Academic literature on the topic 'Trypanosomiase américaine'

La maladie de Chagas affecte six à huit personnes dans le monde. Depuis quelques décennies, cette pathologie se diffuse hors de sa zone d’endémie, l’Amérique latine. Cette infection présente de grandes difficultés tant pour le diagnostic que pour le traitement. Malgré les avancées importantes de ces dernières années, l'amélioration du diagnostic reste un défi majeur dans la prise en charge des patients atteints de Trypanosomiase Américaine. Dans une première partie, nous présentons nos études sur le développement d'un nouveau test de diagnostic basé sur l'identification directe d'antigènes parasitaires présents dans le sérum. Nous avons analysé le surnageant de culture de cellules infectées par T. cruzi par spectrométrie de masse et nous avons identifié une protéase parasitaire, la Chagasin, qui pourrait être un marqueur sérique de l’infection à T. cruzi. Dans une deuxième partie, nous présentons une étude permettant d’interpréter et d’évaluer un nouveau test diagnostic "Western Chagas IgG" fabriqué, à partir d’extraits protéique de T. cruzi, conjointement par la société LDBIO Diagnostics (Lyon, France) et le laboratoire de parasitologie et de mycologie de l'hôpital Pitié Salpétrière. Les résultats de cette étude montrent que les valeurs de sensibilité et de spécificité de ce test sont proches de 100%. Nous considérons que l'immunoblot "Western Chagas IgG"est un excellent test diagnostic de confirmation de la maladie de Chagas et destiné à la vérification de résultats équivoques obtenus par le biais de tests de dépistage plus classiques
Six to eight people are affected by Chagas disease worldwide. Most of the patients are found in South America; however, more and more countries in the north are confronted with this infection that presents great difficulties both in the diagnosis and in the treatment. Despite significant technological advances in recent years, improved diagnosis is a major challenge in the management of patients with Chagas disease. In a first part, we present our studies about the development of a new diagnostic test based on the direct identification of parasitic antigens present in the serum. We analyzed the culture supernatant of cells infected with T.cruzi by mass spectrometry and we identified soluble parasitic proteins. Subsequently, we showed that Chagasin, a parasitic protease, which could be good serum marker of T. cruzi infection.In second part, we present a study that allow the interpretation and evaluation of a new immunoblot assay "Western Chagas IgG" (CE mark) by LDBIO Diagnostics (Lyon, France). This assay based on trypomastigote and amastigote extract manufactured by the laboratory of parasitology and mycology of Pitié Salpétrière hospital. These results show that this assay has sensitivity and specificity values close to 100% and is considered an excellent serological assay intended for confirmatory testing of a positive or equivocal result obtained through classic screening tests

La maladie de Chagas causée par Trypanosoma cruzi connaît une évolution en deux étapes: une phase aiguë suivie d'une phase chronique. Dans le présent travail, nous avons caractérisé les immunogènes majeurs parmi les ESA des formes trypomastigotes, et développé une technique de diagnostic de la phase aiguë de la maladie appelée SCCA. Ce test est basé sur la détection de complexes immuns circulants IgM, IgA et IgG dans les sérums de patients, et dont l'utilisation pourra être envisagée en zones d'endémie. Les ESA ont également été utilisés dans des protocoles d'immunisation en association avec Bordetella pertussis et de l'alum comme adjuvant, chez la souris BALB/c et le rat Fischer. Des niveaux de protection significatifs en terme de parasitémie et de mortalité ont été obtenus. L'analyse de la réponse isotypique spécifique montre une prédominance des anticorps IgG1, Ig2a et IgG2b. Ces anticorps réagissent vis-à-vis de deux composants de 85 et 24 kDa, et sont lytiques in vitro en présence du complément vis-à-vis des formes infectantes. Le clonage et le séquençage du cDNA codant pour la molécule de 24 kDa a été réalisé. Les peptides 20-40 et 109-124 dérivés de la séquence ont été testés pour leur pouvoir protecteur chez la souris. Seul le peptide 109-124 est capable d'induire une protection significative contre une infection léthale. Une étude plus approfondie des mécanismes mis en jeu dans cette protection, permettra de mieux définir le type de réponse suscitée par le peptide 109-124, et d'envisager des constructions et des protocoles tels qu'ils soient capables de favoriser cette réponse

