UNC-FCA ; Instituto de Reproducción Animal Córdoba, 2019
El presente trabajo de investigación tuvo como objetivo determinar si la aplicación intrauterina de progesterona disuelta en un polímero en el momento de la transferencia del embrión realizada en novillas o la administración de 2000 UI de hCG cuatro días antes de la transferencia del embrión, repercuten en las tasas de preñez frente a un grupo Control que no recibe ningún tipo de suplementación exógena. Para este efecto se utilizaron 3 grupos, el Grupo Control (n=100) que no tuvo ninguna intervención, el Grupo hCG (n=086) al cual se le aplicaron 2000 UI de hCG (hCG; Fertivet Chalver, Colombia) cuatro días antes de la transferencia y el grupo Polímero (n=100) al que se le adicionó a la pajilla que contenía el embrión producido in vitro, una columna con 2,5 mg de progesterona disueltos en un biopolímero. Los tres grupos fueron sometidos a un proceso de sincronización que iniciaba el Día 0 con la inserción de un dispositivo intravaginal con progesterona (DIB 0,5 g, Syntex SA, Argentina) y 2 mg de benzoato de estradiol (BE, Benzoato de Estradiol, Syntex, Argentina). En el Día 8 se removieron los DIB y se administró 500μg de Cloprostenol (PGF2α; Ciclase DL, Syntex, Argentina), 0,5 mg de Cipionato de estradiol (CPE; Cipyosin, Syntex, Argentina), 400 UI de gonadotrofina Coriónica equina (eCG; SincroeCG, Ourofino, Brasil). El Día 17 se transfirieron los embriones. Todas las hormonas se administraron por vía intramuscular profunda con agujas calibre 18 x 1.5 y jeringas de 3 y 5 ml. Se tomaron muestras de sangre en el 7 % de las receptoras, para medir la cantidad de progesterona el día de la transferencia y los días 14 y 21 posteriores a la misma. Las muestras fueron tomadas a 7 animales del Grupo Control, 7 del Grupo Polímero y 8 del Grupo hCG. En la presente investigación, se observó que la tasa de preñez del grupo hCG fue superior (40,7%) al grupo Control (30,0%) y al grupo Polímero (20,0%), demostrando que la aplicación de progesterona intrauterina puede tener un efecto negativo sobre la tasa de preñez. El análisis estadístico demostró que la única variable que influyó en el porcentaje de preñez fue el grupo. Ninguna de las otras variables influyó, y no hubo efecto de las interacciones. La formación de cuerpos lúteos accesorios que pudieron ser detectados por ecografía diagnosticada el día de la transferencia, fue escasa, de 286 hembras transferidas sólo se diagnosticaron 6 cuerpos lúteos accesorios, equivalente al 2% de los animales transferidos. En cuanto a los niveles de progesterona en sangre se evidenció una caída en los niveles de esta hormona hacia el día 14 posterior a la transferencia del embrión, y luego un ascenso en los niveles de la misma hacia el día 21. Lo anterior puede constituir una tendencia interesante a incrementar la progesterona mediante la aplicación intrauterina, aunque no es concluyente dada la varianza presentada en los resultados y el tamaño de la muestra. En promedio el Grupo Polímero presentó unos niveles inferiores (6,2 ng/ ml) el día 0 o día de la transferencia del embrión, a partir del día 14 se observó un aumento significativo (7,8 ng/ ml). Los grupos hCG y Control tuvieron un nivel superior (10 a 12 ng/ml) en el día 0 y una caída más significativa hacia el día 14 (6,0 a 7,0 ng/ml) y se mantuvieron los mismos niveles hasta el día 21.
