Academic literature on the topic 'Transporteur de saccharose'

L'utilisation de l'acide para-chloromercuribenzene sulfonique (pcmbs) (reactif peu permeant des groupements thiols) comme marqueur differentiel du transporteur de saccharose des tissus foliaires de feve (vicio faba) revele une forte inhibition selective de l'absorption du saccharose. Cette inhibition est due au blocage du transporteur et non a celui de la pompe a protons fournissant l'energie necessaire au transport. Le point d'impact du pcmbs se situe au niveau du site actif de l'enzyme. Ce marquage differentiel a permis de mettre au point un test de reconnaissance des substrats par le transporteur de saccharose. Les resultats obtenus precisent les exigences stereochimiques du transporteur de saccharose et sont utilisables pour la synthese bioprogrammee de pesticides a systemie phloemienne

Le mode de vie parasitaire de Phelipanche ramosa la rend responsable de ravages considérables. Son incapacité à réaliser la photosynthèse la rend entièrement dépendante vis-à-vis des photoassimilats de la plante hôte. Le développement de l'orobanche repose sur sa capacité à se connecter au phloème de l'hôte et à devenir un organe puits compétitif. Dans ce contexte, l'utilisation d'un traceur phloémien a permis de démontrer l'existence d'un continuum symplasmique à l’interface hôte-parasite et la nature majoritairement de type apoplasmique de la décharge phloémienne dans les différents tissus puits de P. Ramosa. Les principaux acteurs impliqués dans le transport (SUT = sucrose transporter) et le métabolisme du saccharose (invertases et saccharose synthétases) ont été identifiés. Par des approches moléculaires, d’immunolocalisation et d’hybridation in situ, ces travaux ont précisé l'implication de certains de ces acteurs dans des processus majeurs, tels que le transport du saccharose à longue distance et sa décharge dans les organes puits (PrSUT1 et PrSUT3), la mise en réserve d'hexoses via une invertase acide vacuolaire (PrSAI1), la différentiation des trachéides et la synthèse d'amidon via des saccharose synthétases (PrSUS1 et PrSUS2, respectivement). D'autres marqueurs, tels que l'isopentényl transférase PrIPT et la cytokinine oxydase PrCKX, joueraient un rôle dans l'équilibre hormonal de l'orobanche et contribueraient à réguler sa force de puits. L'ensemble de ces gènes/protéines indispensables au développement de P. Ramosa constitueraient ainsi de bonnes cibles pour valider l'efficacité d'une lutte biotechnologique contre les orobanches<br>As a consequence of its incapacity to carry out photosynthesis, Phelipanche ramosa turns out to be fully dependent on the photosynthates from the host plant and due to its obligatory parasitic lifestyle this plant is responsible for considerable devastations. The development of broomrape relies on its capacity to establish connection with the phloem of the host and to become a competitive sink organ. In this context, the use of a phloem tracer demonstrated the existence of a symplasmic continuum at the host-parasite interface and, that the phloem unloading in various sinks tissues of P. Ramosa is mainly an apoplamic type. The main actors involve in transport (SUT = sucrose transporter) and sucrose metabolism (invertases and sucrose synthases) were identified. Using molecular approaches, immunolocalization, and in situ hybridization, we demonstrated the implication of some of these actors in major processes, such as the long-distance transport of sucrose and its unloading in sink organs (PrSUT1 and PrSUT3), hexose accumulation via a vacuolar acid invertase (PrSAI1), the tracheid differentiation and the starch synthesis via sucrose synthases (PrSUS1 and PrSUS2, respectively). Other markers, such as the isopenthenyl transferase PrIPT and the cytokinin oxidase PrCKX, would play a role in the hormonal balance of broomrape and would contribute to control its sink strength. All of these genes/proteins which are essential to the development of P. Ramosa are then putative good targets in biotechnological strategies to control broomrapes

