To see the other types of publications on this topic, follow the link: Tumeur infiltrante.
Dissertations / Theses on the topic 'Tumeur infiltrante'
Create a spot-on reference in APA, MLA, Chicago, Harvard, and other styles
Consult the top 45 dissertations / theses for your research on the topic 'Tumeur infiltrante.'
Next to every source in the list of references, there is an 'Add to bibliography' button. Press on it, and we will generate automatically the bibliographic reference to the chosen work in the citation style you need: APA, MLA, Harvard, Chicago, Vancouver, etc.
You can also download the full text of the academic publication as pdf and read online its abstract whenever available in the metadata.
Browse dissertations / theses on a wide variety of disciplines and organise your bibliography correctly.
1
Sahwi, Ata. "Tumeurs infiltrantes de la vessie stade pT3b : intérêt de la chimiothérapie adjuvante, à propos de 90 abservations." Montpellier 1, 1997. http://www.theses.fr/1997MON11097.
Full text
2
Lemdani, Kathia. "Optimisation de la réponse immune après traitement locorégional de tumeurs colorectales murines." Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2018. http://www.theses.fr/2018SACLS374.
Full textAbstract:
Les métastases hépatiques compliquent l'évolution de 50% des cancers colorectaux (CCR). Plus de la moitié des patients présentent une récidive à distance avec métastases occultes pour lesquelles une chirurgie peut être réalisée dans moins de 20% des cas. L'ablation par radiofréquence (RFA) induit une réponse lymphocytaire T qui n'est pas évaluée après une intervention chirurgicale seule. L'immunothérapie combinée à la RFA pourrait potentialiser cet effet conduisant à une réponse tumorale à distance. Nous proposons une approche qui combine la RFA avec hydrogel thermoreversible libérant des agents immunomodulateurs (GMCSF et BCG) sur le site du traitementPremièrement, nous nous sommes intéressés à la sélection et à la caractérisation de la formulation optimale d’hydrogel par des techniques physicochimiques. Les propriétés de l'hydrogel ont été étudiées par rhéologie et des tests de muco-adhésion ont été mis en place. Le temps de résidence de l'hydrogel et de la protéine dans la zone tumorale a été démontré par imagerie optique. De plus, la cinétique de libération et l'intégrité du GMCSF encapsulé ont été déterminées. Ensuite, nous avons démontré l’efficacité de l’association de la RFA avec le dépôt local de l’hydrogel immunomodulatuer sur un modèle murin de cancer colorectal. En effet, nous avons observé une survie améliorée des animaux et régression complète des tumeurs distantes chez les animaux traités par la combinaison complète. Cette réponse est caractérisée par un niveau élevé de sécrétion de cytokines pro-inflammatoires par les cellules T CD4 et TCD8 et une augmentation de l’infiltrat lymphocytaire dans les tumeurs. Ceci a permis d'envisager une association avec l'immunothérapie anti-PD1 dans le traitement de macrométastases échappant au traitement combiné RFA avec l’hydrogel immunomodulateur. En effet, l’immunothérapie dans le traitement du cancer colorectal métastatique présente une efficacité limitée chez les patients. Notre travail propose a démontré que l’efficacité de l’immunomodulation locale dans l’amélioration des réponses immunitaires dans le cancer colorectal. Ces résultats permettent de reconsidérer l’utilisation de l’immunothérapie chez les patients atteints de CCR métastatique non MSI<br>Liver metastases complicate the progression of 50% of colorectal cancers (CRC). More than half of the patients have recurrent remissions with occult metastases for which surgery can be performed in less than 20% of cases. Radiofrequency ablation (RFA) induces a T lymphocyte response that is not observed after surgery alone. Combined immunotherapy with RFA may potentiate this effect leading to a distant tumor response. We propose an approach that combines RFA with thermoreversible hydrogel releasing immunomodulatory agents (GMCSF and BCG) at the treatment site.First, we focused on the selection and characterization of the optimal hydrogel formulation by physicochemical techniques. The properties of the hydrogel were studied by rheology and mucoadhesion tests were set up. The residence time of the hydrogel and the protein in the tumor zone was demonstrated by optical imaging. In addition, the release kinetics and integrity of the encapsulated GMCSF were determined. Then, we demonstrated the effectiveness of the combination of RFA with the local deposition of the immunomodulatory hydrogel on a mouse model of colorectal cancer. Indeed, we observed improved survival of animals and complete regression of distant tumors the complete treatment group. This response is characterized by a high level of pro-inflammatory cytokine secreted by CD4 and TCD8 T cells and an increase Lymphocytes infiltrating tumors. The immune escape of large lesions was reversed by association with anti-PD1 immunotherapy Indeed, immunotherapy in the treatment of metastatic colorectal cancer has limited efficacy in patients. Our work has demonstrated the effectiveness of local immunomodulation in improving immune responses in colorectal cancer. These results make it possible to reconsider the use of immunotherapy in patients with non-MSI metastatic CRC
3
Lüscher, Débora. "Étude des lymphocytes T infiltrant le tissu tumoral." Master's thesis, Université Laval, 2006. http://hdl.handle.net/20.500.11794/19414.
Full text
4
PATU, Vasco José Ramos Malta. "Imunohistoquímica e análise digital de imagens no carcinoma ductal infiltrante." Universidade Federal de Pernambuco, 2008. https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1513.
Full textAbstract:
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:50:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2
arquivo1551_1.pdf: 607060 bytes, checksum: 9365a784f9805c77a231eed4824f5685 (MD5)
license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5)
Previous issue date: 2008<br>Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco<br>A imuno-histoquímica é uma técnica de grande ajuda no diagnóstico de
doenças da mama, incluindo os tumores. De igual importância, a análise digital
de imagens vem sendo cada vez mais utilizada em estudos de alterações na
mama. O presente estudo teve como objetivo quantificar morfometricamente a
expressão do anticorpo através da imuno-histoquímica em tecidos de mama
normal e o carcinoma ductal infiltrante e compará-los com a histoquímica com
as lectinas Concanavalina A (Con A) e a Peanut agglutinin (PNA), todas
conjugadas a peroxidase. Fragmentos cirúrgicos de tecido mamário com CDI (n
= 25) foram fixados em formalina, submetidos à rotina histológica e embebidos
em parafina. Foram feitos cortes histológicos (4μm) montados em lâminas e
corados com hematoxilina e eosina (HE) para confirmar o diagnóstico. As
amostras teciduais selecionadas foram incubadas com anticorpo monoclonal
anti-vimentina por uma hora em temperatura ambiente (37ºC) e então
incubadas com um anticorpo secundário. A revelação foi realizada após
incubação com diaminobenzidina (DAB) e peróxido de hidrogênio. Os tecidos
serão desparafinizados em xilol e hidratados em álcool (70%-100%). As
lâminas foram megulhadas (10 min) em 10 mM de tampão fosfato(PBS) e
H2O2. Os cortes foram contracorados com hematoxilina e eosina rápida e
analisados em microscópio óptico. Para controle, as ligações das lectinas
foram inibidas utilizando-se methyl-α-D-manosídeo para Con A e D-galactose
para PNA (sigma USA). Nas 25 amostras de carcinoma ductal infiltrante foi
observada a marcação de 42% dos casos para vimentina e nesses casos foi
observado um aumento na marcação de PNA e diminuição da marcação com
Con A. Já no restante das amostras (58%) não houve marcação para vimentina
e os padrões de Con A e PNA foram invertidos em relação aos vimentina
positivos. Os diferentes perfis de expressão da vimentina oferecem um ótimo
suporte quantitativo para a investigação de células neoplásicas de mama
5
TESSIER, MARIE-HELENE. "Immunotherapie des melanomes metastatiques par til (lymphocytes infiltrant la tumeur) : a propos de six cas." Nantes, 1993. http://www.theses.fr/1993NANT266M.
