Dissertations / Theses: 'Transplantation de cellules fétales'

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Cattan, Pierre. "Apoptose et transplantation des cellules ß." Paris 11, 2003. http://www.theses.fr/2003PA11T013.

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Ghazal, Khaldoun. "Le rôle des cellules T régulatrices en transplantation hépatique." Thesis, Paris 6, 2014. http://www.theses.fr/2014PA066225/document.

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Abstract:

Les résultats de la transplantation hépatique (TH) se sont considérablement améliorés mais la survie à long terme est une préoccupation des transplanteurs. Elle dépend de la survenue d’un rejet, de la récidive de l’hépatite C, du traitement immunosuppresseur et de ses complications. Après une TH suite à une complication de l’hépatite C, l'infection du greffon par le virus de l’hépatite C (VHC) est constante, et l'évolution de l'hépatite chronique est plus rapide et agressive que chez les non transplantés. L’implication des cellules T régulatrices (Treg) a été suggérée dans l’induction de tolérance après transplantation et dans la persistance de l’infection par le VHC. Le nombre et la fonction des Treg seraient influencés par le traitement immunosuppresseur (IS). Dans ce contexte, je me suis intéressé au rôle des Treg dans l’évolution de la TH, et les effets des différents traitements utilisés (IS et anti-VHC) sur ces cellules. Les résultats montrent que les Treg, en particulier les cellules régulatrices de type 1 (Tr1), seraient prédictifs de la réponse au traitement antiviral C, et aussi que les Treg pourraient être impliquées dans l’évolution de la récidive virale C après TH. JE montre aussi que les inhibiteurs de mTor induisent une augmentation de taux des Treg chez les patients transplantés hépatiques après changement du traitement d’un anticalcineurine, et que les anticalcinurines réagissent différemment sur l’activité suppressive des Treg in vitro. En conclusion, je précise le rôle majeur des Treg à la fois dans l’évolution de la récidive virale C sur le greffon hépatique, mais également quels sont les IS qui auraient un effet favorable sur le développement des Treg
The results of liver transplantation (LT) have improved significantly, but long-term graft survival is still a major concern for doctors. It depends on the rejection rates, the recurrence of hepatitis C, and the immunosuppressive treatment and its complications. After LT, the graft reinfection with HCV is constant, and the evolution of chronic hepatitis is faster and more aggressive when compared to the time course before transplantation. It has been suggested the regulatory T cells (Treg) are involved in the induction of tolerance after organ transplantation, and in the persistence of HCV infection by suppressing the HCV-specific T responses. Furthermore, the number and function of Treg are very likely influenced by the immunosuppressive therapy used after transplantation. In this context, my work focuses on the role of Treg cells in the evolution of liver transplantation, and the effects of different treatments used after LT (immunosuppressive and anti-HCV) on this population. The results of my thesis show that the Treg cells (Type-1 regulatory cells, Tr1, in particular) are predictive of the response to the anti-HCV treatment after LT, and that Treg cells are associated with severe evolution of recurrent hepatitis C. I show that mTOR inhibitors have a positive impact on the number of circulating Treg cells in patients who underwent a conversion of therapy from Tacrolimus to a mTOR inhibitor, and that calcinurine inhibitors have different effects on Treg suppressive activity in vitro. In conclusion, we bring evidences on the involvement of Treg cells in HCV recurrence and treatment failure after liver transplantation and in their interaction with immunosuppressive drugs

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Dimicoli-Salazar, Sophie. "Conversion myogénique striée de cellules humaines non musculaires." Paris 7, 2010. http://www.theses.fr/2010PA077057.

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Abstract:

Peu de thérapeutiques efficaces existent pour les patients souffrant de myopathies ou de cardiomyopathies. La greffe de cellules du tissu à soigner a d'abord été testée en clinique mais n'a pas conduit à un réel bénéfice. Dans le contexte de la plasticité cellulaire, le potentiel myogénique de nombreux autres types de cellules a alors été testé sur l'animal avec des taux de conversion modestes. La reprogrammation de cellules non myogéniques par des facteurs clés paraît une alternative intéressante. Pour le muscle squelettique, Myf5 est un facteur maire. Pour le muscle cardiaque, les facteurs Nkx2. 5, Gata4 et Tbx5 sont essentiels. Nous avons mené des expériences de reprogrammation musculaire striée avec ces différents transgènes. Concernant le muscle squelettique, au contraire de ce qui a été observé avec les cellules souches hématopoïétiques (CSH), nous avons obtenu des résultats encourageants avec les fibroblastes de peau, les cellules souches mésenchymateuses (CSM), les cellules endothéliales provenant de la veine de cordon ombilical (HUVEC) et les progéniteurs endoméliaux de sang de cordon. Dans le cas du muscle cardiaque, nous avons utilisé la combinaison double Nkx2. 5/Gata4. Aucun résultat probant n'a été constaté dans les CSH. En revanche, cette combinaison a conduit à une initiation du programme cardiaque pour les 10T1/2, les CSM, les HUVECs, les cellules satellites. Dans ce dernier cas, la combinaison triple Nkx2. 5 /Gata4/ Tbx5 a amélioré cette réorientation. Ce travail permet d'ouvrir la discussion sur l'intérêt thérapeutique potentiel de ces outils et d'avoir une nouvelle approche concernant la compréhension des phénomènes de transdifférenciation cellulaire
Treatments for patients suffering from myopathies and cardiovascular diseases are not always very efficient. Therefore, injection in the diseased organs of some of their healthy precursors has been tested as possible replacement sources, with no significant improvement. Therefore, with all the enthusiasm linked to the stem cell plasticity phenomenon, the therapeutic efficiency of numerous other cell types has been experimentally tested, with modest myogenic conversion. Several teams have experimentally tested the efficacy of reprogrammed non myogenic cells by using factors which have a key role in muscle regulation. For skeletal muscle, Myf5 is a master gene. For heart myogenesis, Nkx2. 5, Gata4 and Tbx5 are important. In our work, we followed this strategy. In the skeletal muscle case, we used Myf5 to reprogram several primary human cells. Except for the haematopoietic stem cells (HSC), we observed promising results with skin fibroblasts, mesenchymal stem cells (MSC), human umbilical vein endothelial cells (HUVEC), endothelial progenitors from umbilical cord blood. In thé heart muscle case, we co-transduce cells with Nkx2,5 and Gata4. We observe no change for HSC. Mesenchymal stem cells, HUVEC and satellite cells could only initiate cardiac transcriptional program. The combination of the three transgenes Nkx2. 5, Gata4 and Tbx5 in satellite cells could improve significantly the cardiac program activation. This work allows us to evaluate the myogenic potential of several reprogrammed primary human cells expressing particular transgenes. It opens discussion on the cell replacement therapy area and may give new informations on the transdifferenciation phenomenon

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Rabesandratana, Oriane. "Les cellules ganglionnaires rétiniennes dérivées de cellules souches pluripotentes humaines : de la caractérisation à la transplantation." Thesis, Sorbonne université, 2019. http://www.theses.fr/2019SORUS322.

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Abstract:

Parmi les stratégies en développement de nouveaux traitements pour les neuropathies optiques, la thérapie cellulaire par transplantation de cellules ganglionnaires rétiniennes (CGRs) dérivées de cellules pluripotentes humaines est l’un des axes de recherche les plus prometteurs. Au cours de la réalisation du projet présenté dans ce document, nous avons validé la production optimisée de CGRs, à partir de quatre lignées de cellules souches pluripotentes induites (iPS) humaines, par une double sélection selon les conditions de culture in vitro et un protocole de tri magnétique basé sur l’expression de l’antigène de surface CD90/THY1. Nous avons caractérisé les CGRs enrichies par ce double protocole de sélection selon leurs propriétés morphologiques, moléculaires et fonctionnelles. Ces résultats furent validés pour un total de quatre lignées cellulaires iPS, dont une lignée rapportrice fluorescente ubiquitaire, générée par stratégie Crispr-Cas9. La transplantation par injection intravitréenne des CGRs dérivées de cette lignée rapportrice, sur un modèle murin ayant subi un écrasement du nerf optique, a permis d’observer une intégration partielle des cellules survivantes dans la rétine hôte permettant d’établir la preuve de concept quant à la possibilité de réaliser ce type de transplantation. Ce travail devra être poursuivi afin d’étudier la capacité de ces cellules à établir des contacts fonctionnels avec les partenaires rétiniens et cérébraux
Among the different treatments for optic neuropathies, cell therapy using transplantation of retinal ganglion cells (RGCs) derived from human induced pluripotent stem cells (hiPSC) is one of the most promising strategy. In this project, we validated the optimized production of RGCs from retinal organoids derived from four different hiPSC lines. Our methodology included a double selection process, comprising the culture of retinal dissociated cell in adherent conditions and a magnetic sorting protocol, based on the expression of surface antigen CD90/THY1. We identified enriched RGCs resulting from this double protocol, according morphological, molecular and functional properties. These results were validated for all four hiPSC lines, including a ubiquitous fluorescent reporter cell line, using Crispr/Cas9 strategy. Intravitreal injection of reporter hiPSC line-derived RGCs into an optic nerve crush mouse model led to a partial integration of surviving cells into the host retina establishing the possibility to performed RGC transplantation. This work will be continued in order to explore the capacity of hiPSC-derived RGCs to reconnect with both retinal partners and with the different targets in the brain

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Le, Grand Fabien. "Les cellules embryonnaires : des outils pour la reconstruction musculaire squelettique." Nantes, 2004. http://www.theses.fr/2004NANT2059.

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Abstract:

Nous avons étudié les potentialités myogéniques de différents types de cellules embryonnaires de souris. La différenciation musculaire des cellules dermomyotomales est modifiée lorsqu'elles sont cultivées avec des cellules osseuses ou nerveuses issues de leur microenvironnement. Cette association permet aux cellules dermomyotomales greffées dans un muscle adulte de proliférer et de fusionner entrer elles pour former des myotubes hautement différenciés. Les progéniteurs endothéliaux de muscles embryonnaires purifiés par séparation immunomagnétique sur la base de l'expression du gène CD34, sont capables en culture in vitro d'activer différents programmes géniques et en particulier de se différencier en myofibres squelettiques. Suite à la transplantation dans un muscle de souris mdx, les cellules CD34+ révèlent de remarquables capacités à se disperser et à fusionner avec les fibres de l'hôte, restaurant l'expression de la dystrophine
We studied the myogenic potential of different types of mouse embryonic cells. In vitro myogenic commitment of dermomyotomal cells is modified when they are co-cultivated with osteogenic or neural cells from their microenvironment. The combination of these environmental cells is needed for successful development of dermomyotomal cells into adult transplanted muscle. Endothelial progenitor cells within embryonic skeletal muscles purified by magnetic-bead selection on the basis of CD34 expression, are able to differentiate into endothelial cells and skeletal myofibers in in vitro culture. When transplanted into an adult mdx mouse muscle, CD34+ cells display a high propensity to disperse within the recipient muscle, fuse with host fibers, restoring dystrophin expression

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Lemoine, Roxane. "Propriétés régulatrices des cellules dendritiques humaines traitées par l’acide mycophénolique." Thesis, Tours, 2009. http://www.theses.fr/2009TOUR3138/document.

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Abstract:

En transplantation d’organes, la réponse immunitaire de l’hôte contre son donneur reste une cause très importante de perte de greffons. Ainsi, un meilleur contrôle de la réponse par induction d’une tolérance spécifique reste une priorité en transplantation humaine. Dans ce travail, nous avons exploré les effets de l’acide mycophénolique (MPA, immunosuppresseur couramment utilisé en transplantation) sur les cellules dendritiques (DC) humaines. Nous avons mis en évidence que le MPA diminue la capacité des DC à activer des lymphocytes T CD8+ cytotoxiques allogéniques en diminuant la synthèse d’interféron gamma dans les DC. Par ailleurs, les DC traitées par MPA sont capables d’induire des lymphocytes T CD4+ régulateurs antigène-spécifiques (iTreg) qui peuvent reprogrammer des DC matures en DC aux propriétés tolérogènes. Enfin, ces iTreg entraînent une réduction de la sécrétion d’IFN-γ par les cellules T CD8+ et une inhibition de leur fonction cytotoxique en réponse à une stimulation allogénique. L’ensemble de ces résultats obtenus in vitro suggèrent que les DC-MPA humaines pourraient être potentiellement utilisés en thérapie cellulaire afin de promouvoir une tolérance d’allogreffe
In organ transplantation, host immune response against donor still remains a major cause of graft loss. A better control of allogeneic response through the induction of specific tolerance is a major goal in human transplantation. In this work, we explored the effects of mycophenolic acid (MPA, an immunosuppressive drug currently used in transplantation) on dendritic cell (DC) functions. We demonstrated that MPA inhibits DC ability to induce allogeneic cytotoxic CD8+ T cells through inhibition of interferon gamma synthesis in DC. Moreover, mycophenolic acid-treated dendritic cells (MPA-DC) are able to induce antigen-specific regulatory CD4+ T lymphocytes (iTreg) which can convert fully mature DC into tolerogenic DC. These iTreg decrease the expression of proteins associated with cytotoxic function (perforin and granzymes A and B), reduce IFN-γ production by CD8+ T cells and inhibit their cytotoxic function in response to allogeneic stimulation. These results taken together suggest that human MPA-DC could be use in cellular therapy in order to promote allograft tolerance

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Andrieu-Vidal, Isabelle. "Etude des phénomènes impliqués en regénération hépathique, en vue de favoriser l'implantation en transplantation d'hépatocytes." Besançon, 2008. http://www.theses.fr/2008BESA2074.