Chez le ray-grass anglais, espèce fourragère prédominante des prairies Normandes, il existe des transporteurs de saccharose (LpSUTs) responsables du transport latéral de ce composé pour permettre son chargement dans le phloème dans les tissus sources de carbone ou son déchargement dans les tissus puits. Ces transporteurs sont d’excellents candidats pour la gestion fine et efficace de la distribution des ressources glucidiques de la plante, notamment en réponse aux variations de l’environnement. Les caractéristiques biochimiques et la localisation tissulaire spécifique du transporteur LpSUT1 suggèrent qu’il est le principal responsable du transport latéral du saccharose.Nous avons cherché à moduler la disponibilité du saccharose en perturbant les relations sources et puits des tissus par des facteurs abiotiques (e.g. cycle nycthéméral) et biotiques (e.g. pulvérisation de bactéries au niveau de la phyllosphère). Dans ces deux conditions, l’expression du gène LpSUT1 dans les organes sources que sont les limbes est peu affectée, malgré une perturbation importante des teneurs en saccharose. L’apport de glucides, d’analogues structuraux et d’un inhibiteur de l’activité de l’hexokinase à des limbes excisés montre que le saccharose reste cependant un signal glucidique capable d’augmenter l’expression transcriptionnelle de LpSUT1. Le glucose est aussi un signal qui module négativement l’expression de LpSUT1 quand il est perçu par l’hexokinase, et positivement lorsqu’il est perçu indépendamment de cette dernière. Un excès de saccharose et de glucose apoplasmique pourrait être détecté au niveau membranaire ce qui régulerait positivement l’expression du gène LpSUT1 pour augmenter l’importation du saccharose vers le cytoplasme. A l’inverse, l’accumulation cytoplasmique de glucose provoquerait l’inhibition de l’expression du gène LpSUT1 pour y limiter l’accumulation de glucides.La régulation transcriptionnelle du gène LpSUT1 fait appel à des voies de signalisation complexes, sensibles en partie aux signaux glucidiques, mais d’autres LpSUTs et facteurs de régulation devront encore être identifiés pour mieux comprendre les enjeux du transport de saccharose dans la gestion du carbone chez le raygrass anglais<br>In the perennial ryegrass, the predominant forage species of Normand meadows, sucrose transporters (LpSUTs) are involved in the lateral transport of this compound to load sucrose in the phloem of the source tissues and its unloading in sink tissues. These transporters are excellent candidates for the tight and efficient management of the plant sugars, particularly in response to environmental variations. The biochemical properties and specific tissular localization of the sucrose transporter LpSUT1 suggest that it is the main actor of the lateral transport of sucrose.We induced a modulation of the sucrose availability in the tissues through the disruption of the source/sink relationships using abiotic (e.g. diel cycle) and biotic factors (e.g. spraying bacteria abundantly on the phyllosphere). In both conditions, LpSUT1 expression in source tissues like the leaf blades was not too much affected, despite the important disruption of the sucrose content. By supplying excised leaf blades with sugars, sugar analogs and an inhibitor of the hexokinase activity, we showed that sucrose was still a sugar signal which could up-regulate LpSUT1 expression. Glucose is also a signal for LpSUT1 down-regulation when perceived by the hexokinase and for its up-regulation when perceived in a way independent of the hexokinase. The excess of apoplastic sucrose and glucose could be detected at the plasmalemma which could induce LpSUT1 up-regulation to increase the sucrose import to the cytoplasm. Conversely, the cytoplasmic accumulation of glucose could downregulate LpSUT1 expression to limit the accumulation of cytoplasmic sugars.The transcriptional regulation of LpSUT1 involved complex signaling pathways partially responding to sugar signals, but other regulation factors should be identified to further comprehend the implications of the sucrose transport for the perennial ryegrass carbon management

La protéine membranaire BmrA de Bacillus subtilis est un transporteur ABC (ATP-binding cassette) impliqué dans les phénomènes de résistance à de multiples drogues. Son protocole de purification a été optimisé afin de l'adapter aux exigences d'une étude cristallographique et une caractérisation détaillée du complexe protéine-détergent-lipides purifié a été réalisée par diverses méthodes biophysiques. Parallèlement, des essais de cristallisation ont été menés sur la protéine sauvage et sur un mutant inactif. Les saccharose isomérases MutB de P. Mesoacidophila MX-45 et SmuA de P. Rubrum catalysent l'isomérisation du saccharose en isomaltulose et tréhalulose, deux édulcorants au fort potentiel nutritionnel et industriel. Les deux enzymes ont été cristallisées et de nombreuses structures de MutB native et de mutants, en complexe avec divers inhibiteurs ou avec le substrat naturel, ont été résolues nous permettant d'analyser les mécanismes et spécificités des réactions catalysées