Full text
6
Platonova, Sophia. "Caractérisation phénotypique et fonctionnelle des cellules Natural Killer infiltrant les tumeurs pulmonaires." Paris 6, 2011. http://www.theses.fr/2011PA066561.
Full textAbstract:
Les cellules Natural Killer (NK) ont été identifiées pour leur capacité à tuer les cellules tumorales in vitro. A ce jour, les caractéristiques fonctionnelles des cellules NK dans le microenvironnement tumoral chez l’homme sont assez peu connues. Nous avons montré que les cellules NK infiltrant les carcinomes pulmonaires non à petites cellules (NSCLC) présentent une capacité de dégranulation altérée, associée à la diminution d’expression d’un cluster de récepteurs activateurs composé de NKp30, NKp80, DNAM1 et CD16, contrairement aux cellules NK présentes dans le tissu pulmonaire non tumoral et dans le sang du même patient qui présente un profil d'expression similaire aux cellules NK du sang d'individuss sains. L'analyse de l'expression des ligands par les cellules tumorales a montré une expression hétérogène des ligands des récepteurs activateurs ou inhibiteurs. Ces résultats suggèrent une inhibition des cellules NK dans le microenvironnement tumoral
7
Djenidi, Brahim Fayçal. "Caractérisation moléculaire et fonctionnelle des lymphocytes T CD8+/CD103+ infiltrant les tumeurs pulmonaires humaines." Thesis, Paris 11, 2014. http://www.theses.fr/2014PA11T044/document.
Full textAbstract:
L’immunothérapie se présente aujourd’hui comme une alternative de choix dans le traitement des cancers. Son objectif est d’amplifier la réponse immunitaire contre les cellules tumorales tout en préservant les cellules normales. Les travaux antérieurs de mon équipe ont démontré qu'une réponse immunitaire antitumorale a lieu dans les carcinomes bronchiques non à petites cellules (CBNPC) et que des lymphocytes T cytotoxiques (CTL) spécifiques peuvent contribuer à la régression de la tumeur. Les travaux de mon équipe ont démontré aussi que l’interaction de l’intégrine CD103, souvent exprimée sur les lymphocytes infiltrant la tumeur (TIL), avec son ligand, le marqueur des cellules épithéliales E-Cadhérine, à la surface des cellules tumorales, est nécessaire à la polarisation des granules cytotoxiques et leur exocytose pour déclencher la lyse de la cellule cible. L’objectif principal de mon projet de thèse est de déterminer la contribution réelle des lymphocytes T CD8+/CD103+ infiltrant les tumeurs épithéliales dans la réponse CTL antitumorale et le rôle de CD103 dans la régulation de leurs fonctions effectrices in situ. Dans un premier temps, j’ai caractérisé, sur le plan transcriptionel et phénotypique, les TIL de CBNPC humains. Mes résultats ont montré que les lymphocytes T CD8+/CD103+ présentent une signature moléculaire caractéristique des cellules T mémoires résidentes dans les tissues (TRM), avec une expression des récepteurs CD69 et CD45RO. Mes résultats ont montré aussi que cette population lymphocytaire co-Exprime les récepteurs inhibiteurs PD-1 et Tim-3. Dans un deuxième temps, j’ai étudié la fonctionnalité des TIL CD8+/CD103+ et le rôle de CD103 dans leur activité cytotoxique anti-Tumorale. Mes résultats ont d’abord indiqué que les lymphocytes T CD103+ sont plus sensibles à la mort cellulaire induite par activation (AICD) que les TIL CD103-, et qu’ils expriment le granzyme B et CD107a suite à une activation spécifique. De plus, ils sont capables d’exercer une activité cytotoxique spécifique à l’encontre des cellules tumorales autologues suite à la neutralisation de l’interaction de PD-1 avec son PD-L1, et que des anticorps anti-CD103 bloquants inhibe cette fonction. Ensuite, j’ai analysé l’impact de l’expression de CD103 à la surface des TIL sur la survie de patients atteints de CBNPC de stade 1. Mes résultats ont révélé que cette intégrine favorise l’infiltration des TIL dans les régions tumorales épithéliales et qu’une forte expression de CD103 sur les TIL corrèle avec une amélioration de la survie des patients. Enfin, J’ai examiné le rôle de CD103 dans cette fonction et dans la réponse immunitaire antitumorale in vivo. Mes résultats préliminaires ont montré une croissance tumorale retardée des tumeurs LL2 transfectées avec l’E-Cadhérine et CCL5 greffées dans les souris CD103-WT. De plus l’inhibition de cette croissance corrèle avec une infiltration plus importante des tumeurs avec des lymphocytes T CD8+/CD103+. Ces résultats suggèrent un rôle important de la coexpression de CCL5 et d’E-Cadhérine par la tumeur dans le recrutement et la rétention des CTL au site tumoral. L’ensemble de ces travaux est en faveur du rôle important de CD103 dans la régulation de l’immunité T CD8 dans les tumeurs épithéliales et de l’utilité des anticorps neutralisants anti-PD-1 et anti-Tim-3 pour inverser l'épuisement de cette population lymphocytaires CD8+/CD103+<br>Today Immunotherapy is clearly an alternative choice in the treatment of cancers. Its main objective is to enhance the cytotoxic immune response against tumor cells while preserving normal cells. We have previously demonstrated that there is an antitumor immune response in the Non-Small-Cell lung carcinoma (NSCLC) and cytotoxic T lymphocytes (CTL) contribute to NSCLC tumor regression. We further showed that the CD103 integrin interaction (oftenly expressed on tumor infiltrating lymphocytes (TIL)) with its ligand, the epithelial cell marker E-Cadherin, expressed at the surface of tumor cells, is necessary for the polarization and exocytosis of TIL cytotoxic granules and to trigger the lysis of the tumor target cells. The main purpose of my thesis project is to determine the actual role/ contribution of CD8+/CD103+ T lymphocytes (infiltrating the epithelial tumors) in the regulation of antitumor CTL response and to study the role of CD103 in the regulation of their in situ effector functions. Firstly, TIL infiltrating human NSCLC were characterized at transcriptional and phenotypic level. My results show that CD8+/CD103+ T lymphocytes have a molecular signature characteristic of memory T cells resident in tissues (MRT), with expression of CD69 receptors and CD45RO. My results also showed that this cell population co-Expresses the inhibitory receptors, PD-1 and Tim-3.In a second step, I studied the functionality of CD8+/CD103+ TIL and the role of CD103 in the regulation of anti-Tumor cytotoxic activity. My results have first indicated that CD103+ TIL are more sensitive to activation induced cell death (AICD) than TIL-CD103- and CD103+ TIL express granzyme B and CD107a after specific activation. Furthermore, CD103+ TIL are able to exert a specific cytotoxic activity against autologous tumor cells following the neutralization of PD-1- PD-L1 interaction, and that of anti-CD103 antibody inhibits this blocking function. After, I analyzed the impact of the expression of CD103 on the surface of TIL on the survival of patients with NSCLC stage 1. My results revealed that this integrin promotes the infiltration of TIL in epithelial tumor regions and a strong expression of CD103 on TIL correlates with improved patient survival. Finally, I examined the role of CD103 in this function and the antitumor immune response in vivo. My preliminary results showed a tumor growth delay of LL2 tumors transfected with E-Cadherin and CCL5 grafted in CD103-WT mice. Furthermore inhibition of growth correlates with a higher tumor infiltrating with CD8+/CD103+ T lymphocytes. These results suggest an important role of the coexpression of CCL5 and E-Cadherin by the tumor in the recruitment and retention of CTL at the tumor site. The whole work supports the role of CD103 in regulating the CD8 T cells-Mediated immune response in epithelial tumors and the usefulness of anti-PD-1 neutralizing and anti-Tim-3 for reversing the depletion of this lymphocyte population CD8+ / CD103+
8
Guerra, Nadia. "Altération de la réponse cytotoxique des lymphocytes infiltrant les tumeurs rénales : implication des récepteurs NK inhibiteurs." Paris 6, 2002. http://www.theses.fr/2002PA066166.
Full text
9
Khou, Sokchea. "Contribution des neutrophiles infiltrant les tumeurs dans la progression des carcinomes épidermoïdes cutanés : neutrophiles et cancer." Electronic Thesis or Diss., Université Côte d'Azur (ComUE), 2019. http://theses.univ-cotedazur.fr/2019AZUR4014.
Full textAbstract:
Les carcinomes cutanés constituent les cancers les plus fréquents chez l’homme et leur incidence est en constante croissance. Il en existe deux principaux types : les carcinomes baso-cellulaires et les carcinomes épidermoïdes. Les facteurs de risque sont principalement l’exposition aux rayons UV et l’immunosuppression. Ils sont traités par chirurgie ou par radiothérapie mais peuvent parfois évoluer vers des formes incurables. De nouvelles alternatives thérapeutiques sont donc nécessaires. L’immunothérapie est une récente révolution dans le traitement des cancers qui vise à réactiver l’immunité des patients cancéreux. Les carcinomes cutanés pourraient en bénéficier car ils se développent lors de situations d’immunosuppression. L’immunosurveillance implique à la fois les cellules immunitaires et le microenvironnement tumoral comme le stroma. Lorsque les réponses anti-tumorales, notamment médiées par les lymphocytes T CD8+ sont efficaces, on parle de phase d’élimination. Puis vient une phase d’équilibre où la tumeur reste stable et enfin, lors de la phase finale d’échappement, des mécanismes d’immunosuppression permettent à la tumeur de croître. Les neutrophiles, des cellules immunitaires de type myéloïde, sont recrutées très rapidement aux sites d’inflammation et au sein des cancers. Une méta-analyse récente sur 39 types de cancers humains a pu associer ces cellules aux plus mauvais pronostiques cliniques. Elles sont impliquées dans des fonctions anti-tumorales et pro-tumorales. Cette polarisation semble induite respectivement par l’interféron de type I et le TGF-β. Leur rôle lors de cancers et en particulier dans les carcinomes cutanés reste encore largement incompris. Notre objectif a été de caractériser les fonctions des neutrophiles et leur contribution au développement des carcinomes épidermoïdes. Pour cela, nous avons utilisé premièrement, un modèle de carcinogénèse cutanée chimio-induite. La tumorigénèse est séquentielle et donc très représentative du carcinome cutané chez l’homme. Dans ce modèle, nous observons une infiltration massive des neutrophiles au stade précancéreux et cancéreux. Une analyse de l’expression génique des neutrophiles isolés des lésions précancéreuses et cancéreuses et des peaux environnant ces lésions a été réalisée, qui montre une signature génique spécifique des neutrophiles des lésions, comparée aux peaux environnantes. Des comparaisons d’expression génique différentielle illustrent que les neutrophiles des lésions possèdent des fonctions pro-tumorales comparés aux neutrophiles des peaux.Deuxièmement, nous avons mis en place un modèle de greffe intradermique d’une lignée de carcinome épidermoïde. Une déplétion spécifique des neutrophiles retarde significativement la croissance tumorale, ce qui confirme le caractère pro-tumoral des neutrophiles. Nous avons caractérisé les mécanismes mis en jeu, qui incluent la génération de ROS et iNOS favorisant la croissance tumorale et une suppression de l’activation et de la prolifération des lymphocytes T CD8+ anti-tumoraux. Les neutrophiles produisent de l’arginase 1 qui dégrade l’arginine et inhibe la prolifération des lymphocytes T. Par ailleurs, l’environnement tumoral induit l’expression de PD-L1 en surface des neutrophiles et de PD1 en surface des lymphocytes T CD8+ et CD4+. Ceci suggère que l’interaction PD-L1/PD1 contribue à l’immunosuppression. De plus, une corrélation positive et significative a été observée entre la taille des tumeurs et la fréquence des neutrophiles exprimant PD-L1 au sein de ces tumeurs. Au vu de ces résultats, il semble intéressant d’évaluer les immunothérapies bloquant l’interaction PD-L1/PD1 dans le traitement des carcinomes cutanés. Ces traitements pourraient être combinés avec ceux qui bloquent le recrutement ou les fonctions des