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Abstract:

La transplantation d'hépatocytes peut être une alternative thérapeutique à la transplantation hépatique. Pour mieux étudier les mécanismes mis en jeu dans une transplantation d'hépatocytes, différents modèles d'insuffisance hépatique aigüe de la souris Nude ont été élaborés: hépatectomie partielle, traitement par D-Galactosamine, ou par un anticorps anti-Fas spécifique de souris, le Jo2. La transplantation d’hépatocytes a été réalisée dans tous ces modèles, montrant un taux d'implantation comparable à celui d’une souris témoin, sauf dans le modèle de souris traitée par des injections sublétales répétées de Jo2, oh l’implantation était multipliée par 7. Une analyse génomique a révélé une up-régulation des gènes régulateurs du cycle cellulaire, avec une répression de gènes circadiens prolifératifs, pouvant être interprété comme un blocage du cycle des hépatocytes de souris, tandis que les hépatocytes de rat pouvaient proliférer. Ceci pourrait correspondre à un modèle d'avantage sélectif. Dans ce même modèle, des hépatocytes humains ont été transplantés avec un taux d’implantation inconstant et très bas. Cependant, avec des doses de Jo2 létales répétées, la transplantation d’hépatocytes humains diminuait la mortalité. L'analyse génomique ne retrouvait plus d'avantage sélectif ce qui expliquerait l'absence d'implantation, tandis qu'il existait une up-régulation des gènes de prolifération précoce et des gènes circadiens. La transplantation d’hépatocytes humains semble modifier la réponse du foie murin au Jo2, ce qui pourrait expliquer l'amélioration de la survie. En conclusion, une implantation réussie nécessite un climat favorable prenant en compte une double interaction des hépatocytes transplantés et du foie receveur
Hepatocyte transplantation could become an interesting alternative to liver transplantation. In order to improve the understanding of the mechanisms involved in hepatocyte transplantation, we first elaborated different Nude mouse models of acute liver deficiency, by partial hepatectomy, D-galactosamine or thioacetamide treatment or liver apoptosis induced by a mouse specific anti-Fas antibody: Jo2. Rat hepatocyte transplantation was performed into these different models, it resulted in an engrafment rate similar to non-treated Nude mouse, except in the model of Nude mouse challenged by repeated sublethal Jo2 injections. In the latter mouse model, rat hepatocyte implantation was 7-fold higher better than in others. Genomic analysis revealed mainly ago-regulation of cell cycle genes associated with down-regulation of circadian genes known to be proliferative ones. This was interpreted as a Nude mouse cell cycle blockage, whereas rat hepatocytes could proliferate. This could correspond to a selective advantage model. In Nude mouse challenged by repeated sublethal Jo2 injections, transplantation of human hepatocytes resulted in a very low and inconsistant engrafment. Nevertheless, when posology ofJo2 infections was increased to perform repeated lethal liver deficiency challenges, human hepatocyte transplantation could improve survival rate. Surprisingly, genomic analysis revealed that there were no markers of selective advantage, but, on the contrary, there was ago-regulation of proliferation early genes and circadian genes, and absence of cell cycle blocker genes. Human hepatocyte transplantation acted as if it modified Nude mouse liver response to Jo2, which could explain improvement of survival. Absence of selective advantage and differences of self-species chronology could explain, at least partly, the failure of human hepatocyte engraftment. In conclusion, a successful engrafment of transplanted hepatocytes requires an environment in favour of interactions between transplated hepatocytes and host liver

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Bouilland, Caroline. "Agression et réparation endothéliales en transplantation." Rouen, 2009. http://www.theses.fr/2009ROUENR06.

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Abstract:

La dysfonction chronique du greffon est responsable de 50% des décès de patients transplantés cardiaques. C'est une maladie résistante aux thérapeutiques actuelles. L'agression de l'endothélium de l'organe greffé apparaît être la lésion initiant le développement de la lésion vasculaire: l'artériosclérose du transplant. Dans ce travail, nous montrons qu'un recouvrement rapide des cellules endothéliales défectueuses peut limiter la cascade inflammatoire à l'origine de la néo-intima dans un modèle d'allogreffe aortique chez le rat. Cette réendothélialisation a été provoquée par le fucane, mobilisateur de progéniteurs médullaires et par la mise en circulation d'un produit cellulaire médullaire mononuclé. Certains facteurs agressant l'endothélium du greffon participent aussi à la dysfonction endothéliale du patient transplanté. C'est le cas des immunosuppresseurs. La dysfonction endothéliale qu'ils induisent va aboutir au développement d'une athérosclérose généralisée, puis à une surmortalité cardiovasculaire. Dans une deuxième partie, nous montrons pour la première fois, que le MMF, administré seul, n'altère ni la relaxation vasculaire endothélium dépendante, ni la sensibilité aux vasoconstricteurs. Nous constatons également que le MMF prévient des effets délétères induits par la CsA quand il est utilisé en association avec les inhibiteurs de la calcineurine. L'inhibition complète des réponses relaxantes à l'Ach par un inhibiteur de la eNOS, démontre le rôle majeur joué par la disponibilité du NO dans ce mécanisme protecteur endothélial. Mots clés: artériosclérose du transplant, réparation endothéliale, cellules progénitrices, mycophénolate mofétil, NO
Chronic graft dysfunction-induced transplant arteriosclerosis is considered to constitute the main cause of mortality in cardiac transplantation. The TA protes is considered to be initiated by an immune and inflammatory attack of donor endothelial tell. In the present work, we show that early endothelial recovery may lirait intimai prolifération development in aortic allograft rat model. This reendothélialisation was induced by fucan, which mobilize bone marrow-derived progenitors tells and by autologous mononuclear bone marrow tell direct transfer. Systemic endothelial dysfunction, which mainly contributes to the pathophysiology of cardiovascular diseases, is currently observed alter organ transplantation. Immunosuppressive therapies based on cyclosporine (CsA), a CNI agent, are probably a major factor causing vascular damage. The second part of this work demonstrates that MMF prevents the alteration in endothelial function and the enhanced sensitivity to vasoconstrictors related to CsA administration in a rat allograft aortic model through the restoration of NO availability

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Taflin, Cécile. "Rôle de la cellule endothéliale dans la réponse immune en transplantation d'organe." Paris 7, 2011. http://www.theses.fr/2011PA077088.

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Abstract:

Dans le contexte de la transplantation d'organe, les cellules endothéliales, de part leur localisation dans les vaisseaux capillaires du greffon sont en contact direct avec les anticorps et les cellules immunes du receveur. Elles expriment les molécules HLA de classe I et de classe II et sont donc la première cible antigénique des allo-anticorps du receveur, principaux médiateurs du rejet humoral du greffon. Elles sont également capables d'initier une réponse cellulaire allogénique en activant les lymphocytes T CD4+ et CD8+, induisant ainsi leur prolifération, leur sécrétion d'IFN-γ et d'IL-2,conduisant au rejet aigu cellulaire du greffon. L'objectif de ce travail a été de mieux comprendre les caractéristiques et les mécanismes de l'allo-activation des lymphocytes T CD4+ induite par la cellule endothéliale ainsi que les effets des anticorps anti-HLA de classe II sur l'allo-réactivité de la cellule endothéliale. Nous avons utilisé un modèle in vitro de cellules endothéliales microvasculaires humaines issues du derme et avons étudié leur capacité à induire l'activation de lymphocytes T CD4+ allogéniques. Nous avons montré que dans un contexte inflammatoire, les cellules endothéliales microvasculaires induisent l'expansion de lymphocytes T CD4+IL-17+ (ThlT) et T CD4+CD45RA⁻FoxP3fort (Tregs) fonctionnels. L'expansion des Tregs est secondaire à leur prolifération et dépend de leur interaction avec la molécule d'adhésion ICAM-1 exprimée par la cellule endothéliale. L'augmentation de la population Th17 dépend de la voie IL-6/STAT-3 et est associée à la prolifération des lymphocytes T CD4+ mémoires (CD45RO+FoxP3⁻ou bas). L'activation des cellules endothéliales avec un anticorps anti-HLA de classe II est associée à l'augmentation de leur capacité à induire la prolifération des lymphocytes T CD4+ mémoires et l'expansion des Thl7 ainsi que à l'inhibition de leur capacité à expandre les Tregs. Ces données suggèrent que l'endothélium du greffon participe localement à la régulation de la réponse allogénique lymphocytaire T CD4+ en générant soit une réponse régulatrice avec l'expansion de Tregs fonctionnels, soit une réponse effectrice Th17 favorisée par l'environnement cytokinique pro-inflammatoire et la présence d'allo-anticorps circulant anti-HLA de classe II
Endothelial cells play a key role in the context of organ transplantation due to their localization within capillaries of the transplanted organ permitting direct contact with both antibodies of the graft recipient and with immune cells of the receiver potentially directed against the donor transplant. Endothelial cells have been extensively documented as a target of the key actors of humoral graft rejection, HLA class I and class II anti-donor antibodies. In addition they induce activation of alloreactive CD4⁺ and CD8⁺ T lymphocytes. Such allo-activation can lead to T cell proliferation, IFN-γ and IL-2 secretion ultimately resulting in acute cellular mediated graft rejection. This study examined the mechanisms of allo-activation of CD4+ T cells by human endothelial cells and determined whether such activation was modified in the presence of HLA class II allo-antibodies. We have developed a model of allo-reaction between human dermal microvascular endothelial cells and CD4⁺ T lymphocytes. This model allowed us to demonstrate that HLA class II expressing microvascular endothelial cells induce expansion of both Th17 (T CD4⁺IL-17⁺) and Treg (T CD4⁺CD45RA⁻FoxP3bright) populations. Amplification of Treg was secondary to their proliferation and dependent on the expression of ICAM-1 on the endothelial cell whereas amplification of Th17 was IL-6/STAT-3 dependent and associated with memory CD4⁺ T cell proliferation. Pre-activation of endothelial cells with an anti-HLA class II antibody led to increased memory T CD4⁺ proliferation and Thl7 expansion while decreasing endothelial cell mediated expansion of the Treg population. These data lead to the proposal that endothelial cells within the graft actively participate in the local regulation of the CD4⁺ T cell allogeneic response either by inducing a fully functional Treg population or a pro-inflammatory Thl7 population depending upon the presence of pro-inflammatory cytokines (eg IL-6) and/or the presence of circulating HLA class II allo-antibodies

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Parouchev, Alexandre. "Immortalisation et transplantation de cellules hépatiques simiennes : modèles de thérapie cellulaire hépatique." Paris 7, 2010. http://www.theses.fr/2010PA077099.

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La transplantation orthotopique de foie est le seul traitement curatif de certains déficits métaboliques. Mais, le manque de donneurs et les complications liées à l’ immunosuppression incitent au développement d'alternatives thérapeutiques, dont la transplantation d'hépatocytes. Cependant, à ce jour les essais avec hépatocytes adultes sont peu fructueux. Nous avons exploré deux voies thérapeutiques. D'une part dans la recherche de sources alternatives de cellules, nous avons caractérisé une lignée de cellules hépatiques fœtales simiennes (IPFLS), immortalisées par l'antigène T de SV40, à long terme. In vitro ces cellules conservent leur capacité de prolifération et leur phénotype de progéniteurs hépatiques bipotents. Leur immortalisation est réversible après excision de Foncogène par Cre. In vivoy elles sont non tumorigènes et se différencient en hépatocytes, sans proliférer in situ. Toutefois, leur importante instabilité du caryotype souligne la nécessité d'évaluer d'autres gènes d'immortalisation. D'autre part, la thérapie génique ex vivo est une alternative à l’allotransplantation d'hépatocytes. Nous avons mis au point la transduction d'hépatocytes simiens adultes, fraîchement isolés et cryopréservés, en suspension par des lentivirus recombinants dérivés de VTH-1, exprimant GFP sous contrôle du promoteur hépatospécifique du gène de l’apolipoprotéine A-II humain. La fonctionnalité in vivo, des hépatocytes cryopréservés est attestée par la présence d'hépatocytes transduits trois mois après transplantation dans le foie de souris immunodéficientes. Le modèle du primate non humain est un bon modèle préclinique pour des approches de thérapie génique ex vivo à visée hépatique
Orthotopic liver transplantation is the only available cure for certain metabolic deficiencies. But, lack of donors and complications related to immunosuppression urge the development of alternatives therapies such as hepatocyte transplantation. However, trials with adult hepatocytes have been so far disappointing. We have explored two directions. As a model for an alternative source of hépatocytes, we have characterized a line of simian fetal hepatic cells (IPFLS), immortalized by SV40-T antigen. In vitro these cells conserve their proliferative capacity and their hepatic bipotent progenitor phenotype. The immortalization is reversible after Cre-mediated excision of the oncogene. In vivo, they are non tumorigenic and differentiate into hepatocytes, with no in situ proliferation. However, the important karyotype instability underlines the need for new immortali2ation strategies. Moreover, ex vivo gene therapy is considered as an alternative to hepatocyte allotransplantation. We have set up conditions for efficient transduction of freshly-isolated and cryopreserved, adult, simian hepatocytes in suspension by HIV-1-derived recombinant lentiviruses, expressing GFP under transcriptional control of the hepatospecific promoter of the human apolipoprotein A-II gene. The in vivo persistence and fonction of cryopreserved cells is demonstrated by the presence of transduced hepatocytes three months after transplantation into the liver of immunodeficient mice. Thus the nonhuman primate appears as a good preclinical model for the development of liver-directed ex vivo gene therapy strategies

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Kleinclauss, François. "Induction de tolérance en transplantation : utilisation des propriétés immunomodulatrices des cellules apoptotiques." Besançon, 2006. http://www.theses.fr/2006BESAA002.

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Abstract:

L'objectif de cette thèse a été d'analyser, dans des modèles d'allogreffes de cellules hématopoïétiques, les mécanismes impliqués dans la modulation de l'alloréactivité induite par l'administration intraveineuse de cellules apoptotiques. Nous avons montré que les macrophages du receveur et la production de TGF-β étaient impliqués dans l'effet favorable de ces cellules sur la prise du greffon hématopoïétique. L'étude phénotypique a montré une expansion de lymphocytes T CD4+CD25+FoxP3+ du donneur, exerçant leur activité régulatrice par contact cellulaire direct et prévenant la maladie du greffon contre l'hôte. Nous avons étudié l'interaction des immunosuppresseurs avec l'administration de cellules apoptotiques et avons montré que les inhibiteurs de la calcineurine bloquent l'effet sur la prise de greffe et inhibent l'expansion de lymphocytes T régulateurs. La rapamycine, le mycophénolate mofétil et un dérivé de la désoxysperguanine, n'altèrent pas l'action des cellules apoptotiques
Apoptotic cells infusion is a new cell based therapy approach to modulate allogeneic immune responses. We reported its interest in hematopoietic cell transplantation in mice. The aim of this work was to analyze the mechanisms by which apoptotic cells modulate alloreactivity and facilitate bone marrow engraftment. We demonstrated that donor splenic macrophages and TGF-β production were involved in the effect of apoptotic cel! infusion. Phenotypic analysis showed an expansion of CD4+CD25+FoxP3+ regulatory T cells, exerting their suppressive effects by cell-contact dependant mechanisms. These regulatory T cells allowed delaying acute graft-versus-host disease. We studied the impact of immunosuppressive drugs on the apoptotic cell infusion. We showed that calcineurin inhibitors abolished the favourable effects of apoptotic cell infusion, whereas rapamycin, mycophenolate mofetil and a deoxysperguanin derivative, did not interfere and rather potentate the effects of apoptotic cell infusion

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Bittencourt, Marcelo de Carvalho. "Approches cellulaires pour l'induction de tolérance en transplantation de cellules souches hématopoi͏̈étiques." Besançon, 2002. http://www.theses.fr/2002BESA3004.