The objective of this research was to determine whether the intrauterine application of progesterone dissolved in a polymer at the moment of the embryo transfer in heifers and the application of 2000 IU of hCG four days before the embryo transfer, affect the pregnancy rates against a control group that does not receive any type of exogenous supplementation. For this effect, 3 groups were used, Group 1 or control (n=100), group that did not have intervention, Group 2 or hCG group (n=086) to which 2000 IU of hCG (hCG, Fertivet, Chalver, Colombia) were applied four days before the embryo transfer and Group 3 or Polymer Group (n=100) to wish was added to the straw containing the embryo produced in vitro, a column with 2.5 mg of progesterone dissolved in a biopolymer, the three groups underwent a synchronization process that began on Day 0 with the insertion of an intravaginal device with progesterone (DIB 0.5 g, Syntex SA, Argentina) and 2 mg of estradiol benzoate (BE, Benzoate of Estradiol, Syntex, Argentina). On Day 8, the DIBs were removed and 500 μg of Cloprostenol (PGF2α, Cyclase DL, Syntex, Argentina), 0.5 mg of estradiol cypionate (CPE, Cipyosin, Syntex, Argentina), 400 IU of equine chorionic gonadotropin were administered (eCG; SincroeCG, Ourofino, Brazil). On Day 17 the embryos were transferred. All hormones were administered by deep intramuscular injection with 18 x 1.5 gauge needles and 3 and 5 ml syringes. Blood samples were taken in 7% of the recipients, to measure the amount of progesterone on the day of the transfer and on days 14 and 21after the same. The samples were taken from 7 animals of the Control Group, 7 animals from the Polymer Group and 8 from the hCG Group. In the present investigation, it is observed that the pregnancy rate of group 2 or hCG Group was higher (40.7%) to group # 1 or Control Group (30%) and to group # 3 or Polymer Group (20%), demonstrating that the application of intrauterine progesterone can have a negative effect on the pregnancy rate. The statistical analysis showed that the only variable that influenced the percentage of pregnancy was the group. None of the other variables influenced, and there was no effect of the interactions. The formation of accessory corpus luteum that could be detected by ultrasound diagnosed on the day of the transfer were scarce. Of 286 transferred females, only 6 accessory luteal bodies were diagnosed, equivalent to 2% of the transferred animals. Regarding the levels of progesterone in blood, a drop in the levels of this hormone towards the 14th day after the embryo transfer is evidenced, and then a rise in the levels of the same towards day 21. The previous thing can constitute a interesting tendency to increase progesterone through intrauterine application, although it is not conclusive given the variance presented in the results and the sample size. On average, the Polymer Group presented lower levels (6,2 ng/ml) towards day 0 or day of the embryo transfer, from day 14 it presented a significant increase (7,8 ng/ml). The hCG and Control Groups had a higher level (10 to 12 ng/ml) on day 0 and a more significant fall towards day 14 ( 6,0 to 7,0 ng/ml) and the same levels were maintained until the day 21.

Tesis (Doctor en Ciencias Agropecuarias)--UNC- Facultad de Ciencias Agropecuarias, 2015
El objetivo de esta tesis fue evaluar la respuesta superovulatoria en donantes de embriones tratadas con aplicaciones reducidas de FSH diluida en una formulación de liberación lenta a base de ácido hialurónico (AH). En el experimento 1, se evaluó la vía de administración de la FSH diluida en AH en una sola aplicación. No hubo diferencias en el número de embriones transferibles entre las vacas del grupo Control (8 aplicaciones de FSH diluida en solución fisiológica cada 12 h y por 4 días; 10,3 ± 3,4) y las tratadas con FSH diluida en HA y administrada por via intramuscular (i.m.; 5,0 ± 1,7); pero el número de embriones fue menor (1,3 ± 1,1; P<0,05) con la administración subcutánea. En el experimento 2, se compararon dos concentraciones distintas de AH (10 o 20 mg/mL) por vía i.m. en una sola aplicación. La FSH diluida en la solución más concentrada de AH resultó en un mayor número de embriones transferibles (6,8 ± 0,8 y 2,9 ± 0,7 respectivamente, P<0,05). En el experimento 3 se comparó un tratamiento de una sola aplicación i.m. de FSH diluida en una solución 20 mg/mL de AH con la de un protocolo superestimulatorio Control (8 aplicaciones de FSH cada 12 h por 4 días). No se encontraron