neutrophiles. Il reste à évaluer si la fréquence de neutrophiles exprimant PD-L1 peut être un bon marqueur de prédiction de la réponse aux immunothérapies anti-PD-L1 ou anti-PD1<br>Non-melanoma skin carcinomas are the most frequent cancers in Human and their incidence is constantly increasing. Two main types exist: the cutaneous basal cell carcinoma (cBCC) and the cutaneous squamous cell carcinomas (cSCC). Risk factors include sun radiation and immunosuppression. These cancers are mainly treated with surgery and radiotherapy but they can reach an incurable stage. For this reason, novel therapeutic alternatives are needed. At present, immunotherapies constitute a revolution in the treatment of cancers. Its mechanism of action relies on the stimulation of the immune system of cancer patients, so that they develop efficient anti-tumoral immune responses. cSCC may benefit from this type of treatment as they generally develop in the context of an immunosuppression. Immune surveillance involves both immune cells and the tumor microenvironment, in particular the stroma. During the elimination phase, the anti-tumoral responses, mediated mainly by CD8+ T lymphocytes, are efficient. Then, there is an equilibrium phase in which the tumor is stable before the escape phase, when the tumor can evade immune surveillance and grow. Our research interest focused on neutrophils, a subset of myeloid cells that are very rapidly recruited to the sites of inflammation and inside tumors. A recent meta-analysis of 39 human malignancies showed that neutrophils are associated with the worst clinical outcome. Neutrophils harbor both anti- and pro-tumoral functions. This polarization seems to be dependent on type I interferon and TGF-β, respectively. It remains to establish the exact role played by neutrophils in cancer and specifically in skin carcinomas. The aim of our research was to further characterize the functions and the contribution of neutrophils to the development of cutaneous squamous cell carcinomas. We first used a chemically-induced skin carcinoma mouse model that recapitulates the different stages of skin carcinoma development in Human. In this model, we saw a massive infiltration of neutrophils at the precancerous and cancerous stages. We performed transcriptomic analysis of highly purified neutrophil populations from precancerous, cancerous lesions and from the surrounding skin controls. These data revealed a specific gene signature in neutrophils from lesions compared to surrounding skins. Differential gene expression analysis identified a pro-tumoral phenotype for neutrophils infiltrating lesions compared to skins. In a second approach, we studied the growth of a cSCC cell line grafted in the dermis of mice. Specific depletion of neutrophils significantly delayed tumor growth, thus indicating that neutrophils were pro-tumoral. Mechanisms of action included the production of ROS and NO that favor tumor growth and the immune suppression of anti-tumoral responses mediated by tumor-associated CD8+ T cells. In the tumor, neutrophils produced arginase 1 which catalyzes the degradation of arginine, thus inhibiting the proliferation of CD8+ T cells. In addition, we found that the tumor microenvironment induced PD-L1 expression at the cell surface of neutrophils and concomitantly, PD1 on CD8+ and CD4+ T cells. These results suggested that PD-L1/PD1 interaction triggers immune suppression and contributes to SCC progression. Indeed, a positive and significant correlation was observed between tumor size and frequencies of PD-L1-expressing neutrophils inside tumors. Collectively, these results suggest that it is relevant to assess immunotherapies that block PD-L1/PD1 interaction for the treatment for cSCC. These approaches could be combined with treatments that aim to block the recruitment or inhibit neutrophils. Moreover, it remains to evaluate whether the frequency of PD-L1-expressing neutrophils could constitute a good predictive marker of the response to anti-PD-L1 and anti-PD1 immunotherapies
10
Claret, Emmanuel. "Profil de sécrétion cytokinique de clones T dérivés des lymphocytes T activés infiltrant la tumeur dans les lymphomes malins." Grenoble 1, 1992. http://www.theses.fr/1992GRE10115.
Full textAbstract:
Plusieurs observations indiquent que les lymphocytes t infiltrant les ganglions envahis par un lymphome malin non hodgkinien b (lmnh b) ou la maladie de hodgkin (mh), sont impliques dans le processus tumoral. Afin de caracteriser les proprietes fonctionnelles de ces lymphocytes, nous avons etudie leur profil de secretion cytokinique au niveau clonal. Comme reference, des clones t ont ete obtenus a partir de situations non malignes (ganglions hyperplasiques benins (hb), sang peripherique de donneurs sains (sp)). Nous avons etudie 347 clones t (116 derives de lmnh b, 98 de mh, 95 d'hb et 38 de sp). Si la capacite de production d'il4 est restreinte a un nombre reduit de clones (37), la quasi totalite des clones etudies secrete les autres cytokines dosees. Cependant, il existe une tres grande variabilite de capacite secretrice d'un clone a l'autre. De cette diversite emergent deux groupes de clones: une population de clones produisant de faibles niveaux de cytokines que l'on retrouve dans toutes les situations malignes ou non et une population produisant de forts niveaux d'une ou plusieurs cytokines, que l'on retrouve principalement dans les ganglions malins. Dans les ganglions atteints de mh, ces clones ont une capacite de production d'il2 decrue. De part leur profil de secretion, l'on peut penser que ces lymphocytes ont un role in vivo sur le comportement de la tumeur, et particulierement dans la formation du granulome observe dans certains ganglions malins
11
Bilonda, Mutala Linda. "Rôle de l'inflammasome des cellules tumorales dans l'immunosurveillance des cancers colorectaux par les lymphocytes T infiltrant la tumeur ( TILs)." Thesis, Nantes, 2020. https://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show/show?id=2015e92e-880a-484a-ad2c-4101868976d8.