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Abstract:

L'objectif de cette étude est le développement des stratégies de modulation de Valloréactivité en transplantation de cellules souches hématopoïétiques (CSH)„ La signalisation via Fas des cellules alloréactives activées pendant une culture mixte lymphocytaire (MLR) permettrait l'élimination par apoptose des lymphocytes alloréactifs. La modification génétique des cellules pour l'expression de FasL s'est avéré techniquement peu fructueuse. Cependant, la génération d'une lignée d'empaquetage produisant un vecteur retroviral pour FasL a résulté dans une augmentation de l'expression de Fas et d'autres marqueurs d'activation cellulaire et aussi une augmentation de la sensibilité à l'apoptose des cellules d'empaquetage après transfection. La transfection d'un gène traceur ou d'un vecteur vide est capable également d'induire le même phénomène. Ces altérations phénotypiques et fonctionnelles étaient dépendantes de la technkwe de transfert génique. 2. Effet de l'administration de leucoc es a o toti ues sur la rise de reffe: Des cellules apoptotiques administrées conjointement aux CSH ont été capables de favoriser une prise d'un greffon médullaire allogénÀue dans un modèle animal. Cet effet n'est pas spécifique: des splénocytes apoptotques issus du donneur, du receveur, d'une tierce partie et de PBMC humains apoptotiques conjointement avec la moelle osseuse augmentent la proportion de prise de greffe dans ce modèle. D'autres méthodes d'induction d'apoptose permettent également une prise de greffe après injection intraveineuse des cellules mourantes conjointement au greffon médullaire. Aucun signe clinique et histologique de GVH n'a été observé après l'administration de splénocytes apoptotiques. Une manipulation de l'apoptose est donc envisageable pour l'induction de tolérance en thérapie cellulaire et greffe d'organes
Pas de résumé en anglais

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Herrero, Astrid. "Transplantation de cellules hépatiques dans le traitement des insuffisances hépatocellulaires après hépatectomie." Thesis, Montpellier 1, 2013. http://www.theses.fr/2013MON1T037/document.

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Abstract:

Les données cliniques supportent le concept et offrent l’espoir que la thérapie cellulaire trouvera sa place parmi les stratégies thérapeutiques des pathologies hépatiques. Cependant deux obstacles majeurs limitent l'étendue de son application clinique: la faible disponibilité d’hépatocytes humains de qualité et en quantité importante, et une faible efficacité de greffe conduisant à une survie et une fonctionnalité seulement à court terme. L’objectif de ce travail était de développer des modèles animaux d’insuffisance hépatique après hépatectomie et d’analyser la réponse régénérative après transplantation de progéniteurs hépatiques humains isolés et caractérisés dans 2 laboratoires de recherche (INSERM U1040 Montpellier et laboratoire PEDI UCL Bruxelles), en comparaison à des hépatocytes fraichement isolés.Le premier modèle consistait à réaliser une hépatectomie de 30% chez des souris NOD SCID, associée à l’injection préalable de rétrorsine (blocage de la prolifération cellulaire endogène) et d’injecter dans le même temps directement dans le parenchyme 1 million de cellules progénitrices exprimant constitutivement le gène rapporteur Luciférase. Les résultats ont montré la bonne implantation des cellules jusqu’à 1 mois après l’injection avec une différenciation fonctionnelle des cellules mise en évidence par la sécrétion d’albumine humaine dans le sang circulant des animaux.Le deuxième modèle consistait à réaliser une hépatectomie large de 70% chez des souris immunodéprimées RAG 2-/- γ-/- pour augmenter la souffrance hépatocellulaire et à comparer deux timing d’injection (voie intrasplénique) des cellules progénitrices génétiquement marquées avec la Green Fluorescent Protein. Les résultats ont montré une meilleure tolérance clinique (moins de mortalité) et une plus grande quantité de cellules implantées lorsque l’injection était réalisée 48h après l’hépatectomie. La régénération hépatique endogène était plus importante et plus rapide chez les souris injectées avec les progéniteurs qu’avec les hépatocytes primaires, suggérant un effet paracrine bénéfique de ces cellules.Ces travaux ont mis en évidence la possibilité d’utiliser ces cellules progénitrices comme alternative aux hépatocytes avec des propriétés régénératrices certaines mais soulèvent les problèmes d’implantation de ces cellules qui reste faible dans des foies hépatectomisés remaniés. Définir le meilleur environnement pour favoriser la survie, la fonctionnalité et éventuellement l’intégration effective des cellules transplantées reste une question clé pour avancer dans cette voie.En parallèle de ces travaux de recherche, un projet de recherche clinique de biothérapie a été développé et accepté pour transplanter des hépatocytes frais humains en intrahépatique chez des patients ayant une insuffisance hépatocellulaire terminale (hépatite alcoolique aigue, cirrhose grave, après résection hépatique large). Il devrait débuter fin 2013
Clinical data support the concept and offer the hope that cell therapy will find its place among the therapeutic strategies in liver diseases. However, two major obstacles limit the scope of its clinical application: the limited availability of human hepatocytes quality and in large quantities, and low efficiency leading to graft survival and only a short-term functionality. The objective of this work was to develop animal models of liver failure after hepatectomy and analyze the regenerative response after transplantation of human hepatic progenitors isolated and characterized in two research laboratories (INSERM U1040 Montpellier laboratory PEDI UCL Brussels) compared to freshly isolated hepatocytes.The first model was to achieve a 30% hepatectomy in mice NOD SCID associated with prior injection retrorsine (blocking of endogenous cellular proliferation) and injected at the same time directly into the parenchyma 1 million progenitor cells constitutively expressing the luciferase reporter gene. The results showed good cell implantation until 1 month after injection with a functional differentiation as evidenced by secretion of human albumin in the circulating blood cells of animals.The second model was to achieve a wide 70% hepatectomy in mice immunocompromised RAG 2 - / - γ-/ - to increase the suffering hepatocellular comparing two injection timing (channel intrasplenically) progenitor cells genetically marked with the Green Fluorescent Protein. The results showed better clinical tolerance (less mortality) and a greater amount of implanted when the injection was performed 48 hours after hepatectomy cells. Endogenous hepatic regeneration was greater and faster in mice injected with the progenitors with primary hepatocytes, suggesting a beneficial paracrine effect of these cells.These studies have highlighted the possibility of using these progenitor cells as an alternative to hepatocytes with regenerative properties but raise some problems implementing these cells remains low in hepatectomized livers reworked. Define the Define the best environment to promote the survival, function and possibly the effective integration of transplanted cells remains a key issue for progress in this direction.In parallel with this research, a clinical research project biotherapy was developed and agreed to transplant human hepatocytes in intrahepatic costs in patients with terminal liver failure (acute alcoholic hepatitis, severe cirrhosis, after extensive liver resection). It should begin in late 2013

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Hamou, Wissam. "Assessing liver regeneration by human embryonic stem cell-derived hepatocytes." Thesis, Paris 6, 2014. http://www.theses.fr/2014PA066374.

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Abstract:

Trouver de nouvelles sources de foie pour les transplantations est un vrai enjeu. Les obstacles principaux à la transplantation d'organes sont la pénurie de greffons et les lourds traitements immunosuppresseurs à vie. La possibilité de reprogrammer les cellules du patient et les cultiver donne accès à une quantité virtuellement illimitée de cellules a transplanter, éliminant de ce fait le besoin de donneurs d'organesMon doctorat se divise en deux parties : la première consiste à faire des cellules hépatiques en programmant des cellules souches humaines. La deuxième consiste à transplanter ces dernières dans des foies de souris ayant des insuffisances hépatiques aigues et chroniques pour étudier la régénération du foie. Les nouveautés de ce projet sont le fait d'étudier la première phase d'intégration post transplantation des cellules car cette phase est critique dans la régénération. De plus je comparerai la régénération du foie par les cellules transplantées dans une insuffisance hépatique aigue avec une insuffisance hépatique chronique. Une semaine après transplantation, le foie de ces souris contenait les cellules greffées qui se sont implantées et celles-ci se comportaient comme des cellules de foie bona fide, produisant une protéine, l'albumine humaine. Encore mieux : l'analyse des fonctions du foie a relevé un retour à une fonction normale en 3 jours avec transplantation contre 7 jours sans cellules transplantées. Ces résultats sont très encourageants quant à la possibilité d'utiliser des cellules dérivées de cellules souches à des fins thérapeutiques
Finding new sources for liver transplants is a real issue. The main obstacles to organ transplantation are the shortage of grafts and heavy immunosuppressive treatment for life. The ability to reprogram the patient's cells and grow them gives access to a virtually unlimited amount of transplanted cells, thereby eliminating the need for an organ donor. My doctorate is in two parts: the first is to make liver cells by programming of human stem cells. The second is to transplant those cells in the livers of mice with acute and chronic liver failure to study liver regeneration. The novel parts of this project are to study the first phase of post-integration cell transplantation because this phase is critical in regeneration. Also I would compare liver regeneration by transplanted cells in acute liver failure with chronic liver failure. One week after transplantation, the liver of these mice contained the grafted cells and which are located if they behaved as bona fide liver cells producing a protein, human albumin. Even better: analysis of liver function noted a return to normal function in three days with seven days without transplantation against transplanted cells. These results are very encouraging when the possibility of using cells derived from stem cells for therapeutic purposes

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Lauden, Laura. "L' immunité des cellules souches adultes : le modèle des cellules souches/progéniteurs cardiaques humaines." Paris 7, 2014. http://www.theses.fr/2014PA077023.

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Abstract:

Les stratégies utilisant la transplantation allogénique de cellules souches/progéniteurs cardiaques (hCPC) de pour les cardiomyopathies sont parmi les plus explorées en médecine régénérative. Cependant, leurs interactions avec le système immunitaire restent à définir pour déterminer les risques et/ou les bénéfices d'une telle thérapie. Ainsi, l'objectif de ma thèse consiste à caractériser les interactions bidirectionnelles entre les hCPC et les deux bras, inné et adaptatif, du système immunitaire. Après une caractérisation précise de leur phénotype et de leurs capacités régénératrices, nous avons investigué dans un contexte allogénique le crosstalk entre les hCPC et les lymphocytes T adaptatifs d'une part et les cellules NK innées d'autre part. Nos travaux ont montré que les hCPC en contexte inflammatoire ou non, n'induisent pas de réponse T allogénique conventionnelle mais induisent l'expansion et l'activation de lymphocytes T régulateurs ainsi que la modulation de la réponse immune, orchestrés par l'expression de la molécule de costimulation PD-L1. Les hCPC possèdent aussi une faible susceptibilité à la lyse médiée par les cellules NK et sont protégées en conditions inflammatoires. Les hCPC peuvent également réduire l'activité des cellules NK envers une cible conventionnelle et modifient leur profil cytokinique vers un profil anti-inflammatoire. Collectivement, les hCPC en contexte allogénique sont hypo-immunogènes et leur crosstalk avec les deux bras de la réponse immune est probablement en faveur de la réparation cardiaque ouvrant ainsi la voie pour leur translation en clinique
Currently, stem cell therapy is a compelling choice for treating and repairing organ functioning. Over the excitement of benefit, a major hurdle was often overlooked, the immunogenicity. Strategies using stem cells transplantation for ischemic cardiomyopathy are among the most explored in regenerative medicine. The "perfect" stem cell remains elusive, but at present the use of allogeneic cardiac stem/progenitor cells (hCPC), is among the most expectative goals. My thesis objective is to characterize the bi-directional interactions between hCPC and both innate and adaptive arms of the immune system to determine the potential risk and/or benefits of such therapy. After a precise characterization of their phenotype and reparative capacity, we investigated the hCPC crosstalk with adaptive T cells and innate NK cells in allogeneic settings. We showed that hCPC, whether under inflammatory conditions or not, do not induce conventional allogeneic T cell response but expand and activate regulatory T cells that endows with PD-L1/PD-1 dependent immuno¬modulatory capacity. The hCPC also elicit modest NK cells cytotoxicity that is significantly blocked within inflammatory environment. In addition, hCPC dowmodulate NK cells activity towards conventional target cells, inhibit their proliferation and biase their cytokine secretion towards anti-inflammatory cytokines. Collectively, our data reveal that the hCPC in allogeneic context are hypo-immunogenic and their crosstalk with both arms of the immune system is probably in favor of cardiac repair. Advancing the basic knowledge of stem cells immunology, our studies may also pave the way for clinical translation of these hCPC

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Cartron, Guillaume. "Etude quantitative et fonctionnelle du compartiment des progéniteurs primitifs après autogreffe de cellules souches hématopoïétiques chez l'homme." Tours, 2003. http://www.theses.fr/2003TOUR3311.

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Abstract:

L'intensification thérapeutique avec support de cellules souches hématopoïétiques (AGCS) constitue une thérapeutique de choix en hématologie. Nous avons explorer le compartiment des progéniteurs primitifs (PP) après AGCS sanguine et montré qu'il existait comme après AGCS médullaires, une altération profonde et durable de la reconstitution à long terme in vivo. In vitro, il existait une réduction constante et durable de la fréquence des LTC-IC et de la population CD34+/CD38_ associée à des anomalies fonctionnelles (réduction des potentiels prolifératifs et de différentiation érythroïde des LTC-IC). De même, il existait un déficit prolifératif des cellules CD34+ en réponse à une association de cytokines d'action précoce et une réduction du niveau d'expression de CD34 et de la capacité de c-Kit à fixer le SCF dans la population CD34+. Après AGCS il existe une altération profonde, constante et durable du compartiment des PP. Il s'agit d'anomalies quantitatives et qualitatives qui pourraient rendre compte d'une altération de la capacité d'auto-renouvellement du compartiment des PP après AGCS et compromettre la reconstitution médullaire à long terme
Intensive therapy with autologous stem cells transplantation (ASCT) is now widely used in hematology. We have assessed primitive progenitor cell compartment after ASCT using peripheral stem cells and shown a deep and durable decrease of clonogenic progenitor counts in vivo. In vitro studies have demonstrated a constant decrease of LTC-IC frequencies and CD34+/CD38_ counts associated with functional abnormalities (defect in proliferative and érythroïd differentiation of LTC-IC). We have shown also a proliferative defect of CD34+ cells in response to early-acting cytokines and a decrease of both CD34 antigen expression and ability of c-Kit to bind to SCF into CD34+ cell population. After ASCT, there are both quantitative and qualtitative defects of primitive progenitor cell compartment which could led to a impaired self-renewal of this compartment and jeopardize long-lasting marrow reconstitution

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Sikorski, Mathieu. "De l’implication des cellules dendritiques myéloïdes humaines dans la physiopathologie de l’infection à polyomavirus BK." Thesis, Nantes, 2017. http://www.theses.fr/2017NANT1041/document.