La maladie de Chagas est une parasitose humaine et vétérinaire d'Amérique latine. Le parasite, Trypanosoma cruzi, est très présent dans la faune sauvage et depuis que l'homme est arrivé en Amérique latine, la maladie lui est transmise par les insectes de la famille des Triatominae. À partir des années 1980, de grands plans de prévention ont été mis en application pour éliminer certains de ces vecteurs, installés dans les maisons. Bien que ces initiatives aient, dans l'ensemble, remporté un franc succès, des vecteurs non-domiciliés continuent de transmettre la maladie dans plusieurs régions et y engendrent des prévalences non négligeables. Après avoir fait le bilan de la présence et de l'importances des différentes espèces de vecteurs non-domiciliés à l'échelle du continent, une approche de modélisation a été développée pour affiner la connaissance de ces populations et évaluer le potentiel de stratégies de contrôle. L'association étroite des modèles réalisés et de jeux de données conséquents a permis d'identifier des paramètres essentiels de la reproduction et de la migration des vecteurs de la région du Yucatan au Mexique. Ces résultats ont permis d'évaluer le potentiel de plusieurs moyens de contrôle à l'échelle d'un village puis d'envisager l'optimisation coût/bénéfice de la lutte vectorielle à l'échelle d'une région comme la péninsule du Yucatan. Bien que l'approche proposée doive encore être consolidée, les résultats établis permettent de proposer une méthodologie générale pour établir des priorités de recherche et de traitement en s'appuyant fortement sur les outils développés de cartographie taxonomique et d'optimisation de la lutte vectorielle
Chagas disease is a human and animal parasitic disease of Latin America. The parasite, Trypanosoma cruzi, is widespread in wild fauna populations and the disease is transmitted to man by insects of the Triatominae family, since men arrived in Latin America. Since the 1980‘s, large actions of prevention have been implemented to eliminate vectors inhabiting houses (domiciliated vectors). Although these initiatives have, overall, a resounding success, non-domiciliated vectors continue to spread the disease in several regions and generate significant prevalence in man. After assessing the presence and importance of different species of non-domiciliated vectors across the continent, a modeling approach was developed to refine our understanding of their populations and evaluate the potential of control methods. The confrontation between model and large data sets allowed the identification of key parameters of reproduction and migration of the vectors in the region of Yucatan, Mexico. These results were used to estimate several methods of control at the house level, the village level and then consider optimizing costs and benefits of vector control at a regional level in the Yucatan Peninsula. Although the proposed approach should be further strengthened, the results allow us to propose a general methodology for establishing priorities for research and treatment, relying heavily on the tools developed here: taxonomy mapping and optimization of vector control

Notre travail de thèse a consisté à rechercher de nouvelles substances naturelles ou synthétiques ayant un effet trypanocide. Nous nous sommes tout d'abord intéressés à des substances actives contenues dans le venin de différents serpents (cerastes. Ceraste, naja haje et vipera lebetine). Par la suite, nous nous sommes focalisés sur le venin de C. Ceraste en raison de son innocuité. Notre étude in vitro, a montré une diminution significative de l'incorporation de thymidine tritiée par les formes épimastigotes, et de l'uridine tritiée par les formes trypomastigotes et amastigotes en présence de ce venin. Ces résultats suggèrent une activité significative du venin de C. Cerastes sur les différentes formes de T. Cruzi. Suite à ces observations, nous avons purifié par chromatographie plusieurs fractions du venin hautement actives contre les formes épimastigotes. De plus, ces fractions sont efficaces sur trois souches de T. Cruzi (souches y, cl et teh). Dans un second temps, nous avons étudié l'effet d'une substance chimique (le composé 1a, analogue de l'amino-2-diphényl sulfuré) qui est un inhibiteur compétitif de la trypanothion réductase. Cette enzyme joue un rôle essentiel dans le système de défense de T. Cruzi contre les radicaux libres. In vitro, ce composé s'avère plus efficace dans son activité trypanocide que le nifurtimox et le benznidazole, drogues de référence utilisées contre la maladie de chagas. Notre étude a montré que le composé 1a est inactif sur la glutathion réductase de mammifère, ce qui nous permet d'envisager sa possible utilisation in vivo. Dans une étude préliminaire nous avons déterminé que la dose léthale chez la souris était 100 fois plus importante que celle nécessaire pour obtenir un effet trypanocide in vitro