Full textAbstract:
Dans les cancers colorectaux (CCR), les interactions entre cellules tumorales et lymphocytes T infiltrant la tumeur (TILs) jouent un rôle majeur, étant donné l’impact pronostique des TILs et d’une signature transcriptomique Th1/Tc1. La présence de points de contrôle immunitaire capables de contrecarrer cette réponse Th1/Tc1 anti-tumorale dans les tumeurs solides a été à l’origine du développement de l’immunothérapie, qui, bien que prometteuse dans les CCR, n’est efficace que dans un sous-groupe minoritaire de patients ayant une instabilité microsatellitaire (MSI). D’où la nécessité de développer des biomarqueurs, facilement utilisables en routine clinique, prédictifs d’une réponse Th1/Tc1 et de la réponse aux immunothérapies, et de déterminer des voies de signalisation susceptibles de réactiver une réponse immunitaire déficiente. Un candidat potentiel est l’inflammasome, plateforme de l’immunité innée dont la protéine effectrice est la caspase-1, qui peut maturer l’IL-18 et générer une réponse Th1/Tc1/IFNƴ. Bien que l’inflammasome ait un rôle émergent en immuno-oncologie, son statut et son rôle modulateur de la réponse Th1/Tc1 n’est pas connue dans les CCR. Notre étude est basée sur l’exploitation de cohortes de CCR rétrospective et prospective, en collaboration avec les Cliniciens du CHU de Nantes, ainsi que sur un modèle ex vivo de cultures d’explants de CCR que nous avons développé, couplé à des analyses multiparamétriques. Nous montrons que le facteur de transcription Tbet est un biomarqueur 1) pronostique et prédictif d’une réponse Th1/Tc1/IFNƴ préexistante dans les CCR, facilement analysable en routine clinique et 2) prédictif de la réponse aux immunothérapies, tout au moins dans le modèle de culture d’explants. Cette réponse Th1/Tc1 est modulée par l’axe caspase-1/IL-18 de l’inflammasome, qui est présent dans les cellules tumorales de la majorité des CCR. De plus, nous identifions trois sous-groupes de CCR en fonction de l’axe caspase-1/IL-18/TILs Tbet+/IFNƴ et du statut microsatellitaire, dont l’impact pronostique sera évalué. Nos résultats suggèrent que les cellules tumorales des CCR sont des cellules de l’immunité innée, capables de moduler la réponse Th1/Tc1 des TILs via l’axe caspase-1/IL-18 de leur inflammasome. Cet axe pourrait être une cible thérapeutique potentielle pour améliorer la réponse Th1/Tc1 dans les CCR<br>In colorectal cancer (CRC), interactions between tumor cells and tumor infiltrating T lymphocytes (TILs) play a major role, given the favorable prognostic impact of a high TILs density and an upregulated Th1/Tc1 gene signature in subtypes of CRC. This Th1/Tc1 response can be counterbalanced by the presence of immune checkpoints whose characterization led to the development of novel immunotherapeutic strategies that revolutionized cancer treatment in some solid tumors. In CRC however, immune checkpoint inhibitors led to objective and durable response only in a minority of CRC with microsatellite instability (MSI). There is a need for biomarkers that can be easily assessed in situ and predictive of a Th1/Tc1 response and of the response to immunotherapies, as well as for signaling pathways able to reactivate a deficient anti-tumor immune response. A candidate can be the inflammasome, an innate immunity platform whose effector protein, caspase-1, can mature IL-18 and lead to the generation of a Th1/Tc1/IFNƴ response. The inflammasome is an emerging central player in cancer immunology and immunotherapy; however, its status and role in modulating a Th1/Tc1 response in CRC is so far unknown. Our study was based on retrospective and prospective cohorts of CRC patients, in close collaboration with the Clinicians of Nantes University Hospital, and on an ex vivo explant culture model of CRC we developed, coupled to multiparametric analyses. We demonstrated that the transcription factor Tbet that can be easily assessed in situ, is a prognostic biomarker in CRC, predictive of a pre-existing Th1/Tc1 response and also predictive of the response to immunotherapies, at least in the explant culture model. The Th1/Tc1/IFNƴ response of TILs can be facilitated by the caspase-1/IL-18 axis present in the tumor cells of the majority of CRC. In addition, we identified clusters of patients according to the caspase-1/IL-18/ Tbet+ TILs /IFNƴaxis and microsatellite status of CRC, whose prognostic impact will be assessed. Thus, CRC tumor cells can be considered as innate immune cells that display a functional caspase-1/IL-18 axis, part of the inflammasome pathway, able to modulate an adaptive Th1/Tc1 anti-tumor response in subgroups of CRC patients. Targeting this axis would be a promising strategy to boost the Th1/Tc1 response in CRC
12
Corvaisier, Murielle. "Caractérisation de lymphocytes infiltrant les tumeurs coliques et implication du récepteur CD94/NKG2A dans l'immunité anti-tumorale." Nantes, 2006. http://www.theses.fr/2006NANT2043.
Full textAbstract:
Dans la perspective de développer des immunothérapies, j'ai étudié les lymphocytes T infiltrants les tumeurs coliques, en particulier 2 clones T, γ9. 2 et. β, spécifiques de la lignée tumorale autologue. J'ai montré: 1/ que le clone γ92 tue spontanément une majorité de lignées tumorales coliques, de façon TCR, LFA-3 et NKG2D dépendante et que tous les lymphocytes γ92 partagent cette propriété, suggérant l'intérêt de ces cellules en immunothérapie et 2/ que le clone. β co-exprime CD8β CD4 et sécrète un panel de cytokines potentiellement régulateur (TNF, IL-2, IL-4, TGF). Parallèlement, j'ai étudié le rôle de HLA-E, ligand du récepteur CD94/NKG2A, dans la réponse anti-mélanome. J'ai montré 1/ que HLA-E est exprimé par les mélanocytes et les mélanomes primaires mais est perdu ou fortement diminué dans les mélanomes métastatiques et 2/ la production, par les mélanocytes et les mélanomes métastatiques, d'une forme soluble de HLA-E, augmentée par l'IFN, mais dont le rôle est inconnu<br>With the perspective to develop immunotherapies of colorectal cancer, I studied the lymphocyte infiltrate (TIL) of these tumors, especially the phenotype and function of 2 clones: a 92 and an , specific for the autologous tumor cell line. I showed that : 1/ the 92 clone killed spontaneously the majority of colon carcinoma cell lines in a TCR- LFA-3- and NKG2D-dependant manner; 2/ all the 92 T cells shared this property, suggesting their interest for immunotherapy; 3/ the clone co-expressed CD8 and CD4 and secreted an array of cytokine of potential regulatory function (TGF-, IL-4, IL-2, TNF-). I also studied the role of HLA-E, the CD94/NKG2A receptor ligand, in the anti melanoma response. I showed that 1/ HLA-E is expressed in vivo by melanocytes and most primary melanoma tumor cells but fe metastatic ones; 2/ melanocytes and melanoma cell lines spontaneously shed a soluble form of HLA-E undescribed so far, of unknown function and upregulated by IFN-γ
13
Eisenberg, Ana Lucia Amaral. "Sobrevida de cinco anos para pacientes com carcinoma ductal infiltrante de mama sem comprometimento de linfonodos axilares: coorte hospitalar, 1992-1996." Rio de Janeiro : [s.n.], 2004. http://teses.cict.fiocruz.br/pdf/eisenberalad.pdf.