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Abstract:

Le polyomavirus BK (BKPyV) est un virus ubiquitaire humain infectant environ 80% de la population mondiale. La primo-infection conduit à une persistance du virus à bas bruit dans les epithelia rénaux-urinaire. Le virus peut rester ainsi tout au long de la vie de l’individu infecté sans causer de complications. C’est un virus de l’immunodéprimé : il est la première cause d’origine infectieuse de perte de greffon chez les patients transplantés rénaux, qui reçoivent un traitement immunosuppresseur pour diminuer les risques de rejet. Chez ces patients, il se réactive et se réplique activement, causant une maladie appelée néphropathie associée au polyomavirus (PVAN). Pendant des étapes précoces de cette pathologie, le virus est retrouvé dans le sang des patients, on parle de virémie. Son maintien est corrélé à un mauvais pronostic pour les patients. Le génome du BKPyV a été détecté dans les cellules immunitaires sanguines, sans pour autant identifier une population cellulaire particulière comme porteuse du génome. Les cellules dendritiques myéloïdes (mDC), des acteurs primordiaux de l’induction et la polarisation des réponses immunes, ont été mises en évidence dans le rein, à proximité des sites de réactivation du BKPyV. Aussi, il a été montré que ces cellules infiltraient spécifiquement le rein lors d’une PVAN, sans pour autant qu’un rôle leur soit attribué. Enfin, elles ont été montrées comme étant détournées de leur fonction initiale par plusieurs virus pour aider leur infection. Basé sur ces arguments, nous avons posé la question d’une implication des mDC dans la sortie du virus du rein, conduisant in fine à l’établissement de la virémie. En testant cette hypothèse, nous avons mis en évidence la capacité des mDC humaines à fixer, internaliser et transmettre le BKPyV à des cellules permissives. Étonnamment, cette interaction ne conduit pas à la maturation des mDC immatures, posant la question d’un éventuel mécanisme d’échappement immunitaire lié au virus. Une étude plus approfondie chez des patients transplantés rénaux permettra de clarifier d’autant plus le rôle que peuvent avoir ces cellules dans cette infection
The BK polyomavirus (BKPyV) is a ubiquitous human virus infecting 80% of the worldwide population. The primoinfection leads to a low-level and long-lasting persistence of the virus in the reno-urinary epithelia. The BKPyV reactivates in immunocompromised individuals like HIVdiseased patients or allograft recipients. It is the first infectious cause of graft loss in kidney transplanted (KTx) patients who receive immunosuppressive drugs to impair organ rejection. In KTx patients, the virus reactivates and replicates actively, leading to a disease called polyomavirus associated nephropathy (PVAN). During early steps of this pathology, the virus is found in the blood of patients, i.e. viremia. Long-lasting viremia is correlated with a poor outcome for patients. The BKPyV genome has been detected in blood immune cells, yet not identifying a particular cell population associated with the viral genome. Myeloid dendritic cells (mDC), key players in the induction and polarization of immune responses, have been described in kidney, next to BKPyV reactivation sites. Also, it has been shown that these cells infiltrate specifically the kidney during PVAN. Finally, they have been shown to be hijacked from their original function by several viruses to help their infection. Based on these observations, we wondered if mDC could be involved in the viruria, i.e. virus in the urines, to viremia transition. By investigating this hypothesis, we have shown that human mDC can bind, internalize and transmit BKPyV to permissive cells. Surprisingly, this interaction does not lead to maturation of immature mDC, asking the question of a putative immune evasion mechanism of the virus. An extensive study in kidney transplant recipients will allow clarification of the role that mDC could have in this infection

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Heemskerk, Bianca. "Adenovirus infection and immunity in children after stem cell transplantation /." Leiden, 2005. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb40223278f.

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Naji, Abderrahim. "Fonctions immunologiques de la molécule HLA-G : implications en Transplantation et Cancérologie." Paris 7, 2009. http://www.theses.fr/2009PA077040.

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Abstract:

La molécule HLA-G, initialement décrite au niveau du trophoblaste où elle participe à la tolérance fœto-maternelle, est également impliquée dans d'autres situations de «tolérance» telles que le développement de tumeurs et la greffe d'organes. Sur la base des propriétés immunosuppressives de HLA-G en tant que ligand de récepteurs inhibiteurs présents sur les cellules immunitaires, le travail de thèse a essentiellement porté sur l'implication de HLA-G dans l'acceptation d'allogreffes mais également dans l'échappement des tumeurs à la réponse antitumorale. En transplantation, Le travail a porté sur (i) la compréhension des mécanismes de tolérance induits par HLA-G à travers l'induction de cellules T régulatrices in vitro au cours de réactions allogéniques et in vivo chez des patients transplantés hépatiques et rénaux (Naji et al. , Blood, 2007 et Naji et al. , Hum. ImmunoL, 2007), (ii) l'influence du traitement immunosuppresseur sur l'expression de HLA-G. Nous avons observé une induction d'expression de HLA-G par les cellules dendritiques après traitement par le Belatacept® (CTLA4-lg) (Naji et al. , J. ImmunoL, in press). Et, (m) la participation de HLA-G dans les fonctions immunosuppressives décrites pour les cellules souches mésenchymateuses et leur potentiel thérapeutique en greffe et en réparation osseuse (Naji et al. , Stem Cells, 2008). En cancérologie, l'expression de HLA-G est induite dans de nombreuses tumeurs où elle constituerait un mécanisme d'échappement tumoral à l'immunosurveillance. Dans ce contexte, nous avons participé à une étude portant sur des patients atteints de myélome et de leucémie B lymphoïde chronique chez lesquels l'expression de HLA-G et son rôle dans l'inhibition de la fonction natural killer ont été étudiés. (Maki et al. , Leukemia, 2008). Finalement, à travers la caractérisation du rôle de HLA-G sur les fonctions des lymphocytes B, nous avons démontré un effet inattendu de la forme HLA-G soluble en tant qu'agent anti-prolifératif de cellules myélomateuses et lymphomateuses B (Naji et al. , soumis pour publication)
HLA-G which has been originally described in the trophoblast where it contributes to the fetal-maternal tolerance, is also involved in other situations of "tolerance" such as tumor proliferation and organ transplantation. Based on the immunosuppressive properties of HLA-G molecules as ligand of inhibitory receptors present on immune cells, the present work focused on the involvement of HLA-G in allograft acceptance and tumor/escape from anti-tumor immune response. In transplantation, the work focused on (i) understanding the mechanisms of tolerance induced by HLA-G through the induction of regulatory T cells in vitro during allogeneic reactions and in vivo in patients with liver and kidney transplant (Naji et al. , Blood, 2007 and Naji et al. Hum. ImmunoL, 2007), (ii) the influence of immunosuppressive treatment on the expression of HLA-G. We observed an induction of expression of HLA-G by dendritic cells after treatment with Belatacept ® (CTLA4-lg) (Naji et al. , J. ImmunoL, In press). And (iii) the participation of HLA-G in the immune functions described for mesenchymal stem cells and their therapeutic potential in transplantation and bone repair (Naji et al. , Stem Cells, 2008). In cancer, the expression of HLA-G is induced in many solid tumors where it would be an escape mechanism in tumor immunosurveillance. In this context, we participated in a study of patients with myeloma and chronic lymphocytic leukemia B in which the expression of HLA-G and its role in the inhibition of natural killer function was studied. (Maki et al. , Leukemia, 2008). Finally, through the characterization of the role of HLA-G on B cell functions, we demonstrated an unexpected effect of soluble HLA-G as an anti-proliferative agent towards myeloma and B lymptioma cells (Naji et al. , submitted for publication)

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Carretero-Iglesia, Laura. "Autologous regulatory myeloid cell therapy in transplantation." Nantes, 2014. http://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show.action?id=57eee07a-2290-4c76-b10e-0603a68039b7.

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Abstract:

The aim in organ transplantation is to induce specific long-term allograft tolerance. Current therapies control short-term allograft rejection but are inefficient against late graft failure. Moreover, they carry important side-effects, rendering patients vulnerable to other diseases. New therapies are nowadays being developed. The use of in vitro modified cell types as a strategy to induce donor-specific tolerance has proven to be effective to prolong allograft survival in a variety of animal models. Myeloid cells play a key role in transplantation. They are involved in both, tolerance and rejection. Therefore, the in vitro modification of myeloid cells for their use in cell therapy has gained interest those last years. The work developed during this thesis aimed at generating three regulatory myeloid cell types (tolerogenic dendritic cells, regulatory macrophages and myeloid-derived suppressive cells). In vitro, we studied their capacity to avoid T cell activation and the mechanisms underlying their suppressive activity. In vivo, we tested the potential of autologous regulatory myeloid cells to prolong allograft survival when injected in a mouse skin transplant model one day before transplantation and the in vivo mechanisms induced after their injection. We believe that the results obtained during this thesis will help to progress towards an efficient cell therapy and tolerance induction in the transplantation setting
L'objectif en transplantation d'organes est d'induire une tolérance spécifique du greffon à long terme. Les thérapies actuelles sont efficaces pour contrôler le rejet aigu du greffon mais sont inefficaces pour prévenir le rejet chronique. De plus, elles peuvent induire à des effets secondaires importants, rendant les patients sensibles à d'autres maladies. De nouvelles thérapies sont ainsi en cours de développement. L'utilisation de différents types cellulaires modifiés in vitro comme stratégie pour l'induction d'une tolérance spécifique d'antigène a été démontré efficace pour prolonger la survie de l'allogreffe dans plusieurs modèles animaux. Les cellules myéloïdes jouent un rôle important en transplantation. Elles sont impliquées dans la tolérance, ainsi que dans le rejet de la greffe. La modification in vitro des cellules myéloïdes pour leur utilisation en transplantation a suscité un intérêt ces dernières années. Le travail développé pendant cette thèse a eu pour objectif la génération de trois types de cellules régulatrices myéloïdes (cellules dendritiques tolérogènes, macrophages régulateurs et cellules myéloïdes suppressives). In vitro, nous avons étudié leur capacité suppressive sur l'activation des lymphocytes T et les mécanismes impliqués dans cette suppression. In vivo, nous avons testé leur potentiel à prolonger la survie de l'allogreffe après injection autologue dans un modèle de greffe chez la souris ainsi que les mécanismes qu'elles induisent. Nous supposons alors que les résultats obtenus pendant cette thèse pourront aider à développer une thérapie cellulaire efficace pour l'induction d'une tolérance en transplantation

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Lagaraine, Christine. "Effet tolérogène de l'acide mycophénolique sur les cellules dendritiques." Tours, 2005. http://www.theses.fr/2005TOUR3305.

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Abstract:

La transplantation reste problématique à cause de l'immunosuppression globale. La cellule dendritique joue un rôle central dans la réponse immunitaire en présentant l'antigene aux lymphocytes T. Elle peut induire soit l'activation des lymphocytes T soit leur inhibition conduisant ainsi à une tolérance. Nous avons montré que le traitement des cellules dendritiques par l'acide mycophénolique (MPA) inhibe leur maturation et les rend tolérogènes (DC-MPA). Les DC-MPA expriment peu de molécules de costimulation et CMH II, secrètent de l'IL-10 mais peu d'IL-12 et sont incapables d'activer des lymphocytes T alloréactifs qui deviennent anergiques. Nous avons montré que la coculture à long terme de DC-MPA et de cellules T permet d'induire des T régulateurs GITR+ et CTLA-4+ possédant une activité suppressive spécifique de l'antigène sur la prolifération de T activés. Ceci suggère une utilisation possible des DC-MPA ou des Tregs induits en thérapie cellulaire pour induire une tolérance du greffon
Even today, transplantation remains problematic because of global immunosuppressant treatment. Dendritic cells play a central role in immune response by uptaking and presenting antigens to T lymphocytes. However dendritic cells can induce T cell activation but also T cell inhibition, leading to tolerance. We have demonstrated that acid mycophenolic (MPA) affected dendritic cell maturation. MPA-treated DC (MPA-DC) have an impaired expression of costimulatory and class II MHC molecules, secrete large amounts of IL-10 but few IL-12. We have also shown that a long term coculture between MPA-DC and T cells induce the differentiation of regulatory T cells expressing GITR and CTLA-4. Treg have a potent antigen specific suppressive activity on the proliferation of activated T cells. These results suggest that MPA-DC or MPA-DC-induced Treg may be used in cellular therapy to induce allograft tolerance

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Delgado, Charris Jean-Paul. "Caractérisation phénotypique et moléculaire des cellules progénitrices foetales hépatiques simiennes et humaines." Paris 11, 2006. http://www.theses.fr/2006PA114825.