Le contrôle de la maladie deChagas est essentiel car elle traverse les frontières à l’occasion des migrations ou qu’elle est transmise par voie congénitale. A Santa Cruz, Bolivie, la transmission vectorielle diminue grâce à la lutte antivectorielle. Bien que la prévalence de la maladie de Chagas baisse chez les femmes enceintes, l’incidence de la maladie de Chagas congénitale est de 0,8% et le taux de transmission vertical de 3,4%, nécessitant un programme de dépistage et de traitement des nouveau-nés atteints. Nous avons validé un test de diagnostic rapide (Chagas Stat Pack®) permettant une prise en charge précoce des cas. En outre, nous avons identifié certains facteurs de risque permettant de mieux cibler les interventions de dépistage et le diagnostic à l’accouchement. Nous avons également montré que l’efficacité du traitement pouvait être confirmée par la disparition des anticorps spécifiques à partir du 8ème mois de vie. Enfin, nous avons effectué un essai clinique randomisé avec le benznidazole pour en simplifier le traitement (1 mois au lieu de 2 mois habituellement), réduire la posologie (7,5 mg/kg par jour en une prise (au lieu de 10 mg/kg en 2 prises quotidiennes), sans altérer l’efficacité ni modifier l’adhésion. Le traitement qui est bien toléré, est ainsi moins coûteux et plus facilement applicable
Control of Chagas disease is crucial because it crosses borders during people migration or may be transmitted during pregnancy. In Santa Cruz, Bolivia, vector transmission decreases with vector control. Although the prevalence of Chagas decreases in pregnant women, the incidence of congenital Chagas disease remains 0. 8% and the rate of vertical transmission of 3. 4%, requiring a program of screening and management of infected infants. We validated a rapid diagnostic test (Chagas Stat Pack ®) allowing early treatment of cases. In addition, we have identified some risk factors to better target interventions and diagnostic testing at birth. We also showed that the effectiveness of treatment could be confirmed by the disappearance of specific antibodies at the 8th month of life. Finally, we conducted a randomized clinical trial with benznidazole to simplify treatment (one month instead of two months usually), reduce the dose (7. 5 mg / kg once daily (instead of 10 mg / kg in 2 divided doses daily), without altering the efficacy or change the compliance. Treatment is well tolerated, less expensive and easier to apply

La maladie de Chagas représente un problème majeur de santé en Amérique du Sud et Centrale. Le parasite responsable est un protozoaire hemoflagellé, Trypanosoma cruzi. Chez l'homme la maladie connaît une évolution en deux phases : - une phase aiguë qui succède presque immédiatement à l'infection. Cependant lors de cette phase les symptômes cliniques n'apparaissent que dans 50% de cas, - une phase chronique pendant laquelle il est difficile de détecter des parasites dans la circulation sanguine de l'hôte. Le développement de techniques de diagnostic spécifiques et sensibles aussi bien que la recherche de molécules parasitaires à potentialités vaccinantes peuvent aider pour le contrôle de cette infection. Dans le présent travail, nous avons utilisé une protéine de T. Cruzi de masse moléculaire 24 kDa, pour le sérodiagnostic de la maladie de Chagas. En utilisant un test ELISA avec la protéine recombinante (rTc24) comme antigène, nous avons pu montrer la présence d'anticorps diriges vis-à-vis de l'antigène Tc24 dans un pourcentage élevé de sérums provenant de différentes zones endémiques (Colombie 95%, Équateur 90,9%, Bolivie 94%, Argentine 89% et Brésil 98%). Des études menées au Brésil et en Équateur montrent que la protéine rTc24 peut être utilise pour évaluer la guérison des patients chagasiques soumis à un traitement spécifique. Cependant, une faible réactivité croisée des anticorps anti-Tc24 avec une protéine de Trypanosoma rangeli (Tr21) a été montrée. Néanmoins, nous avons pu identifier un domaine spécifique de la Tc24 dans la partie N-terminale de la molécule. En effet, en utilisant des oligonucléotides correspondants à la séquence peptidique spécifique, nous avons développé un test de réaction de polymérase en chaîne spécifique pour T. Cruzi. Une autre partie de ce travail a concerné l'évaluation du pouvoir immunoprotecteur de la rTc24 vis-à-vis de l'infection chagasique expérimentale. La Tc24 induit par immunization un bon niveau de protection avec une production de IL-2 et IFN-[Gamma] (profil de type Th1).