diferencias (P>0,05) entre los dos protocolos en el numero de embriones transferibles obtenidos (7,1 ± 1,3 y 5,3 ± 0,8; respectivamente). El experimento 4 tuvo como objetivo evaluar la respuesta superovulatoria de donantes Angus, Brangus y Bonsmara tratadas con distintas dosis de FSH diluida en AH (20 mg/mL) y administrada en una única inyección por vía i.m. o de FSH diluida en solución fisiológica y administrada en 8 inyecciones cada 12 h y por 4 días. Los resultados obtenidos sugieren que las dosis adecuadas para dichas razas son 300, 260 y 200 mg respectivamente. A pesar de que estos resultados demostraron que una sola aplicación de FSH diluida en 20 mg/mL de AH resulta en una satisfactoria respuesta superovulatoria, la solución de AH es demasiado viscosa y difícil de mezclar con la FSH. Para evitar esto se realizó el experimento 5 para evaluar concentraciones más bajas de AH (10 y 5 mg/mL) pero en dos aplicaciones cada 48 h. No hubo diferencias en el número de embriones transferibles en las vacas tratadas con el tratamiento Control (6,7 ± 1,3) y las tratadas con dos aplicaciones cada 48 h de FSH en AH (8,9 ± 1,4 y 9,3 ± 1,9 para 10 y 5 mg/mL, respectivamente). Por último, el experimento 6 tuvo como objetivo evaluar la eficacia de la dilución de FSH en 5 mg/ml AH y administrado en dos aplicaciones i.m. cada 48 hs, luego de haber sido refrigerada o congelada por dos semanas. No se VI encontraron diferencias entre los distintos métodos de conservación de la dilución (P>0,05). En conclusión la superestimulación con una o dos aplicaciones de FSH diluida en AH resulta en una producción de embriones transferibles similar a la de un tratamiento tradicional de dos inyecciones i.m. 2 veces al día durante 4 días.
The aim of this thesis was to evaluate the superovulatory response in donors treated with reduced applications of FSH diluted in a slow release formulation based on hyaluronic acid (HA). Experiment 1, was designed to evaluate the route of administration (i.m. or s.c.) of FSH diluted in AH in a single injection. There were no differences in the number of transferables embryos between cows in the Control group (8 twice-daily administrations of FSH diluted in saline for 4 days; 10.3 ± 3.4) and those treated with FSH diluted in HA and administered intramuscularly (i.m.; 5.0 ± 1.7); however, the number of transferable embryos was lower in those that were treated subcutaneously (1.3 ± 1.1; P<0.05) Experiment 2 was designed to compare two concentrations of HA (20 mg/mL or 10 mg/mL) in a single i.m. injection. The FSH diluted in the more concentrated HA solution resulted in more (P<0.05) transferable embryos (2.9 ± 0.7 and 6.8 ± 0.8, for 10 mg/mL and 20 mg/mL, respectively). Experiment 3 was designed to compare superovulatory response in donor cows treated with a single i.m. injection of Folltropin-V diluted in 20 mg/ml of HA with those treated with the Control protocol (8 twice-daily i.m. injections for 4 days). No difference (P>0.05) in the number of transferable embryos was found between the two treatments (7.1 ± 1.3 and 5.3 ± 0.8, respectively. Experiment 4 was designed to compare superovulatory responses in Angus, Brangus and Bonsmara donor cows following the use of different dosages of FSH diluted in HA given as a single i.m. administration or by multiple i.m. injections. Results suggest that the appropriate dosages for each breed are 300, 260 and 200 mg, respectively. Although these results demonstrated that a single administration of FSH diluted in 20 mg/mL HA results in a satisfactory superovulatory response, the AH solution was too viscous and difficult to mix with the FSH. Therefore, Experiment 5 was designed to evaluate superovulatory response in beef cows treated with two i.m. injections (48 h apart) of FSH diluted in reduced AH concentrations (10 mg/mL or 5mg/mL). No differences (P=0.32) were found in the number of transferable embryos in cows in the Control group (6.7 ± 1.3) and those treated with FSH diluted in an AH solution and given in two i.m. injections (8.9 ± 1.4 and 9.3 ± 1.9 for 10 mg/mL and 5 mg/mL, respectively). Finally, Experiment 6 was designed to investigate the efficacy of FSH-AH solution after storage in the freezer or in the refrigerator for two weeks. There were no significant differences among groups (P>0.05). In conclusion, superstimulation by one or two injections of FSH diluted in AH results in similar number of embryos than the traditional treatment in which FSH is administered in twice-daily i.m. injections for 4 days.