Les proteines catalysant l'absorption active du saccharose a travers la membrane plasmique des cellules vegetales jouent un role-cle pour la productivite vegetale car elles controlent des etapes essentielles du transport a longue distance des assimilats. Des travaux anterieurs menes au laboratoire avaient demontre la presence d'un groupement thiol protege par le substrat dans le site actif du transporteur de saccharose. Sur cette base, nous avons developpe une technique de marquage differentiel par la n-ethylmaleimide (nem)- #3h et #1#4c pour identifier un polypeptide membranaire intrinseque de 42 kda qui est differentiellement marque par la nem en presence de saccharose, mais pas en presence d'analogues non transportes du saccharose. L'identification de ce polypeptide comme le transporteur de saccharose de la membrane plasmique des cellules foliaires de betterave sucriere (beta vulgaris l. ) a ete confirmee sur des bases fonctionnelles. En effet, plusieurs serums polyclonaux diriges contre la region 42 kda du plasmalemme, preparee dans des souris ou des lapins, se sont reveles capables d'inhiber specifiquement l'absorption active du saccharose dependance d'une force proton-motrice artificielle dans des vesicules de plasmalemme purifiees. Ces serums ont egalement ete utilises pour mettre au point un test elisa (enzyme-linked immunosorbent assay) qui a permis d'identifier des fractions de membranes plasmiques possedant une activite de transport du saccharose apres purification partielle par chromatographie liquide a haute performance et reconstitution dans des proteoliposomes. Apres solubilisation par un detergent non-denaturant, le polypeptide 42 kda est retrouve sous forme d'un complexe 120 kda

Le débourrement des bourgeons végétatifs, étape clé de la mise en place de l'architecture d'une plante, est sous le contrôle de facteurs endogènes et des facteurs de l'environnement. Les bourgeons sont des organes puits qui nécessitent d' importer des sucres pour débourrer. Peu de données sont cependant disponibles sur cette importation et sur le rôle des transporteurs de sucres dans ce processus. Chez le rosier buisson (Rosa hybrida), des résultats précédents à cette étude ont montré que les bourgeons ont un besoin absolu de lumière pour débourrer, même en l'absence d'inhibitions corrélatives telles que la dominance apicale. Le photocontrôle du débourrement implique une stimulation du métabolisme carboné à la lumière, indiquant une mobilisation du saccharose en provenance de la tige. Le principal objectif de cette thèse a été de déterminer le rôle des transporteurs de sucres dans le photocontrôle du débourrement des bourgeons de rosier. Des expériences de culture in vitro ont montré que les bourgeons de rosiers ont besoin d'importer des sucres métabolisables (saccharose, glucose ou fructose) pour débourrer à la lumière. Un apport exogène de ces di érents sucres stimule également leur débourrement à l'obscurité (condition inhibitrice). Après décapitation (levée de dominance apicale), l'utilisation de sucres radiomarqués a permis de montrer que le photocontrôle du débourrement est concomitant à une accumulation d'hexoses puis de saccharose, faisant intervenir à la fois un transport passif et actif des sucres. Cette accumulation pourrait donc impliquer des connexions symplasmiques ainsi que l'activité de transporteurs de sucres. Des marquages de la sève phloémienne à l'aide d'un traceur fluorescent ont montré que les bourgeons dormants sont isolés de la portion de tige adjacente et que des connexions s'établissent lors des stades tardifs du débourrement. Afin d'étudier le rôle des transporteurs de sucres dans le photocontrôle du débourrement, nous avons isolé 10 transporteurs potentiels de glucides (3 de saccharose et 7 d'hexoses). Les analyses d'expression des di érents gènes codant ces transporteurs par RT-QPCR suggèrent que le co-transporteur de saccharose/H+ RhSUC2, ainsi que les transporteurs d'hexoses potentiels RhSTP1 et RhTMT2 sont impliqués dans le photocontrôle du débourrement. La validation fonctionnelle de RhSUC2 a été e ffectuée chez la levure et confirme sa fonction de co-transporteur de saccharose/H+. L'ensemble des résultats obtenus permettent de progresser dans la compréhension des mécanismes impliquant le métabolisme glucidique dans le photocontrôle du débourrement<br>Bud break is a key developmental process controlling plant architecture. Buds are sink organs which require to import sugars to outgrowth. Very little is known about the way this sugars are imported and the role of sugar transporters in this process. In rosebush (Rosa hybrida), bud break requires light to occur, even in the absence of correlative inhibitions such as apical dominance. Bud break photocontrol involves a stimulation of sugar metabolism under light, indicating a mobilization of sucrose from the stem. The main goal of this work was to determine the role of sugar transporters in rose bud break photocontrol. In vitro experiments showed that rose buds need to import metabolisable sugars (sucrose, glucose or fructose) to outgrowth under light. Supplying buds with these sugars also promote bud break under total darkness (inhibitory condition). After beheading (apical dominance release), assays with radiolabelled sugars showed that bud break photocontrol is correlated with an uptake of hexose and then of sucrose. Furthermore, these uptake require both passive and active components. They could therefore involve symplasmic connections and sugar transporter activity. Phloem sap labelling with a fluorescent tracer demonstrated that dormant bud are not symplasmically connected to the surrounding stem and that connections take place at late stages of bud break. To study the role of sugar transporters into bud break photocontrol we isolated 10 putative sugar transporters (3 for sucrose and 7 for hexose). RT-QPCR analysis suggest that the high a nity sucrose/H+ symporter RhSUC2, as well the putative hexose transporters RhSTP1 and RhTMT2 are involved in bud break photocontrol. Functional validation of RhSUC2 in yeast expression system confirmed it is a sucrose/H+ symporter. All together, results allowed us to get insights of the mechanisms involved in bud break photocontrol by sugar metabolism