Full text
14
Dorothée, Guillaume. "Potentialisation de l'activité cytotoxique des lymphocytes T infiltrant les tumeurs : manipulation des voies de lyse Fas/FasL et TRAIL/TRAILR." Paris 6, 2003. http://www.theses.fr/2003PA066099.
Full text
15
Benlalam, Houssem. "Épitopes antigéniques reconnus par les lymphocytes CD8+ infiltrant les tumeurs (TIL) de mélanome : fréquence de reconnaissance et identification de nouveaux complexes HLA/Peptide." Nantes, 2002. http://www.theses.fr/2002NANT2083.
Full textAbstract:
Nous avons étudié la capacité de 59 populations de lymphocytes infiltrant des mélanomes (TIL) à reconnaître 28 antigènes de ces tumeurs en association avec 31 contextes HLA. Les résultats montrent que 39 % des TIL reconnaissent au moins l'un des 28 antigènes étudiés et que la majorité de ces populations (19/59) reconnaissent des antigènes de différenciation mélanocytaire dans 11 contextes HLA différents. Seulement 10 populations de TIL reconnaissent des antigènes spécifiques de tumeurs dans 8 contextes HLA distincts. Cette étude montre l'existence de 21 nouveaux épitopes d'antigènes de mélanomes. . .
16
Kaewkangsadan, Viriya. "Evaluation of immune cell infiltrates and expression of cytokines/biological molecules in the microenvironment of tumours and tumour-draining axillary lymph nodes in patients with large and locally advanced breast cancers undergoing neoadjuvant chemotherapy : crucial contribution to immune-mediated tumour cell death." Thesis, University of Nottingham, 2016. http://eprints.nottingham.ac.uk/34155/.
Full textAbstract:
Background: Neoadjuvant chemotherapy (NAC) is being used as first line treatment in women with large and locally advanced breast cancers (LLABCs). However, the response to NAC is difficult to predict. Growing evidence suggests that these patients are immunosuppressed and that circulating immunosuppressive regulatory cells and humoral factors affect the response to NAC. We explored the possible role of the in situ tumour immune milieu in inducing and affecting the responses to NAC, and the contribution of concomitant systemic circulating regulatory cells. Methods: Paraffin-embedded breast cancers and ipsilateral axillary lymph nodes (ALNs) from pre- and post-NAC samples of a cohort of 33 women with LLABCs, 16 of whom had their blood regulatory cells previously investigated. Various immune cell infiltrations and expression of cytokines/biological molecules in the specimens were studied using appropriate monoclonal antibodies and immunohistochemistry. Statistical analysis was carried out using non-parametric tests with SPSS version 21. Results: High levels of pre-NAC tumour-infiltrating lymphocytes (TILs) (p < 0.001) and subsets of CD4⁺T cells (intratumoural, p=0.023; peritumoural, p=0.001), CD8+T cells (intratumoural, p=0.008; peritumoural, p=0.002) and CD56⁺NK cells (intratumoural, p=0.001; peritumoural, p < 0.001) were significantly associated with a pathological complete response (pCR). High levels of CD163⁺macrophages were also significantly associated with a good pathological response (p=0.004) and pCR (p=0.008). There was a positive correlation between the CD8:FOXP3 ratio and grade of pathological response. In multivariate analyses, TILs and peritumoural CD56+NK cells were found to be independent predictive factors for pCR. There was a significantly high expression of IL-10 in post-NAC breast specimens with poor responses to NAC (p < 0.001). NAC significantly reduced infiltrating T regulatory cells (Tregs) (p=0.001) and PD1⁺T cells (p=0.005), as well as expression of IL-4 (p=0.016). There was no significant difference between the percentages (%) of immune cells present in ALNs with or without metastases but there was a T helper-2 cytokine polarisation in metastatic ALNs. Metastatic ALNs with a high % of CD8+T cells (p=0.048) and low % of FOXP3+Tregs (p=0.019) were significantly associated with an ALN pCR. There was a significantly positive correlation between circulating and intratumoural infiltrating Tregs following NAC (p=0.003). Conclusions: The tumour immune microenvironment is a key factor in achieving a good pathological response with NAC. Tumour and blood immune parameters may be clinically useful in identifying women with LLABCs likely to respond to NAC. Our findings also suggest that the beneficial effects of NAC are mediated via modulation of anticancer immunity, in particular by reduction of T regulatory cells and immunosuppressive humoral factors.
17
Derré, Laurent. "Rôle du récepteur CD94/NKG2-A dans la réponse T anti-tumorale et recherche d'antigènes reconnus par les lymphocytes T CD8+ infiltrant les tumeurs du sein." Nantes, 2003. http://www.theses.fr/2003NANT2062.
Full textAbstract:
La première partie porte sur le rôle du récepteur inhibiteur CD94/NKG2-A dans la réponse T anti-tumorale. Les résultats montrent que 1) l'IL-12 induit l'expression de ce récepteur à la surface des lymphocytes T CD8+, 2) la plupart des lignées de mélanome exprime le ligand de ce récepteur : la molécule HLA-E, à différents niveaux, 3) l'expression de HLA-E est augmentée par l'IFN-g. De plus, nous avons observé l'existence d'une balance entre le signal d'activation dépendant du TCR et le signal d'inhibition médié par l'interaction CD94/NKG2-A/HLA-E. Ces résultats suggèrent que le récepteur CD94/NKG2-A et la molécule HLA-E, dont l'expression est régulée par différents facteurs, participeraient au phénomène d'échappement tumoral. Dans une deuxième partie, nous avons recherché la présence de lymphocytes T CD8+ spécifiques d'antigènes de tumeurs de sein parmi les TIL (Tumor Infiltrating Lymphocytes). Sur les 34 populations de TIL testés contre 48 antigènes de cancer du sein, quatre répondent aux antigènes P53, GAGE-6 et LAGE-1a dans quatre contextes HLA-A, B, ou Cw différents. Nous recherchons à définir les épitopes reconnus, dont la caractérisation permettra de réaliser de nouveaux protocoles d'immunothérapies visant ces antigènes<br>In the first part, we have studies the role of the CD94/NKG2-A receptor in anti-tumoral T cell response The results show that 1) IL-12 induce the expression of this receptor in CD8 T cell, 2) the ligand of this NKR : HLA-E is expressed, although at different levels, by human melanoma cell lines, 3) IFN-gamma-treatment up-regulates this expression. We further show that inhibition of the response of melanoma antigen specific T cell clones was correlated with the density of HLA-E on melanoma cells and the density of CD94/NKG2-A on the CTL, but inversely correlated with the strength of the TCR-dependant. In the second part, 34 tumor infiltrating lymphocytes (TIL) cultures established from breast tumor or invaded lymph nodes were screened for recognition of 48 breast associated antigens. Four TIL lines reacted to three antigens (P53, GAGE-6 and LAGE-1a) in association with four differents HLA molecules. The caraterisation of this new epitopes could lead to realise new immunotherapy protocols for breast cancer patients targeting this antigens
18
Dercamp, Christophe. "Immunothérapie du cancer par activation des cellules dendritiques infiltrant les tumeurs via l'engagement du récepteur anti-microbien TLR9 : mécanismes inhibiteurs : interleukine-10 et lymphocytes T régulateurs." Lyon 1, 2005. http://www.theses.fr/2005LYO10058.