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Abstract:

Le foie est un organe de cible pour les thérapies cellulaires. Les perspectives de ces approches avec les hépatocytes humains adultes sont limitées : manque de données, absence de prolifération, et inefficacité de greffe. Nous avons caractérisé phénotypiquement à différents doublements de population (DP) une lignée d’hépatoblastes bipotents de singe immortalisés (IPFLS) dans le laboratoire à l’aide de l’oncogène T de SV40 flanqué de sites LoxP. Nous avons montré que l’immortalisation était réversible après excision du transgène par transduction rétrovirale du gène codant la Cre recombinase. Nous avons aussi montré qu’aux passages tardifs (120DP) l’activité télomérase était réduite, les télomères raccourcis et les remaniements chromosomiques importants. Après transplantation dans des souris immunodéficientes, les cellules IPFLS se sont différenciées en hépatocytes mais n’ont pas proliféré. Nous avons contribué à l’isolement et la caractérisation des hépatoblastes/hépatocytes fœtaux humains précoces (10-12 semaines). Après transplantation, ces cellules repeuplent plus efficacement le foie des souris transplantées que les IPFLS. In vitro elles ont un potentiel de migration et d’invasion, au contraire des hépatocytes adultes, qui est accru après stimulation par HGF. Ce processus est corrélé à une augmentation de la sécrétion et l’activation des métalloprotéases 2 et 9 et à une activation de la voie ERK. La transplantation d’hépatoblases stimulés par HGF dans des souris nouveau-nées améliore la dispersion de ces cellules dans le parenchyme hépatique. Ces résultats suggèrent que les hépatoblastes humains ont des propriétés spécifiques qui permettront d’améliorer la prise de greffe
The liver is a target organ for cell-based therapies. The use of human adult hepatocytes for such approaches is limited by the lack of donors, the absence of proliferation and low cell engraftment. We characterized a simian bipotent hepatoblast line (IPFLS) immortalized in our lab by using the Sv40 virus T oncogene flanked by LoxP sites, at different population doublings (PD). We showed that immortalization process was reversible after Cre recombinase mediated retroviral gene transfer. We also showed a telomerase activity reduction correlated with telomere shortening and chromosomal rearrangements at 120 PD. After transplantation in the liver of immunocompromised mice, IPFLS cells were differentiated into hepatocytes but did not proliferate. We contributed to the isolation and characterization of early fetal human heptoblasts/hepatocytes (10-12 weeks). After transplantation, these cells repopulated more efficiently the liver of transplanted mice than IPFLS cells. Human hepatoblasts, contrary tu adult hepatocytes, have an in vitro migration and invasion potential which is enhanced by the Hepatocyte Growth Factor (HGF). This process is correlated with an up regulation in the secretion and activation of matrix metalloproteinases 2 and 9 and the activation of the ERK pathway. Transplantation of hepatoblasts stimulated with HGF into new born mice improves cell spreading in the liver parenchyma. These results suggest that human hepatoblasts have specific properties which allow the improvement of cell engraftement

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Faugaret, Delphine Lebranchu Yvon. "Effet de l'acide mycophénolique sur les voies de signalisation activées par des agents pro-inflammatoires dans la cellule dendritique humaine." S. l. : S. n, 2008. http://theses.abes.fr/2008TOUR3303.

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Degauque, Nicolas Soulillou Jean-Paul. "Contribution à l'étude des cellules régulatrices dans deux modèles d'induction de tolérance." [S.l.] : [s.n.], 2004. http://theses.univ-nantes.fr/thesemed/DOCdegauque.pdf.

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Degauque, Nicolas. "Contribution à l'étude des cellules régulatrices dans deux modèles d'induction de tolérance." Nantes, 2004. http://www.theses.fr/2004NANT18VS.

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Abstract:

La tolérance correspond à l'acceptation d'une greffe chez un receveur non immunodéprimé. Dans cette thèse, les mécanismes de maintien et de transfert de la tolérance induite dans deux modèles de greffe entre rats incompatibles pour les molécules du CMH ont été étudiés. La présentation des antigènes du donneur avant greffe cardiaque par transfusion de sang entraîne la différentiation de cellules régulatrices T CD25- agissant in vitro et in vivo. Cette étude constitue la première démonstration de l'existence de cellules régulatrices T CD25- capables de transférer la tolérance entre individus incompatibles pour les molécules du CMH. L'injection le jour de la greffe de rein d'un anticorps anti-CMH de classe II du donneur permet d'obtenir une tolérance complète. Le maintien et le transfert de la tolérance ne sont pas ici contrôlés par les lymphocytes T seuls mais font intervenir des mécanismes complexes de régulation nécessitant une coopération entre les cellules T et les cellules non-T
Tolerance corresponds to the acceptation of a graft by an immunocompetent recipient. In this thesis, the mechanisms of maintenance and transfer of tolerance have been studied in two models of graft transplantation between MHC incompatible rats. Donor antigens presentation by blood transfusion before heart graft induces the differentiation of regulatory CD25- T cells acting both in vitro and in vivo. This study constitutes the first demonstration of the existence of regulatory CD25- T cells able to transfer tolerance in a fully MHC mismatch model. Injection of a donor anti-class II MHC antibody the day of transplantation allowed to obtain a fully tolerant state. Maintenance and transfer of tolerance are here not controlled by T lymphocytes alone but required complex mechanisms of regulation with the need of T cells/non-T cells cooperation

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Golfier, François. "Greffe in utero de cellules souches hématopoïétiques foetales humaines : purification de cellules CD34+/++ de foie foetal et de moëlle osseuse foetale." Lyon 1, 2001. http://www.theses.fr/2001LYO1T007.

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Hervé, Caroline Dantal Jacques. "Etude des désordres immunitaires dans le syndrome néphrotique idiopathique et sa récidive après transplantation rénale." [S.l.] : [s.n.], 2006. http://castore.univ-nantes.fr/castore/GetOAIRef?idDoc=27396.

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Navarro, Francis. "Analyse des populations lymphocytaires dans le foie avant et après transplantation hépatique orthotopique." Montpellier 1, 1998. http://www.theses.fr/1998MON1T002.

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Arvieux, Catherine. "Rôle de l'immunogénécité des hépatocytes et des cellules endothéliales hépatiques dans la tolérance des greffes de foie." Paris 11, 1999. http://www.theses.fr/1999PA11T046.

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Abstract:

Plusieurs hypothèses ont été avancées pour expliquer la relative tolérance dont bénéficie - le greffon hépatique. Dans le travail présenté, nous avons exploré l'immunogénicité des hépatocytes et des cellules endothéliales hépatiques et l'alloréactivité des lymphocytes T intrahépatiques lors du rejet aigu de la greffe de foie. L'étude de l'expression des molécules du CMH par les hépatocytes de rats a montré que la cholestase entraînait une forte expression de molécules de classe I du CMH sans expression de molécules de classe II. Le rôle suppresseur de ces hépatocytes a été étudié, sur un modèle de greffon cardiaque hétérotopique. Le rejet était significativement retardé après l'injection intraveineuse d'hépatocytes allogéniques provenant de rats en cholestase. Ces résultats confirment la faible immunogénicité des hépatocytes in vivo et suggèrent qu'ils pourraient avoir un effet tolérogène lorsque qu'ils expriment les molécules de classe I du CMH. Les travaux effectués sur des cellules endothéliales hépatiques humaines en culture ont montré qu'en cytométrie de flux les cellules au repos exprimaient les molécules de classe I du CMH, de LFA-3 et d'ICAM-1. En culture avec TNFa et IFNy, elles exprimaient VCAM-1 et les molécules de classe II du CMH sans expression détectable de molécules de co-stimulation. La culture mixte avec les lymphocytes T allogéniqucs CD4+ et CDS+ induisait une activation lymphocytaire modeste et une expression de VCAM-1 par les cellules endothéliales. Ce modèle suggère une spécificité des cellules endothéliales hépatiques qui, en culture avec des lymphocytes T allogéniques, sont activées sans toutefois induire de réponse allogénique complète. L'étude portant sur les populations de lymphocytes T allogéniques du receveur présentes dans le foie au moment du rejet a été réalisée chez le transplanté hépatique. En culture mixte, les lymphocytes B transformés et viables du donneur étaient capables d'induire une prolifération des lymphocytes T du receveur, contrairement aux mêmes cellules tuées qui n'induisaient pas de prolifération même en présence de cellules présentatrices potentielles. Dans ce modèle, les lymphocytes T allogéniques ne semblent pas suivre la règle de restriction au CMH du soi dans la reconnaissance de l'antigène. L'ensemble de ces résultats soulignent le rôle important des interactions des lymphocytes T intrahépatiques avec les cellules du greffon dans le rejet d'allogreffe de foie
Many hypothesis have been advanced to explain the relative tolerance of the hepatic graft. In the present work we have explored the immunogenicity of hepatocytes and hepatic endothelial cells et the alloreactivity of intrahepatic T lymphocytes. The study of the expression of the MHC molecules by rats hepatocytes showed that cholestasis was able to induce strong expression of MHC class I molecules with no detection of MHC classii on the cells. The tolerogenic role of these hepatocytes has been studied in a model of heterotopic cardiac allograft. Injection of hepatocytes from cholestatic animals significantly delayed rejection. These results confirm that hepatocytes are normally poorly immunogenic and suggest that they become tolorogenic when MHC classI expression is induced. Expression of highly purified human intrahepatic endothelial cells (HIHEC) surface molecules was determined by flow cyometry. HIHEC express ICAM-1, LFA-3 and MHC class I at rest and can be induced to express MHC class II antigens by high dose IFNand VCAM-1 by TNFa. However HIHEC failed to express CD28 ligands even after activation and where unable to support signifiant proliferation or cytokine secretion from either CD8+ and CD4+ allogenic T cells but coculture of allogenic T cells with HIHEC increased VCAM- 1 expression. This model suggests that interactions with allogenic T cells activated HIHEC, but HIHEC failed to support optimal activation of allogenic T cells. The study on samples of liver biopsies from liver transplant recipients with acute rejection showed that T lymphocytes were produced after expansion in the presence of IL-2. Even in the presenceof potential antigen presenting cells, Epstein-Barr virus transformed cells (B-EBV cells) lysate from the donor was unable to induce a strong alloreactive response from the recipient T cells, as the B-EBV cells were. In this model T lymphocytes allorecognition seems to violate the rule of self-MHC restriction. Those results show the irtiportant role of interactions of intrahepatic T lymphocytes with the graft cells during acute rejection of liver allograft

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Foubert, Philippe. "Rôle des progéniteurs vasculaires dans le processus de néovascularisation post-ischémique : applications thérapeutiques." Paris 7, 2007. http://www.theses.fr/2007PA077091.

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Abstract:

Le développement de stratégies de néovascularisation thérapeutique basées sur l'administration de cellules mononuclées dérivées de la moelle osseuse (BM-MNC) ou de progéniteurs endothéliaux (EPC) constitue une avancée thérapeutique d'intérêt dans le traitement des pathoiogies ischérniques. Cependant le développement de ces nouvelles approches thérapeutiques est actuellement limité, notamment en raison de la faible quantité de cellules disponibles (faible concentration endogène, difficulté d'expansion, risque de sénescence cellulaire) et de leur faible taux d'incorporation dans le territoire ischémique. Par conséquent, les protocoles de thérapie cellulaire doivent être optimisés afin d'améliorer l'efficacité pro-angiogénique des cellules injectées. Notre projet a donc consisté à mettre au point des technologies capables d'améliorer l'activité pro-angiogénique des EPC afin d'augmenter l'efficacité des thérapies cellulaires à visée pro- angiogénique dans les paîhologies ischémiques. Dans un premier temps, nous avons développé une procédure d'activation des EPC (dérivées du sang de cordon) pour augmenter leur potentiel angiogénique. A cette fin, nous avons ciblé le système EphB4 récepteur/éphrine-B2 ligand, système connu pour jouer un rôle déterminant au cours du développement vasculaire. Dans un modèle d'ischémie des membres inférieurs che2 la souris, nous avons démontré que l'injection d'EPC traitées par la protéine éphrine-B2-Fc (pour activer EphB4) permet d'augmenter la néovascuiarisation par rapport aux EPC non traitées via un processus d'adhésion impliquant les sélectines et leur îigand PSGL-1. Dans un deuxième temps, nous avons montré que la co-administration de progéniteurs de cellules endothéliales (EPC) et de cellules musculaires lisses (SMPC) améliore la revascularisation post-ischémique par rapport à l'injection unique d'EPC ou de SMPC. Par ailleurs, cette coopération cellulaire serait dépendante de l'angiopoiétine-1 (Ang-1), Ces résultats montrent qu'il est possible d'optimiser les stratégies de thérapie cellulaire pro-angiogéniques en activant les cellules avant leur injection ou en associant plusieurs populations cellulaires capables d'induire une régénération vasculaire
Cell therapy is a promising option for the treatment of ischemic diseases. Infusion or injection of stem or progenitor cells has improved neovascularization and heart function after ischemia in various experimental studies and clinical phase II and III trials. One potential limitation for cell therapy is a low rate of engraftment and persistence of cells in the ischemic tissue. Moreover, impairment of the number and function of patient- derived progenitor cells might limit the efficiency of autologous stem cell therapy. Therefore, strategies to augment cell function, survival, and homing could be crucial to improve success rates for cell therapy. Eph receptors and their ephrin ligands are key regulators of endothelia cell proliferation, migration and adhesion during vascular development. In a mouse model of hindlimb ischemia, vve demonstrated that activation of EphB4 receptor with an ephrinB2-Fc chimera protein increases the pro-angiogenic potential of Endothelial Progenitor Cells (EPC) through induction of PSGL-1 and adhesion to selectins. Secondly, we demonstrated that co-administration of endothelial (EPC) and smooth muscle progenitor cells (SMPC) enhances post-ischemic neovascularization through the release of Angiopoietin-1 by SMPC. Together, these data provide novel concepts for cell-enhancement strategies to aid the treatment of periphera artery occlusive and ischemic heart disease

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Benboubker, Lotfi. "Cellules souches hématopoi͏̈étiques du sang périphérique : caractérisation fonctionnelle et facteurs intervenant dans la capacité de mobilisation." Tours, 2002. http://www.theses.fr/2002TOUR3308.

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Abstract:

Le but de notre travail a été d'évaluer in vitro puis in vivo la qualité fonctionnelle des cellules souches hématopoi͏̈étiques primitives mobilisées par le G-CSF ou le GM-CSF et de rechercher parmi les facteurs pouvant intervenir dans la capacité de mobilisation des cellules souches sanguines (CSS), l'existence d'un éventuel facteur génétique. In vitro, nous avons montré que la proportion des cellules primitives circulantes après mobilisation par chimiothérapie et G-CSF ou GM-CFS sont comparables, atteignant les valeurs de la moelle osseuse. Cependant le G-CFS mobilise des LTC-IC ayant des capacités de prolifération augmentées par rapport au GM-CSF. Les greffons de CSS, pourtant qualitativement différentes in vitro, ne semblent pas posséder in vivo une capacité de reconstitution hématopoi͏̈étique à long terme modifié. Cette reconstitution est néanmoins caractérisée par des altérations profondes et durables de l'hématopoi͏̈èse, tout comme après autogreffe de moelle osseuse. Parmi les facteurs pouvant intervenir dans la capacité de mobilisation des CSH nous avons identifié pour la première fois chez l'homme, l'existence d'un facteur génétique, représenté par le polymorphisme du gène SDF1

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Boulday, Gwénola. "Étude de l'activation des cellules endothéliales en transplantation : expression différentielle des gènes en réponse à la fixation des anticorps naturels xénogéniques." Nantes, 2001. http://www.theses.fr/2001NANT20VS.

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Bonnamain, Virginie. "Interactions cellules souches/progénitrices neurales – lymphocytes T : étude in vitro et perspectives pour la transplantation." Nantes, 2009. http://www.theses.fr/2009NANT36VS.