Le débourrement des bourgeons végétatifs, étape clé de la mise en place de l'architecture d'une plante, est sous le contrôle de facteurs endogènes et des facteurs de l'environnement. Les bourgeons sont des organes puits qui nécessitent d' importer des sucres pour débourrer. Peu de données sont cependant disponibles sur cette importation et sur le rôle des transporteurs de sucres dans ce processus. Chez le rosier buisson (Rosa hybrida), des résultats précédents à cette étude ont montré que les bourgeons ont un besoin absolu de lumière pour débourrer, même en l'absence d'inhibitions corrélatives telles que la dominance apicale. Le photocontrôle du débourrement implique une stimulation du métabolisme carboné à la lumière, indiquant une mobilisation du saccharose en provenance de la tige. Le principal objectif de cette thèse a été de déterminer le rôle des transporteurs de sucres dans le photocontrôle du débourrement des bourgeons de rosier. Des expériences de culture in vitro ont montré que les bourgeons de rosiers ont besoin d'importer des sucres métabolisables (saccharose, glucose ou fructose) pour débourrer à la lumière. Un apport exogène de ces di érents sucres stimule également leur débourrement à l'obscurité (condition inhibitrice). Après décapitation (levée de dominance apicale), l'utilisation de sucres radiomarqués a permis de montrer que le photocontrôle du débourrement est concomitant à une accumulation d'hexoses puis de saccharose, faisant intervenir à la fois un transport passif et actif des sucres. Cette accumulation pourrait donc impliquer des connexions symplasmiques ainsi que l'activité de transporteurs de sucres. Des marquages de la sève phloémienne à l'aide d'un traceur fluorescent ont montré que les bourgeons dormants sont isolés de la portion de tige adjacente et que des connexions s'établissent lors des stades tardifs du débourrement. Afin d'étudier le rôle des transporteurs de sucres dans le photocontrôle du débourrement, nous avons isolé 10 transporteurs potentiels de glucides (3 de saccharose et 7 d'hexoses). Les analyses d'expression des di érents gènes codant ces transporteurs par RT-QPCR suggèrent que le co-transporteur de saccharose/H+ RhSUC2, ainsi que les transporteurs d'hexoses potentiels RhSTP1 et RhTMT2 sont impliqués dans le photocontrôle du débourrement. La validation fonctionnelle de RhSUC2 a été e ffectuée chez la levure et confirme sa fonction de co-transporteur de saccharose/H+. L'ensemble des résultats obtenus permettent de progresser dans la compréhension des mécanismes impliquant le métabolisme glucidique dans le photocontrôle du débourrement.