Full textAbstract:
La réponse immunitaire contre les agents infectieux met en jeu les cellules dendritiques (CD) activées via des récepteurs de structures microbiennes tels que les Toll-like (TLR). Les tumeurs expriment des antigènes spécifiques de lymphocytes T (LT) CD8 cytotoxiques et sont infiltrées par des CD (TIDC) pouvant potentiellement déclencher une réponse anti-tumorale après activation par des ligands de TLR. Cependant, des mécanismes permettent à la tumeur d'échapper au système immunitaire. L'IL-10 comme la présence de LT régulateurs (Treg) diminuent l'activation des LT CD8 par les TIDC. Par des mécanismes différents mais complémentaires, le blocage de l'IL-10 et la déplétion des Treg permettent la génération d'une réponse CD8 effectrice spécifique d'un antigène tumoral, inhibent l'induction de LT CD8+ suppresseurs, et se traduisent par l'éradication de tumeurs en réponse au ligand CpG de TLR9. Ces observations devraient permettre une meilleure utilisation des ligands de TLR en thérapie anti-cancéreuse
19
Vincent, Julie. "Rôles des cellules myéloïdes suppressives et des infiltrats immunitaires dans le cancer." Phd thesis, Université de Bourgogne, 2013. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00967901.
Full textAbstract:
Le système immunitaire joue un double rôle dans le cancer : il peut non seulement supprimer la croissance tumorale en détruisant les cellules cancéreuses, mais aussi promouvoir la progression de la tumeur en sélectionnant les cellules tumorales ou en créant un microenvironnement tumoral immunosuppresseur. Notre idée principale est de développer des stratégies pour mieux comprendre l'immunologie du cancer colique.Au cours de ma thèse, je me suis tout d'abord intéressée à une population du système immunitaire : les MDSC (Myeloïd Derived Suppressor Cells). Nous avons exploré des stratégies pour réduire le nombre de ces cellules au cours de la croissance tumorale. Nous avons pu découvrir que de petites doses de 5 fluorouracil sont capables d'induire spécifiquement une mort par apoptose des cellules myéloïdes suppressives. Nous avons ainsi caractérisé un effet immunologique positif nouveau du 5-fluorouracil. Cet effet immunologique contribue à l'effet antitumoral du 5-fluorouracil chez la souris. Dans une deuxième partie nous avons étudié le rôle pronostic des infiltrats immunitaires dans une série de patients présentant un cancer du côlon avec des métastases hépatiques. Nous avons étudié le rôle pronostic des infiltrats en cellules CD8, CD45R0 et Foxp3. Nous avons mis en évidence que la présence d'un fort infiltrat en cellules CD45RO et Foxp3 est un facteur de bon pronostic. L'association des 2 marqueurs permet de définir 3 groupes pronostics et ainsi d'individualiser un groupe de mauvais pronostic ne bénéficiant probablement pas de la chirurgie hépatique.
20
Shi, Zheng Isabelle. "Prolifération et capacité cytotoxique des lymphocytes T infiltrant les tumeurs induites par les cellules malignes autologues de lymphomes B : étude de 85 clones T issus de 9 patients." Université Joseph Fourier (Grenoble ; 1971-2015), 1994. http://www.theses.fr/1994GRE10215.
Full textAbstract:
Les til-t provenant de 20 lmnh b de type histologique/cytologique varies ont été étudiés et 174 clones t ont été générés dans 9 des cas. 4 groupes prolifératifs ont été identifiés sur la base de prolifération des til-t. Les pourcentages de clones proliférant dans ces 4 groupes sont respectivement de 63%, 70% et 56%, et 10%. Dans les lmnh de forte malignite, 25% (5/20) des clones t prolifèrent sous l'effet des bm alors que dans les lmnh de faible malignite, il y en a 55% (36/65) (p < 0,05). Il en est de même pour leurs capacités de dissémination : dans les lmnh localisés (stades i et ii), 70% (28/40) des clones t prolifèrent au contact des bm, alors que dans les lmnh disséminés (stades iii et iv), 29% (13/45) des clones t ont cette capacité. La différence apparaît encore plus significative (p < 0,01). Ces corrélations ne sont pas observées avec la stimulation par les cellules b normales autologues infectées par le virus epstein barr (b-ebv) ou les cellules b normales allogeniques (bn-allo). La réponse proliférative des clones t vis-à-vis des bm n'est pas corrélée à un phénotype préférentiel des clones t cd4 ou cd8. 46 clones t provenant de 8 ganglions malins ont été testés pour leur capacité cytotoxique contre les bm. Seuls 6 clones t ont exprimé cette propriété. La production de gm-csf, d'inf, de tnf et d'il4 sur 9 clones, et celle d'il2 sur 5 clones ont été détectées sous l'effet des bm. Des clones t sont capables de proliférer et/ou d'exprimer l'ag cd25 au contact des bm, avec une intensité proportionnelle à la quantité de cellules b utilisées. La prolifération et l'expression de l'ag cd25 des cellules t est liée à une structure membranaire des bm. 6 clones t sont incapables de proliférer au contact des b-ebv et des bn-allo, ce qui est très en faveur de l'existence d'un antigène stimulant propre aux bm. En utilisant la méthode des ac bloquants, nous avons démontré que des clones t prolifèrent au contact des bm selon deux mécanismes qui impliquent tous le tcr mais qui se différencient par l'intervention ou non du cmh des bm
21
Reyal, Fabien. "Analyse du profil d'expression par la technique des puces à ADN : Application à la caractérisation moléculaire et à la détermination du pronostic des cancers canalaires infiltrants du sein." Paris 11, 2009. http://www.theses.fr/2009PA11T018.