En el presente trabajo se estudian distintos aspectos relacionados con la congelación y el almacenamiento de productos congelados, con los siguientes objetivos: - Optimizar el diseño de sistemas para la congelación o almacenamiento de alimentos a través de un mejor conocimiento de los fenómenos de transferencia de calor que tienen lugar en los mismos. Esto involucra un adecuado dimensionamiento de los equipos con el consiguiente ahorro en los costos de inversión. - Desarrollar métodos simplificados y muy precisos de predicción de tiempos de congelación y descongelación, con lo que se contribuirá al objetivo anterior y, principalmente, a la operación eficiente de los equipos con los consiguientes ahorros de energía y costos de operación y mejora en la calidad de los productos procesados. - Estudiar el comportamiento térmico de diversas estibas de alimentos congelados frente a fluctuaciones de la temperatura del ambiente de almacenamiento y analizar los efectos de éstas sobre la calidad de los alimentos, para optimizar el diseño de los sistemas de almacenamiento y distribución.

Tesis (Maestría en Reporducción Bovina) -- UNC- Facultad de Ciencias Agropecuarias ; Instituto de Reproducción Animal Córdoba, 2017
Esta tesis tuvo como objetivo evaluar el efecto de la presentación de celos y el tratamiento con GnRH como segundo inductor de ovulación en los animales que no manifiestan celo, sobre la tasa de concepción (TC) a los programas de inseminación artificial (IATF) y de transferencia embrionaria a tiempo fijo (TETF). Se realizaron cuatro experimentos en vacas y vaquillonas de razas para carne, dos de ellos en programas de IATF y dos en programas de TETF. Para la sincronización de celos se utilizó el protocolo convencional que consiste en la inserción de un dispositivo intravaginal con progesterona por siete u ocho días, benzoato de estradiol (EB) en el Día 0 y Cipionato de estradiol (ECP) en el Día 8; o se utilizó el protocolo J-Synch, en el cual se inserta el dispositivo por seis días y se administra EB en el Día 0 y GnRH en el Día 9. En el Experimento 1, se evaluó si la IATF de vacas que mostraron celo a las 48 h del retiro del dispositivo intravaginal resultaba en una mayor TC en comparación con aquellas que no manifestaron y si el tratamiento con GnRH para aquellos animales que no expresaban celo en ese momento mejoraba la TC a la IATF realizada entre las 54 y 56 h. Tanto la presentación del celo como la GnRH en los animales que no manifestaron celo mejoraron la TC (56% vs 48% y 58% vs 34%, respectivamente; P=0,04). El objetivo del Experimento 2 fue evaluar el efecto de la presentación de celos sobre la tasa de concepción de vacas y vaquillonas sincronizadas con el protocolo J-Synch. Las vacas y vaquillonas en celo e IATF a las 60 h de la remoción del dispositivo tuvieron una mayor TC que las que no mostraron celo y recibieron IATF cerca de las 72 h (67% vs 53%; P=0,04). En el Experimento 3, el objetivo fue evaluar si la presentación de celos y el tratamiento con GnRH aplicada a las 48 h desde la remoción del dispositivo a las vacas que no manifiestan celo, aumenta la tasa de aprovechamiento (TA) y la TC de receptoras en programas de TETF sincronizadas con un protocolo convencional con dispositivos con progesterona y ECP como inductor de ovulación. Las receptoras que manifestaron celo, tuvieron una mayor TA y TC (99% y 48%, respectivamente) que las que no manifestaron celo (64% y 39%; P<0,01). Así mismo, las que no manifestaron celo y recibieron GnRH lograron una TC más alta (46%) que las que no recibieron GnRH (26%, P<0,05). En el Experimento 4 se evaluó el efecto del celo sobre la TA, TC, pérdidas embrionarias/fetales tempranas y tardías, y tasa de parición del protocolo convencional con dispositivos con progesterona y ECP comparado con el protocolo J-Synch. La TC fue del 37% para las receptoras del tratamiento convencional y 39% para las receptoras del J-Synch y no difirió significativamente (P=0,43), pero la TA fue mayor en las tratadas con el protocolo convencional (89% convencional vs 83% J-Synch; P=0,03;). Cuando se tuvo en cuenta el total de receptoras sin importar el tratamiento de sincronización se encontró una tendencia (P=0,06) a una mayor TC de las receptoras que mostraron celo (39%) vs las que nunca lo hicieron (26%). Además, las pérdidas embrionarias/fetales fueron mayores (P=0,004), y la tasa de parición fue menor (P=0,01) en las receptoras que no mostraron celo (67% y 2,9%, respectivamente). Las conclusiones principales de esta Tesis son: 1) que la expresión del celo aumenta las TC en los programas de IATF y las TA, TC y tasa de parición en los programas de TETF. 2) que el tratamiento con GnRH a los animales que no manifiestan celo luego del retiro del dispositivo con progesterona aumentan la TC en los programas de IATF y la TA y TC en los programas de TETF.