Trypnosoma cruzi, le protozoaire agent de maladie de Chagas, peut être transmis de la mère à son foetus. L'incidence de cette infection congénitale est estimée au minimum à 15000 cas par an en Amérique latine. Son incidence dans les pays non endémique (USA, Europe, Japon. . . ) n'est pas connue. Grâce à des études multidisciplinaires réalisée en Bolivie, il a été possible de préciser les caractéristiques épidémiologiques et cliniques de la maladie de Chagas congénitale. La voie transplacentaire, de même que le rôle de certains facteurs parasitaires (génotype et charge parasitaire) ou de l'hôte (capacité de réponse immune des gestantes et des foetus/nouveau-nés, notamment la génération des cellules T CD8 cytotoxiques et produisant de l'IFN-y), impliqués dans la transmission materno-foetale de l'infection et/ou le développement de la maladie de Chagas congénitale, ont également été étudiés. L'ensemble de ces données a permis le développement d'une stratégie de contrôle de l'infection congénitale, validée par l'OPS/OMS et en application en Amérique latine
Trypanosoma cruzi, the protozoan agent of Chagas disease can be transmitted from mother to foetus. The incidence of congenital infection is estimated to be at least 15000 cases per year in Latin-America. Its incidence in the non endemic countries (USA, Europe, Japon. . . ) is not known. Thanks to multidisciplinary studies performed in Bolivia it has been possible to specified the epidemiologic qand clinical features of congenital Chagas disease. The transploacental route, as well as the role of some parasitic (genotype and parasitic charge) or host factors (capacity of maternal and fetal/neonatal immune responses, particularly the generation of CD8 T cells with cytotoxic and IFN-y-producing capacities) involved in mother to foetus transmission of infection and/or development of congenital Chagas disease have been also studied. Altogether, these data have hallowed the development of a strategy to control T. Cruzy congenital infection, which has been validated by PAHO/WHO and its applied in Latin America

Nous avons étudié la modulation du courant calcique de type l (I#C#A#l) des cardiomyocytes isolées : par les anticorps associés à la cardiomyopathie chagasique (MCH), par anticorps antipeptide et par la ciclosporine A (CSA). I#C#A#l a été étudié en patch clamp en configuration cellule entière. Des immunoglobulines (IGG) provenant de souris infectées avec T Cruzi ont été caractérisées aux différentes phases de la MCH. La cible de ces IGG a été étudié par des tests Elisa contre des peptides synthétiques correspondant aux séquences d'acides aminés des deuxièmes boucles extracellulaires des récepteurs #1 et #2-adrénergiques (#1R et #2R) et M#2-muscarinique (M#2R). Dans la phase aigue de la MCH prédominent des IGG dirigés contre le #1R, ils sont capables d'augmenter I#C#A#l et dans la phase chronique prédominent des IGG dirigés contre le M#2R, ils sont capables de diminuer I#C#A#l ces résultats confirment la composante auto-immune de la MCH. Après, nous avons utilisé un peptide synthétique ayant la même séquence d'acides aminés que la deuxième boucle extracellulaire du #2R humain. Les anticorps anti-#2R (RAH26Q) sont capables d'activer I#C#A#l. Cette activation est due à la reconnaissance d'un épitope dans la conformation active du récepteur. Ce résultat constitue la première preuve de l'existence d'un récepteur ayant deux états dans les cellules natives. Nous avons étudié les effets de la CSA in vivo et in vitro sur I#C#A#l et sur les mouvements de charges intramembranaires des canaux calciques cardiaques (MCI) chez le cobaye. L'étude des MCI suggère que ces canaux des animaux traités et non avec CSA ne sont pas altérés. I#C#A#l dans les cellules d'animaux traités in vivo a été réduit ainsi que la disponibilité des canaux calciques est augmentée. L'application directe de CSA sur des cellules d'animaux normaux montre que la cinétique d'inactivation de I#C#A#l est altérée et aussi une diminution de la disponibilité de ces canaux

Cette thèse concerne la conception d'une nouvelle famille d'inhibiteurs spécifiques de la trypanothion reductase (tr) de trypanosoma cruzi, a partir de molécules - têtes de série issues d'un test enzymatique de criblage et d'études de dynamique et de modélisation moléculaires, et en l'optimisation, par des variations structurales, de l'activité inhibitrice de ces molécules. Les molécules ainsi envisagées : des mono et des bis(2-aminodiphenylsulfures) possédant deux chaînes latérales polyaminées, sont présentées dans le premier chapitre. Le deuxième chapitre décrit la synthèse de ces composes et présente les résultats enzymatiques de ces deux premières générations d'inhibiteurs de la tr. Dans le troisième chapitre est présente le comportement particulier des bis(2-aminodiphenylsulfures) en solution. Ce comportement permet d'expliquer les différences constatées entre les k#i mesures et les k#i obtenus a partir des ic#5#0 mesurées. Dans le quatrième chapitre, la synthèse de dérives dissymétriques de la famille des 2-aminodiphenylsulfures a permis d'étudier l'influence de différentes variations structurales sur l'inhibition de la tr. Enfin, dans le cinquième chapitre sont présentées la synthèse et l'activité d'une quatrième génération de composes : des bis(2-aminodiphenylsulfures) présentant trois chaînes latérales (une famille de trimères). Une de ces molécules marquées par l'intermédiaire de la biotine nous permettra d'étudier la pénétration et la localisation ultérieure de ce type de composes a l'intérieur du parasite trypanosoma cruzi.