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Abstract:

Malgré son statut immunologique particulier, le système nerveux central (SNC) entretient une communication bidirectionnelle étroite avec le système immunitaire. Ce paramètre doit donc être pris en compte pour optimiser les stratégies thérapeutiques restauratrices du SNC. En effet, en l'absence de traitement immunosuppresseur, les xénogreffes de cellules neurales porcines dans le SNC sont systématiquement rejetées, ce rejet étant principalement médié par les lymphocytes T (LT). Dans ce contexte, les cellules souches/progénitrices neurales (CSPN) décrites comme ayant une immunogénicité réduite et un pouvoir suppresseur de la réponse cellulaire T, pourraient être une alternative intéressante à la greffe de neuroblastes fœtaux. La survie prolongée du greffon et la faible infiltration lymphocytaire T après xénogreffe de CSPN dans le cerveau de rat en l’absence d'immunosuppression nous ont conduit à étudier les interactions in vitro entre les CSPN et les LT. Nous avons montré, par des expériences de co-culture, que les CSPN de porc et de rat inhibent la prolifération des LT de rat, par la libération de facteurs solubles. Les mécanismes à la base de l’effet immunorégulateur des CSPN porcines restent à déterminer, mais nos analyses ont clairement mis en évidence un rôle de l'hème oxygénase 1 (HO-1) dans l'activité suppressive des CSPN de rat. Nous avons également montré que l’interleukine-2 (IL-2), une cytokine proinflammatoire sécrétée par les LT activés, oriente le devenir des CSPN de rat vers un phénotype neuronal, in vitro. Ces résultats confirment l'importance de la communication entre le SNC et le système immunitaire et soulignent l'intérêt des CSPN en transplantation
Despite its status of immune privileged organ, the central nervous system (CNS) maintains a close bidirectional communication with the immune system. This parameter must be taken into account to optimize the therapeutic strategies aiming at restoring the neuronal loss in case of lesions or degenerative diseases in the CNS. Indeed, in the absence of immunosuppression, pig neural cells xenografted into the CNS are systematically rejected, this rejection being primarily mediated by T lymphocytes (TL). In this context, neural stem/progenitor cells (NSPC) described as having reduced immunogenicity and a potent suppressive effect on T cell responses appear as a suitable alternative cell source to fetal neuroblasts. The prolonged survival of xenografts and the low T cell infiltration following the transplantation of NSPC in the brain of non-immunosuppressed rats prompted us to study the in vitro interactions between NSPC and TL. We showed by co-culture experiments that pig and rat NSPC inhibit the proliferation of rat TL through the release of soluble factors. The mechanisms triggering the immunoregulatory effects of porcine NSPC remain to be determined, but we clearly demonstrated a role for the heme oxygenase 1 (HO-1) in the suppressive activity of rat NSPC. Interestingly, we also found that Interleukin-2 (IL-2), a proinflammatory cytokine secreted by activated TL, directs the in vitro fate of NSPC rat towards a neuronal phenotype. These results confirm the bidirectional communication between the CNS and the immune system, and highlight the interest of NSPC for cell transplantation

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Allain, Jean-Etienne. "Immortalisation et transplantation de cellules foetales hépatiques simiennes et humaines : modèles de thérapie cellulaire hépatique." Paris 7, 2002. http://www.theses.fr/2002PA077004.

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Dilek, Nahzli. "Inhibition sélective de la costimulation CD28-CD80/86 en transplantation : mécanismes d'action des cellules régulatrices." Nantes, 2011. https://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show/show?id=f4b951f2-c214-406e-8dca-8c4bbb5329b3.

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Abstract:

La transplantation est actuellement un des seuls recours pour palier à une dysfonction chronique d'un organe. Cependant, elle implique obligatoirement un traitement immunosuppresseur à vie ayant d'importants effets secondaires (cancer, infection, néphrotoxicité,…). L'établissement d'une tolérance spécifique au donneur demeure donc un objectif majeur en transplantation, car elle seule permettrait de renoncer à l'immunosuppression chronique. C'est dans cette démarche, que le travail de cette thèse a porté sur le blocage sélectif de la voie de costimulation CD28/CD80-86, et non CTLA-4/CD80-86, promouvant l'induction de mécanismes régulateurs voire tolérogènes en transplantation, en bloquant la voie activatrice tout en maintenant intacte la voie inhibitrice. Ainsi, l'objectif de notre travail a été d'étudier, dans un premier temps, les mécanismes mis en place dans un modèle de tolérance dû au blocage de CD28 en allotransplantation rénale chez le rat, associé à une accumulation de cellules myéloïdes suppressives dans le sang. L'analyse du transcriptome de ces cellules nous a permis de mettre en évidence une diminution de l'expression de la chemokine CCL5 dans ces cellules, mais également dans le sang des animaux tolérants. Par ailleurs, la formation d'un gradient de CCL5 en faveur des greffons chez les animaux tolérants induirait le recrutement de lymphocytes T régulateurs CCR5+ au niveau des greffons, favorisant ainsi l'établissement d'une tolérance. Dans un second temps, cette thèse a eu pour but d'explorer les effets de FR104, un antagoniste monovalent non activateur de CD28, sur la synapse immunologique chez l'homme. Ainsi, seul le blocage sélectif de CD28 permet d'empêcher la formation de synapse immunologique stable entre le lymphocyte T effecteur et la cellule présentatrice d'antigène (CPA), alors qu'au contraire il augmente le temps de contact entre le lymphocyte T régulateur et la CPA, ces mécanismes étant dépendants de CTLA-4. Ces recherches ont contribué à apporter des éléments nouveaux quant aux rôles et mécanismes d'une nouvelle stratégie thérapeutique immunorégulatrice
Transplantation is currently used for treatment of end-stage organ diseases. However, solid-organ transplantation requires a heavy treatment for the patients who are subjected to chronic immunosuppression which has several secondary effects, such as infections, cancers, nephrotoxicity. Therefore the establishment of a donor-specific tolerance remains a major goal in transplantation. Thus, this PhD work focused on the selective blockade of the CD28/CD80-86 costimulatory pathway, without impairing CTLA-4/CD80-86, thereby promoting the induction of tolerogenic or regulatory mechanisms in transplantation by blocking the activating interaction while preserving the inhibitory pathway. The first objective of our work was to study those mechanisms involved in a tolerance model in renal allotransplantation in rats, where an accumulation of myeloid suppressor in the blood was found. Transcriptome analysis of these cells allowed us to observe a decreased expression of CCL5 chemokine in these cells, but also in the blood of tolerant animals. The formation of a CCL5 graft-to-periphery gradient in tolerant animals induces the recruitment of CCR5+ regulatory T cells in the grafts, thus promoting tolerance establishment. In a second part, this work aimed at exploring the effects of FR104, a monovalent antagonistic CD28 antibody, on the immunological synapse in humans. Only the CD28 selective blockade prevented formation of stable immunological synapses between T effector cells and antigen-presenting cell (APC), whereas on the contrary it increased the contact time between regulatory T cells and APC, these mechanisms being CTLA-4 dependent. Thus, these researches illustrate new elements regarding the roles and mechanisms of a new specific immunoregulatory therapeutic strategy

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Blanchet, Benoit. "Evaluation de l'intérêt de la détermination de l'activité calcineurine au sein des cellules sanguines mononucléées chez des patients transplantés hépatiques traités par tacrolimus." Nancy 1, 2006. http://www.theses.fr/2006NAN12503.

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Braudeau, Cécile. "Etude du phénotype et de la fonction des cellules régulatrices T CD4+CD25+ dans le sang de patients tolérant spontanément une greffe de rein." Nantes, 2006. http://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show.action?id=d6456dcd-1157-4700-bb4b-a3d05104c0d7.

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Abstract:

Un des objectifs en transplantation est d’induire un état de tolérance opérationnelle. Cet état, rare en transplantation rénale, se définit comme l’acceptation à long terme d’un greffon à fonction stable sans immunosuppresseur chez un hôte immunocompétent. Ce travail vise à comprendre les mécanismes impliqués dans le processus de tolérance opérationnelle chez les transplantés rénaux. L’étude d’une petite cohorte de patients tolérants a permis d’identifier un phénotype particulier de leurs lymphocytes T sanguins CD4+CD25+, différent de celui des patients en rejet chronique. Nous avons montré que les patients tolérants présentent un nombre plus important de cellules CD4+CD25+FOXP3+ que les patients en rejet chronique et semblable à celui des individus sains. Ces cellules présentent également une fonction régulatrice semblable à celle d’individus normaux et significativement supérieure à celle de patient en rejet chronique
Despite being efficient in preventing acute rejection, immunosuppressors have little effect on chronic rejection. A major goal in transplantation is therefore to induce a state of operational tolerance. This state, which is rare in kidney transplant recipients, is defined as long-term graft acceptance with a stable function, without immunosuppression in an immunocompetent recipient. Here we tried to understand the mechanisms implicated in operational tolerance to kidney transplants. The study of a small cohort of tolerant patients allowed us to identify a particular phenotypic profile of CD4+CD25+ blood lymphocytes that was different to that of patients with chronic rejection. Tolerant patients displayed an increased number of CD4+CD25+FOXP3+ T cells compared to patients with chronic rejection. These cells also displayed a regulatory function similar to that of healthy individuals and significantly higher than that of patients with chronic rejection

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Brikci-Nigassa, Leila. "Induction de tolérance aux allogreffes de cœur et de peau chez la souris : implication de cellules souches transduites avec le gène de l’IL-10, de lymphocytes T régulateurs et de cellules dendritiques." Thesis, Lyon 1, 2012. http://www.theses.fr/2012LYO10318.

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Abstract:

L’objectif prioritaire de ce travail était de provoquer un état de tolérance immunologique à des allogreffes cardiaques et cutanées chez des souris injectées avec des cellules souches hématopoïétiques (CSH) transduites avec le gène de l’interleukine 10. Un deuxième but était d’améliorer la survie des greffons cutanés en utilisant des cellules dendritiques immatures tolérogène. Le foie fœtal de souris contient en moyenne 2% de cellules souches capables de se différencier dans toutes les lignées hématolymphoïdes. De plus, leur relativement faible expression des antigènes du CMH fait d’elles un matériel biologique parfois susceptible de s’adapter à un environnement allogénique. L’IL-10 est une cytokine anti-inflamatoires. Produite par les lymphocytes Th2 principalement, elle inhibe la production de cytokines pro-inflamatoires telle l’IL-2. Elle empêche aussi la fonction de présentation des antigènes des CPA. Les cellules dendritiques (DC) dérivent de CSH, elles jouent un rôle central dans l’immunité et sont capables d’interagir avec les cellules du système immunitaire inné et adaptatif. Elles sont essentielles à la mise en place d’une réponse régulatrice ou tolérogène, ceci en fonction des informations fournies par le microenvironnement cellulaire. Les résultats montrent d’une part que les CSH fœtales, de souris C57 BL/6 transduites avec le gène de l’IL-10 et injectées plusieurs fois à des souris allogéniques (BALB/c), induisent une prolongation de survie du greffon cardiaque de même souche. Cette survie est de 86.25+13.8 jours versus 11.5+0.6 jours pour les groupes contrôles. Les DC tolérogènes (tol-DC) de souris DBA1 traitées avec le TNFα sont injectées à des souris allogéniques (BALB/c). Il en résulte une prolongation de survie du greffon cutané de même souche que les tol-DC : 15 jours vs 7.5 jours pour les contrôles. Seuls les animaux transplantés avec des tol-DC présentent un état de tolérance autorisant la prolongation de la survie de greffonsallogéniques
The main objective of this work was to induce a state of immunological tolerance to cardiac and skin allografts in mice injected with hematopoietic stem cells (HSCs) transduced with the gene for interleukin 10 (IL-10). A second goal was to improve the survival of skin grafts using immature dendritic cells well known for their tolerogenic function. Mouse fetal liver contains 2% of stem cells on average that can differentiate into all blood-lymphoid lineages. In addition, their relatively low antigen expression of major histocompatibility complex (MHC) makes them a biological material sometimes capable to adapt to an allogeneic environment. IL-10 is a cytokine with anti-inflammatory properties. Mainly produced by Th2 lymphocytes cells, IL-10 inhibits the production of pro-inflammatory cytokines such as IL-2. It prevents antigen presenting function of APCs. Dendritic cells (DC) derived from HSCs and play a central role in immunity. They are able to interact with cells of the innate and adaptive immune system. They are essential to the establishment of a regulatory or tolerogenic response, this based on the information provided by the cellular microenvironment. Results firstly show that fetal HSC of C57 BL/6 mice transduced with IL-10 gene and injected several times to allogeneic mice (BALB/c) sublethally irradiated induce a prolongation of heart transplant survival of the same strain. This survival is of 86.25+13.8 days in comparison with 11.5+0.6 days for control groups. Tolerogenic dendritic cells (tol-DC) of DBA1 mice treated with TNFα are injected into allogeneic mice (BALB/c) sublethally irradiated. This results in a prolongation of skin graft survival of same strain as tol-DC: 15 days compared to 7.5 days for the control groups. Only tol-DC transplanted animals have a tolerance state allowing prolonged survival of allogeneic skin grafts

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Maouche, Ahmed. "Caractérisation de voies de régulation paracrine potentiellement impliquées dans le devenir des cellules souches spermatogoniales chez la truite arc-en-ciel (Oncorhynchus mykiss)." Thesis, Rennes, Agrocampus Ouest, 2018. http://www.theses.fr/2018NSARA083.