The aim of this thesis was to evaluate the effect of estrus behaviour and the treatment with GnRH, to induce ovulation non-estrus animals, on conception rate (CR) to fixed-time artificial insemination (FTAI) and embryo transfer (FTET) programs. Four experiments were carried out in beef cows and heifers, two of them in FTAI and two in FTET programs. Two treatments were used for estrus synchronization: the conventional protocol, consisting of the insertion of an intravaginal device with progesterone for 7 or 8 days, estradiol benzoate (EB) on Day 0 and estradiol cypionate (ECP) on Day 8; or the J-Synch protocol, in which the device is inserted for 6 days and EB is administered on Day 0 and GnRH on Day 9. The objective of Experiment 1 was to evaluate whether the FTAI of cows showing estrus at 48 h from device removal improved CR in comparison to those that did not showed signs of estrus and if the treatment with GnRH for those animals that did not show estrus at that time improved the CR to the FTAI performed 54 to 56 h after device removal. The presence of estrus and GnRH in non-estrus animals improved CR (56% vs 48% and 58% vs 34%, respectively, P=0.04). The objective of Experiment 2 was to evaluate the effect of estrus expression on the CR of cows and heifers synchronized with the J-Synch protocol. Cows and heifers in estrus and FTAI at 60 h after device removal had a higher CR than those that did not show estrus and were FTAI at 72 h (67% vs 53%, P=0.04). The objective of Experiment 3 was to evaluate whether the expression of estrus and the treatment with GnRH those animals not in estrus by 48 h after device removal increased the rate of utilization (UR) and CR of recipients synchronized with the conventional protocol and receiving embryos by FTET. The estrus expression increased the UR and CR (99% and 48%, respectively) compared to those did not show estrus (64% and 39%, respectively, P<0.01). Likewise, those who did not show estrus and received GnRH achieved a higher CR (46%) than those who did not receive GnRH (26%, P<0.05). Experiment 4 evaluated the effect of estrus expression on UR, CR and pregnancy loses in recipients synchronized with the conventional de J-Synch protocols. Although were no differences among groups in CR (conventional: 37% and J-Synch: 39%, P=0.43), the UR was higher in recipients in the conventional group (89%) than in those in the J-Synch group (83%, P=0.03;). In addition, when the total number of recipients was taken into account regardless of the synchronization treatment, there was a tendency (P=0.06) for a higher CR of the recipients that showed estrus (39%) vs those who never did (26%). Furthermore, embryo/fetal loses were higher (P=0.004) and the final calving rate was lower (P=0.01) in recipients that did not show estrus (67% and 2.9%, respectively). The main conclusions of this thesis are: 1) the expression of estrus plays a fundamental role for the CR in the synchronization programs for FTAI and for UR, CR and calving rate in FTET programs for generating pregnancies. 2) GnRH treatment in animals that do not show estrus after the removal of the progesterone device increases the CR in FTAI programs and the UR, CR in FTET programs.