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Abstract:

Chez les mammifères, les cellules souches germinales primordiales nommées PGC sont soumises à différents microenvironnements successifs au sein de la gonade mâle qui permettent leur transition progressive d’abord en prospermatogonies avant la naissance puis en cellules souches spermatogoniales (SSC) chez l’adulte. Chez les poissons, l’existence potentielle d’états de transition intermédiaires entre les PGC et les SSC reste à être démontrée. De même, les mécanismes moléculaires impliqués dans la construction du pool initial de SSC ou dans son maintien à l’âge adulte restent mal compris. Le premier volet de la thèse a eu pour objectif d’étudier des voies de régulations susceptibles d’être impliquées dans le processus de formation, de renouvèlement ou de recrutement des SSC chez la truite arc-en-ciel (Oncorhynchus mykiss).Le profil d’expression spatiotemporelle des gènes codant pour les ligands Kit, Gdnf, endothéline (Edn) et leurs récepteurs respectifs suggère que ces gènes pourraient agir successivement sur les SSC au cours de l’ontogenèse de la truite. A la différence des mammifères, les facteurs kit et gdnf pourraient agir à la fois de manière paracrine et autocrine. L’hormone folliculo-stimulante et les stéroïdes sexuels pourraient réguler les voies gdnf et edn. Le deuxième volet de la thèse a eu pour objectif d’améliorer la praticabilité de la méthode de transplantation des SSC pour régénérer des ressources génétiques précieuses. Nous montrons que la transplantation de SSC non purifiées dans la cavité abdominale d’embryons de truites « golden » triploïdes permet, chez
In mammals, Primordial Germ Cells (PGCs) are subject to sucessive microenvironments that allow their progressive transition first, into prospermatogonia at pre-natal stage and then into spermatogonial stem cells (SSC) in adults. In fish, the potential existence of intermediate transition states between PGC and SSC remains to be demonstrated. Likewise, the molecular mechanisms involved in the construction of the initial SSC pool or in its maintenance in adulthood remain poorly understood. The firUnlike mammals, the extracellular Kit and Gdnf ligands are duplicated and they could act as paracrine or autocrine regulatory factors. The follicle stimulating hormone and sex steroid hormones could regulate the gdnf/gfra1 and edn/ednr regulatory pathways. The second part of the thesis was aimed to improve the practicability of the SSC transplantation technique to regenerate valuable genetic resources in European aquaculture research infrastructures. We show that the transplantation of unpurified SSC into the abdominal cavity of triploid "golden" trout embryos allows, in approximately 70% of the injected animals, a satisfactory production of functional gametes derived solely from transplanted SSC

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Illiaquer, Marina. "Interactions entre l'Herpesvirus humain de type 6 (HHV-6) et les cellules effectrices de l'immunité." Nantes, 2015. http://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show.action?id=cdfc8b90-47ec-466e-a7df-8cdf883cb3d2.

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Abstract:

Les infections virales représentent une complication majeure des allogreffes de cellules souches hématopoïétiques (CSH) et sont associées à des mortalité/morbidité élevées. Nous avons conduit une étude prospective visant à évaluer l'impact de l'utilisation d'un greffon de sang placentaire (SP) sur la survenue de réactivation à HHV-6 et de quatre autres virus opportunistes ainsi que sur les cinétiques de reconstitution immune (RI), pendant les 6 premiers post-greffe, en comparant des patients recevant soit une greffe de SP soit une greffe de CSH périphériques (CSP) d'un donneur non apparenté. L'étude a confirmé une association significative entre HHV-6 et greffe de SP et entre EBV et greffe de CSP. L'analyse de la RI montre des différences significatives entre les deux groupes, en particulier pour les lymphocytes B et les monocytes qui reconstituent plus rapidement et avec des taux plus élevés après greffe de SP. Une deuxième étude comparant les mêmes paramètres à distance de l'allogreffe a montré que les infections à HHV-6 durent longtemps après greffes de SP et que la RI diffère en fonction de la source de greffon. L'ensemble de ces données ne permet pas, pour le moment, d'expliquer le lien particulier entre HHV-6 et SP. Enfin, afin de caractériser l'impact d'une infection à HHV-6 sur des cellules jouant un rôle majeur dans la réponse antivirale, nous avons conduit des essais d'infection in vitro de cellules dendritiques plasmacytoïdes (pDCs). Ces données montrent l'absence de permissivité des pDCs à l'infection par HHV-6. L'HHV-6 induit la sécrétion d'interféron de type I par les pDCs sans influencer l'expression des molécules HLA de classe I et II ou de co-stimulation
Viral infections are well-known complications after allogeneic stem cell transplantation (allo-SCT) and are responsible for morbidity and mortality in patients. To better define the impact of UCB as stem cell source we conducted a prospective study comparing the frequencies of HHV6 and four other opportunistic viruses during the first six months post-graft as well as the kinetic of immune reconstitution in adults receiving either UCB allo-SCT or unrelated PBSC allo-SCT. We prospectively confirm a specific relationship between HHV6 and UCB allo-SCT and between EBV and PBSC allo-SCT. The data of the immune reconstitution showed significant differences between the both groups and particularly for the B lymphocytes and monocytes subsets which reconstituted faster and with higher count in the UCB group that however. A second study comparing the same parameters in long-term UCB survivors, shows long-lasting HHV-6 reactivation and highlight differences in the kinetic of immune reconstitution, according to the type of graft. However, our results don't explain the link between HHV-6 and UCB, which so far remains to be elucidated. Finally, to evaluate the impact of HHV-6 infection on cells professionally involved in antiviral defense of the organism, the plasmacytoid dendritic cells (pDCs), we performed in vitro experiments consisting on HHV-6 infection of human peripheral pDCs. The HHV-6 induce secretion of type I interferons by pDCs without influencing significantly the expression of the co-stimulation molecules or the class I and II HLA molecules

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Seminatore, Christine. "Transplantation de dérivés neuraux de cellules souches embryonnaires humaines dans un modèle de lésion cérébrale ischémique." Paris 6, 2009. http://www.theses.fr/2009PA066554.

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Abstract:

Cette étude avait pour objectif de définir les conditions dans lesquelles les cellules souches embryonnaires (CSE) pouvaient être utilisées comme produit thérapeutique pour les lésions neurovasculaires. Nous avons dans un premier temps caractérisé le profil de différenciation d’une lignée de CSE différenciées dans le lignage neural. Nous avons distingué 4 stades de différenciation, appelés progéniteurs neuraux (PGN)-précoces, -intermédiaires et-tardifs, et un dernier stade très différencié, appelé précurseurs neuronaux (PN). Les différents types de PGN et les PN ont été transplantés au niveau striatal chez des rats une semaine après occlusion unilatérale de l’artère cérébrale moyenne (OACMt). Afin d’analyser l’impact de l’environnement ischémique sur l’orientation phénotypique des cellules donnée avant la transplantation, ceux-ci ont été placés dans des lésions sévères ou modérées et chez des animaux sans lésions. Nos résultats montrent que la lésion ischémique a un faible impact sur l’évolution de la différenciation de cellules greffées. Seuls les PGN-précoces ont montré une sensibilité à la lésion qui se manifestait par une meilleure survie mais aussi par une plus grande incidence de tératomes. Dans les autres cas, le schéma de différenciation observé après greffe est celui attendu en fonction de la différenciation des cellules avant leur transplantation. Mis à part le stade PGN-précoce, qu’il est indispensable d’éviter pour la transplantation parce que générateur de tératomes, nous avons identifié un stade générateur de greffes hyperprolifératives, celui de PGN-tardifs. L’hyperprolifération peut cependant être contrôlée a posteriori par un agent anti-tumoral, le Témodal®. La deuxième partie de cette étude a porté sur l’utilisation de nouveaux types cellulaires, les « NSC », progéniteurs développés à partir des CSEh qui représentent des produits transplantables plus homogènes, et les IPS, cellules somatiques reprogrammées en CSEh. Les résultats préliminaires seront présentés en comparaison des résultats obtenus avec les CSEh.

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Knoop, Christiane. "Microchimérisme sanguin et fonction des cellules présentatrices d'antigènes: implications pour l'acceptation du greffon après transplantation pulmonaire." Doctoral thesis, Universite Libre de Bruxelles, 2000. http://hdl.handle.net/2013/ULB-DIPOT:oai:dipot.ulb.ac.be:2013/211701.

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Merville, Pierre-Gilles. "Cytokines et rejet : étude de la production de gamma-interféron et d'interleukine 6 par les cellules d'allogreffes rénales humaines et leur régulation par l'interleukine 4." Bordeaux 2, 1991. http://www.theses.fr/1991BOR23006.

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Thepenier, Cédric. "Optimisation d'un procédé de culture d'épiderme autologue : influence d'un feeder humanisé et d'une faible tension d'oxygène." Paris 7, 2014. http://www.theses.fr/2014PA077083.

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Abstract:

Notre objectif général est l'amélioration de la technique de culture d'épiderme autologue pour le traitement des grands brûlés. Pour cela nous avons rapproché de la physiologie cutanée les conditions de culture de kératinocytes primaires humains en prenant en compte le taux d'oxygène. D'autre part nous testé l'effet que ce paramètre produisait sur la croissance des kératinocytes cultivés sur cellules nouricières murines (méthode de Green) et sur leur remplacement par des cellules nourricières humaines dans l'éventualité d'une interdiction des produits xénogéniques au sein des greffons. Nous avons pu montrer tout d'abord que la densité optimale de cellules nourricières murines dépendait de la P02, et qu'une densité optimale pour une P02 de 20% pouvait s'avérer inhibitrice à 3%. A leurs densités de feeder optimales, les cultures à basse concentration d'02 (3%) ont montré un rendement 4,2 fois supérieur à ce qu'il est à 20% pour un même jour d'arrêt de culture. Cette augmentation de prolifération est un effet stable sur plusieurs passages, et s'accompagne d'une augmentation de la clonogénicité sur les passages tardifs. Pour les cultures issues de certains donneurs, abortives dans les conditions usuelles de culture (20% de p02), une basse concentration d'02 a par ailleurs rendu la culture possible sur un plus grand nombre de passage, montrant que cet effet ne se produit pas au détriment de la capacité d'autorenouvellement de la population. Enfin, les kératinocytes issus de cette modification de la méthode classique de culture conservent leur potentiel à engendrer un épiderme in vivo sur souris NOD/SCID. Par ailleurs, l'augmentation de prolifération a également pu être observée sur deux sources de cellules nourricières humaines, des cellules stromales mésenchymateuses de moelle et des fibroblastes dermiques. La capacité à engendrer un épiderme différencié in vivo après culture sur cellules humaines en hypoxie est là aussi maintenue. Enfin, il semble que cet effet d'une basse concentration d'oxygène passe par plusieurs mécanismes : directs, la prolifération de kératinocytes de lignées HaCat sans cellules nourricières étant augmentée pour une P02 à 3%; et indirects, le milieu conditionné par des cellules nourricières murines à 3% de p02 ayant plus d'effet sur la prolifération que celui issu de 20%. Ces résultats préliminaires sont en faveur d'une modification du protocole de culture d'épiderme utilisé en clinique depuis 1981 par la culture à basse concentration d'oxygène. Les bénéfices attendus pour le patient, outre la réduction du délai de culture, portent sur le sauvetage de cultures abortives et sur l'apport de kératinocytes moins différenciés, paramètre associé à une réduction de l'évolution vers la fibrose cutanée sur des modèles murins
To enhance the production conditions for cultured epidermal autografts (CEA) for large burns, we sought to study the in vitro effect of a low oxygen level on epidermal growth. We tested this parameter on CEA grown on murin feeder cells (Green's method) as well as human feeder cells. We first could evidence that the optimal feeder density depended on the oxygen level. A feeder density made optimal at 20% 02 could prove inhibitory on keratinocyte growth at 3% 02. At their respective best feeder densities, low oxygen level (3%) led to an average 4,2 fold increase in keratinocyte yield for a same arrest day as compared with 20% culture. This effect proved to be stable on several successive passagings, showing the increase in proliferation did not take place at the expense of tell self renewal. Keratinocytes grown at a low oxygen level kept their ability to form a stratifying epidermis on an in vivo NOD/SCID mouse excisional model. In parallel, the increase in proliferation was also observed when keratinocytes were cultured on human feeder cells, bone marrow mesenchymal stroma' cells and dermal fibroblasts. This effect of a low oxygen tension on keratinocytes appears to be partly direct, as the growth rate of HaCat feederless keratinocytes was enhanced at 3% vs 20% 02. It is also partly an indirect effect, as conditioned medium from murin feeder cells cultured in hypoxia has a more pronounced positive effect on keratinocyte growth than its normoxic counterpart. These preliminary resuits could lead to the modification on the culture protocol currently in use for the majority of CEA grafts for large burns. The expected benefits for the patients, beyond slightly shortening culture time, would include salvaging abortive cultures and bringing less differentiated keratinocytes, a parameter linked with a decrease in fibrotic evolution on murin models

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Perrin, Hélène. "Nouvelles voies thérapeutiques en transplantation : immunoprotection par les liquides de conservation d'organe et immunosuppression par les cellules souches mésenchymateuses." Lyon 1, 2009. http://www.theses.fr/2009LYO10023.

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Abstract:

Le développement de la transplantation d'organe incite la recherche de nouvelles stratégies pour améliorer la préservation des greffons et les thérapies immunosuppressives. Ce travail de thèse comprend deux axes : i) l'immunoprotection par les liquides de conservation d'organes et ii) l'immunosuppression par les cellules souches mésenchymateuses (CSM). L'utilisation de nouveaux liquides de conservation contenant des polyéthylènes glycols (PEG) est associée à une réduction de l'immunogénicité des greffons. Nous montrons que cet effet n'est pas dû à un masquage des antigènes, décrit dans le cas des PEG liés de façon covalente aux membranes cellulaires. L'incubation de lymphocytes (L) avec les PEG n'affecte ni leur immunogénicité ni la réponse immune in vitro. Nos résultats suggèrent que l'effet bénéfique des PEG est lié à une meilleure préservation des greffons plutôt qu'à un effet direct sur la réponse allogénique. La découverte récente du pouvoir immunosuppresseur des CSM suscite un immense intérêt pour la thérapie cellulaire. Nous avons étudié les mécanismes immunorégulateurs des CSM sur le déroulement de la réponse lymphocytaire cytotoxique in vivo, dans le modèle murin d'hypersensibilité retardée de contact au dinitrofluorobenzène. Nous montrons que les CSM exercent un fort effet suppresseur sur la réponse inflammatoire. Leur effet n'est pas dû à une inhibition de la présentation antigénique, de la génération des LT effecteurs ou de leur migration dans la peau. Elles inhibent en revanche la production in situ d'interféron- par les LT CD8+ effecteurs, facteur clé de la réponse inflammatoire
The development of organ transplantation leads to the research of new strategies for the amelioration of graft preservation and immunosuppressive therapies. This work is based on two axes: i) immunoprotection by organ preservation solutions and ii) immunosuppression by mesenchymal stem cells (MSCs). The use of new preservation solutions containing polyethylene glycol molecules (PEGs) is associated with a reduction of graft immunogenicity. We show that this effect is not due to an antigen masking effect, described for PEGs covalently bound to the cellular membrane. Lymphocyte incubation with PEGs does not affect their immunogenicity or their immune response in vitro. Our results suggest that the benefit of PEGs use is related to a better graft preservation rather than a direct effect on the allogenic response. The recent discovering of the immunosuppressive potential of MSCs causes a great interest for cell therapy. We have studied the MSCs immunoregulatory mechanisms in the cytotoxic response development in vivo, in the mouse model of contact hypersensitivity to dinitrofluorobenzene. We show that MSCs highly reduce the inflammatory response. This effect is not due to the inhibition of the antigen presentation, effector CD8+ T cells generation or migration of these cells into the skin. Instead, MSCs inhibited in situ CD8+ T cell production of interferon-, a key cytokine of the inflammatory response

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Le, Bas Stéphanie. "Anticorps impliqués dans la positivité du crossmatch lymphocytaire B en transplantation rénale : caractérisation et implications fonctionnelles des anticorps anti-hla et anti-cellules endothéliales." Nantes, 2002. http://www.theses.fr/2002NANT08VS.

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Abstract:

Nous avons analysé, chez 62 patients, des anticorps impliqués dans le crossmatch lymphocytaire B positif (CMB+) en transplantation rénale. Dans 39% des cas la positivité est due à des auto-anticorps ou des anticorps anti-HLA cl II spécifiques du greffon. Dans 61% des cas, ces anticorps sont non identifiables. La survie des greffons suivant la cible des anticorps montre que le CMB+ n'est pas toujours une contre-indication à la greffe. La réactivité des sérums de 57 patients a été testée sur des cellules endothéliales (AECA). La présence d'AECA, notée chez 33% des patients, est corrélée à leur immunisation anti-HLA mais indépendante du CMB+. Ces AECA induisent in vitro l'apoptose de cellules endothéliales. Dans une 3ème partie, nous avons montré que les anticorps anti-HLA cl II, connus pour induire l'apoptose de cellules présentatrices d'antigènes (CPA) professionnelles, n'ont pas d'effet sur les cellules endothéliales, qui en allo-transplantation peuvent devenir des CPA
We have identified, in 62 patients, antibodies involved in postive B cell crossmatch (+BCM) in kidney transplantation. In 39% the positivity was due to auto-antibodies and donor specific anti-HLA cl II antibodies. In 61% of cases, these antibodies remain unidentified. Graft survival according to antibody targets show that +BCM is not toujours a contre-indication of tran splantation. Detection of anti-endothelial ceil antibodies (AECA) was performed on sera of 57 patients was tested with endothelial cells. AECA, found in 33% of patients, was correled with anti-HLA immunization but independent of +BCM. However, these AECA induce in vitro endothelial cell apoptosis. In a third part, we have shown that anti-HLA cl II antibodies, known to induce antigen presentating cell (APC) apoptosis, have no effects on endothelial cells, wich can become APC in allo-transplantation

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Even, Amandine. "Utilisation de la thérapie cellulaire à l'aide de cellules dendritiques tolérogènes autologues en transplantation et dans les pathologies inflammatoires." Thesis, Nantes, 2019. http://www.theses.fr/2019NANT1014.

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Abstract:

Diverses études, dont celles menées par l’équipe de MC CUTURI, ont montré l’efficacité de la thérapie cellulaire à l’aide de cellules dendritiques tolérogènes dans le contrôle du rejet de greffe chez le rongeur. L’originalité de nos travaux réside dans l’utilisation de cellules autologues, les ATDC (Autologous Tolerogenic Dendritic Cells). Dans l’optique de leur application clinique en transplantation rénale, les ATDC ont été générées chez des volontaires sains. Le premier objectif de ma thèse a été de valider le procédé de fabrication de grade clinique des ATDC humaines. De plus, ces travaux ont montré que les ATDC générées à partir de monocytes de patients atteints d’insuffisance rénale présentent les mêmes propriétés tolérogènes in vitro que celles issues de volontaires sains. Enfin, les ATDC humaines, à l’instar de leurs analogues murines, sont capables de réaliser une présentation croisée d’antigène. Le second objectif a été d’étudier le rôle du récepteur à la fractalkine, le CX3CR1, fortement exprimé par nos cellules. Mes résultats indiquent que l’absence de CX3CR1 ne modifie pas la génération des ATDC murines, ni leur survie, ou leur capacité de régulation des LT in vitro. Le troisième objectif de cette thèse a été d’élargir l’utilisation des ATDC murines à d’autres pathologies inflammatoires. Bien qu’elles ne semblent pas inhiber le développement de la colite, les ATDC protègent les souris de l’induction de l’asthme allergique. Ces résultats ont permis à l’équipe de réaliser le premier essai clinique de thérapie cellulaire à l’aide de TolDC en transplantation rénale. Cet essai de phase I/II permettra d’étudier l'innocuité et l'efficacité des ATDC puis potentiellement d’étendre l'utilisation clinique des ATDC, notamment chez des patients asthmatiques
Various studies, including those done by our team, have demonstrated the efficacy of cell therapy using tolerogenic dendritic cells in the control of rodent transplant rejection. The originality of our work comes from the use of autologous cells, ATDCs (Autologous Tolerogenic Dendritic Cells). In a purpose of their clinical application in renal transplantation, the ATDCs were generated in healthy volunteers. The first objective of my thesis was to validate the clinical grade manufacturing process of human ATDCs. Furthermore, this work has shown that ATDCs generated from monocytes in patients with renal insufficiency have the same in vitro tolerogenic properties as those from healthy volunteers. Finally, as in mice, human ATDCs are able to cross-present antigen. The second objective was to study the role of the fractalkine receptor, CX3CR1, strongly expressed by our cells. My results indicate that the absence of CX3CR1 does not alter the generation of murine ATDCs, nor their survival, nor their ability to regulate LTs in vitro. The third objective of this thesis was to broaden the use of murine ATDCs to other inflammatory pathologies. Although they do not seem to inhibit the development of colitis, ATDCs protect mice from the induction of allergic asthma. These results allowed the team to perform the first clinical trial of cell therapy using TolDC in renal transplantation. This phase I/II trial will investigate the safety and efficacy of ATDCs and potentially extend the clinical use of ATDCs, particularly in asthmatic patients

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Boubaker, El Andalousi Ramzi. "Modification des caractéristiques morphologiques et fonctionnelles des muscles squelettiques après transplantation de cellules précurseurs isolées des tissus musculaire et adipeux." Montpellier 2, 2002. http://www.theses.fr/2002MON20020.

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Trayssac, Magali. "Rôle de la sphingosine-1-phosphate dans la vasculopathie de transplantation induite par les anticorps anti-HLA." Toulouse 3, 2013. http://thesesups.ups-tlse.fr/2291/.

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Abstract:

Malgré les progrès réalisés dans le domaine de la transplantation d'organes, le rejet chronique vasculaire reste la principale cause de perte du greffon à long terme, et une des principales causes de mortalité chez les patients transplantés. Cette pathologie se caractérise par un remodelage vasculaire appelé artériosclérose de greffe ou vasculopathie de transplantation (VT) au niveau des artères du greffon, entrainant progressivement une perte de fonction de l'organe greffé. La prolifération et la migration des cellules vasculaires, en particulier des cellules musculaires lisses (CML) présentes dans la paroi des artères, participent au développement de la VT. Ces phénomènes induisent une obstruction lente, progressive et irréversible des artères du greffon participant ainsi au rejet chronique de greffe. Les anticorps produits par le patient, dirigés contre les molécules HLA du greffon, seraient une cause majeure de la VT. Cependant les mécanismes d'action de ces anticorps ne sont pas bien connus et, de fait, les traitements sont actuellement peu efficaces pour prévenir la VT et améliorer la survie des patients greffés. Les anticorps anti-HLA pourraient agir directement sur les cellules vasculaires via l'activation de voies de signalisation dont l'étude et la caractérisation permettraient de mieux comprendre les mécanismes cellulaires impliqués dans le développement de la VT. Le but de la thèse est d'étudier comment les anticorps anti-HLA induisent la prolifération et la migration des CML des artères du greffon. Nous nous sommes intéressés à une voie de signalisation de stress, mise en évidence dans l'équipe, qui met en jeu séquentiellement les métalloprotéases MT1-MMP et MMP-2, la sphingomyélinase neutre de type 2 (nSMase2) et la sphingosine kinase 1 (SK1). Notre hypothèse est que les anticorps anti-HLA, en se liant aux molécules HLA à la surface des CML des artères du greffon, activent cette voie, induisant ainsi la prolifération et la migration des CML. Notre étude porte sur l'implication de cette voie dans la VT, qui a été abordée avec des approches in vitro (lignées de CML humaine) et in vivo, avec un modèle pré-clinique de xénogreffe chez la souris immunodéficiente SCID/beige, greffée avec des artères mésentériques humaines en place de l'aorte abdominale. L'injection intraveineuse hebdomadaire d'anticorps anti-HLA à ces souris pendant 5 semaines permet de créer une réaction immunitaire humorale ayant pour conséquence le développement de la VT spécifiquement au niveau du greffon humain. Dans une première partie, nous avons démontré que les anticorps anti-HLA ont un effet prolifératif sur les CML humaines in vitro via une augmentation de l'activité de MT1-MMP, MMP-2 et nSMase2. Les inhibiteurs pharmacologiques des MMP et de nSMase limitent le développement de la VT induite par les anticorps anti-HLA in vivo. Dans une deuxième partie, nous avons étudié le rôle de SK1 et de la sphingosine-1-phosphate (S1P). Les anticorps anti-HLA activent SK1 dans les CML humaines. A l'aide d'inhibiteurs de SK1, S1P et de récepteurs de S1P (S1P1 et S1P3), nous avons montré que ces acteurs moléculaires participent à la prolifération ainsi qu'à la migration des CML induites par les anticorps anti-HLA in vitro. In vivo, les anticorps anti-HLA induisent une augmentation de la concentration plasmatique de S1P et l'utilisation des inhibiteurs pharmacologiques de S1P et de S1P1 permet de prévenir la VT induite par les anticorps anti-HLA, confirmant ainsi le rôle majeur de S1P dans cette pathologie. Dans une troisième partie, nous avons étudié les effets des anticorps anti-CMH sur des CML murines. Nous avons montré qu'ils stimulent la prolifération et la migration des CML via l'activation de SK1, la phosphorylation de ERK1/2 et une augmentation de l'expression de S1P3. Nous avons en perspective la mise au point d'un nouveau modèle de VT induite par des anticorps anti-CMH chez la souris. Nos travaux ont permis de mettre en évidence de nouvelles cibles thérapeutiques susceptibles de prévenir la VT. Le développement de nouveaux traitements associés aux immunosuppresseurs devrait permettre d'améliorer le taux de survie des greffons à long terme et la santé des patients transplantés
Considerable progress has been made in organ transplantation over the past three decades reducing the rate of acute rejection in transplanted patients. However, chronic vascular rejection, or graft arteriosclerosis, or transplant vasculopathy (TV), still represents the main cause of late graft failure and limits the long-term success of organ transplantation. TV is characterized by a diffuse, concentric and progressive intimal hyperplasia of the graft arteries, resulting in arterial stenosis and chronic ischemia, leading finally to the loss of the grafted organ. Intimal hyperplasia results from the proliferation and migration of vascular cells, particularly smooth muscle cells (SMC), which leads to a slow, progressive and irreversible obstruction of the arteries and finally to chronic graft rejection. The pathogenesis of TV is only partly understood, and involves both cellular and humoral immune responses. The role of the humoral immune response is supported by the fact that donor-specific antibodies towards HLA class I are increased in transplanted patients, and may play a role in TV development and long-term allograft rejection. The signaling mechanisms evoked by anti HLA antibodies, are still unknown. The aim of my thesis is to study how anti-HLA antibodies trigger SMC proliferation and migration. We were particularly interested in studying the involvement of a stress-induced mitogenic mechanism, implicating sequentially metalloproteinases MT1-MMP and MMP-2, the neutral sphingomyelinase type 2 (nSMase2) and sphingosine kinase 1 (SK1). Our hypothesis is that anti-HLA antibodies, via their binding to HLA molecules at SMC surface, may induce cell proliferation and migration by activating this pathway. This hypothesis was tested using in vitro approaches (immortalized human SMC established from mesenteric arteries), and an in vivo model of xenograft consisting in immunodeficient SCID/beige mice grafted with mesenteric arteries in place of the abdominal aorta, and injected with anti HLA antibodies for 5 weeks, this leading to the development of TV in the human graft. In a first part, we demonstrated that anti-HLA antibodies stimulate the proliferation of human SMC via the activation of MT1-MMP, MMP-2 and nSMase2. Pharmacological inhibitors of MMP and nSMase decreased TV induced by anti-HLA antibodies in vivo. In a second part, we investigated the role of SK1 and sphingosine-1-phosphate (S1P). Anti- HLA antibodies induce an increase of SK1 activity in human SMC in vitro. Using SK1, S1P and S1P receptors (S1P1 and S1P3) inhibitors, we showed that they are involved in SMC proliferation and migration induced by anti-HLA antibodies. In vivo, anti-HLA antibodies induce an increase of S1P in the plasma of grafted immunodeficient SCID/beige mice, while the use of S1P and S1P1 pharmacological inhibitors prevents TV development in the animals, confirming the key-role of S1P in this pathology. In a third part, we studied the effect of anti-MHC antibodies on murine SMC. They stimulate proliferation and migration of SMC. SK1 and S1P are involved in the mitogenic and migratory signaling evoked by anti-MHC antibodies on SMC, which also involves the phosphorylation of ERK1/2 and an increase of S1P3 expression. In perspective, we develop a new model of TV induced by anti-MHC antibodies in mice. These studies highlight the existence of new therapeutic targets involved in TV, and relevant for preventing this pathology. The development of new treatments should allow to improve the rate of graft survival and long-term health of transplant patients

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Negroni, Elisa. "Potentiel myogénique des cellules humaines : conséquences en thérapie cellulaire." Paris 6, 2008. http://www.theses.fr/2008PA066080.

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Abstract:

Le muscle squelettique humain est une cible pour le développement d’approches de thérapie cellulaire pour le traitement des maladies neuromusculaires. La réparation du muscle squelettique adulte est effectuée par une population de cellules appelées cellules satellites. Leur capacité proliférative réduite chez l’homme et l’épuisement dans les maladies dégénératives, limite la réussite d’une thérapie par transfert de myoblastes. Un objectif de mon étude a consisté à déterminer si l’induction d’un choc thermique sur des myoblastes humains améliore l’efficacité de transplantation in vivo. Cette approche entraîne une amélioration du potentiel myogénique des myoblastes humains et représenterait une stratégie applicable dans les essais cliniques. La seconde partie du projet a consisté à évaluer le potentiel myogénique de cellules souches humaines, comme candidats alternatifs aux myoblastes. Nous montrons que deux populations de cellules du muscle adulte exprimant les antigènes AC133 et CD34 ont une meilleure potentiel myogénique in vivo comparée à celui des myoblastes humains. Suggérant une leur utilisation dans certaines dystrophies musculaires

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Dissertations / Theses on the topic 'Transplantation de cellules fétales'

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