Full text
22
Marconnet, Louis Rigaud Jérôme. "Survie des tumeurs infiltrantes du pénis à risque d'envahissement ganglionnaire inguinal étude rétrospective sur 114 patients ayant eu un curage inguinal réalisé dans le service d'urologie du CHU de Nantes /." [S.l.] : [s.n.], 2009. http://castore.univ-nantes.fr/castore/GetOAIRef?idDoc=55516.
Full text
23
Bonneau, Claire. "Étude des mécanismes de récidive métastatique dans les cancers du sein luminaux de stade précoce : impact du microenvironnement tumoral Caractérisation moléculaire des cancers du sein en pratique clinique A subset of activated cancer associated fibroblasts is associated with distant relapse in early luminal breast cancers." Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2018. https://wo.app.u-paris.fr/cgi-bin/WebObjects/TheseWeb.woa/wa/show?t=2365&f=17162.
Full textAbstract:
Les cancers du sein de stade précoce constituent un enjeu de santé publique du fait de leur fréquence élevée (70% des nouveaux cas diagnostiqués). Parmi eux, les cancers luminaux (exprimant les récepteurs hormonaux sans surexpression de l’HER2) de stade T1N0, de moins de 2cm sans envahissement ganglionnaire, ont un pronostic spontanément favorable et font ainsi l’objet de peu d’études dédiées. Néanmoins certaines de ces patientes (5 à 10% à 10 ans) vont récidiver avec des métastases à distance et mourir. L’identification de facteurs pronostiques pour ces tumeurs et une meilleure compréhension des mécanismes de récidive pourraient permettre de discriminer les tumeurs réellement indolentes pour lesquelles le traitement pourrait être diminué et au contraire, les tumeurs les plus à risque de récidive pour lesquelles un traitement devrait être renforcé. L’objectif de ce travail de thèse était d’identifier les mécanismes de la récidive métastatique dans les cancers du sein luminaux de stade T1b-cN0M0 au diagnostic en analysant plus spécifiquement le microenvironnement tumoral. Pour cela, nous avons constitué une cohorte de patientes ayant eu un cancer du sein T1b-cN0, de type luminal (exprimant les récepteurs hormonaux sans surexpression de l’HER2) de type cas (patientes avec récidive métastatique à distance) / témoin (patiente sans récidive à distance), à partir de la cohorte de patientes suivies à l’Institut Curie. Les témoins étaient choisis appariés aux cas sur les principaux facteurs pronostiques connus : âge, grade tumoral et prolifération tumorale estimée par le Ki67. Nous avons ensuite évalué les facteurs de récidive dépendant des cellules tumorales. En analyse univariée, on montre qu’une moins bonne différenciation (baisse de l’expression de la E-cadhérine) est associée à la récidive. Par ailleurs, le score de récidive prédit par la signature transcriptomique ProsignaTM est plus élevé chez les cas que chez les contrôles sans que la discrimination entre les deux ne soit parfaite pour cette population de cancers du sein. L’originalité de notre étude reposait sur l’étude détaillée du microenvironnement tumoral. Sur le plan immunologique, l’analyse systématique quantitative et qualitative, en immunohistochimie, de l’infiltrat immun montre une absence d'association avec les lymphocytes B, macrophages et cellules dendritiques. En revanche, on observe une baisse des lymphocytes T CD4+ tumoraux chez les cas, sans autres association concernant les différents sous-types de lymphocytes T. Dans la continuité des travaux déjà réalisé au laboratoire du Dr Fatima Mechta-Grigoriou, l’analyse des différents sous-types de fibroblastes associés au cancer (CAF) dans notre cohorte révélait que les cas étaient plus spécifiquement enrichis en CAF activés de type CAF-S1 alors que la quantité globale de stroma ne soit pas associée à la récidive. Ici, l’action des CAF-S1 est médiée par la cadhérine-11 qui augmente les capacités de migration et invasion des cellules tumorales in vitro par stratégie siRNA. En analyse multivariée, les caractéristiques du microenvironnement et en particulier l’enrichissement en CAF-S1 restent significativement associées à la récidive.En conclusion, nous avons identifié que la survenue de métastases dans les cancers du sein luminaux de stade précoce repose sur des mécanismes associés au micro-environnement tumoral tels que la présence de CAF-S1 et leur expression de la cadhérine-11, indépendamment des cellules tumorales elles-mêmes. L’enrichissement en CAF-S1 dans le stroma tumoral était également un facteur de mauvais pronostic<br>Purpose: Early luminal breast cancers (BC) represent 70% of newly diagnosed BC. Their prognosis is generally favorable but some patients (around 5 to 10% at 10 years) will relapse with distant metastases and most of them will die. Because this dismal prognosis concerns a small number of patients, T1N0 BC have been rarely studied. The aim of this work was to identify the mechanisms of metastatic recurrence in luminal breast cancers T1b-cN0M0 at diagnosis by deciphering characteristics of both epithelial cancer cells and their surrounding tumor microenvironment (TME). Experimental Design: We constituted a cohort of luminal T1b-cN0 BC patients with metastatic recurrence (defined as "cases”) and corresponding "controls" (i. e. patients without metastatic relapse) matched (1:1) to cases on the main known prognostic factors: age, tumor grade and tumor proliferation (assessed by Ki67). Results: We found that properties in both epithelial compartment and TME are indicative of relapse in early luminal breast cancers. In univariate analysis, the loss of differentiation (assessed by the reduced expression of CDH1/E-cadherin) in cancer cells is associated with recurrence, as also predicted by high ROR score using ProsignaTM test. In TME, quantitative and qualitative immunohistochemical analyzes reveals that “cases” are characterized by a significant decrease in CD4+ T lymphocytes and an accumulation of a particular subset of Cancer Associated Fibroblasts (CAF-S1) compared to “controls”, without any other association of T lymphocyte subtypes, B lymphocytes, macrophages or dendritic cells. In multivariate analysis, TME features, in particular CAF-S1 enrichment, remain significantly associated with recurrence, which demonstrates their biological and clinical relevance. Finally, by performing functional analyses, we demonstrated that CAF-S1 pro-metastatic properties are -at least in part- mediated by CDH11/Osteoblast cadherin, consistent with the fact that the bones are a major site of metastases in these patients. Conclusions: Distant recurrence in early luminal BC is strongly associated with TME features, such as the presence of CAF-S1 and their expression of CDH11. This is independent of tumor cells and represents a new prognostic factor of distant relapse in early luminal BC patients. This could justify targeted therapies against CAF-S1 or CDH11 in these cases
24
Werbrouck, Coralie. "Modélisation in vitro & in vivo de la résistance à la radiothérapie dans les gliomes infiltrants du tronc cérébral (DIPG) TP53 Pathway Alterations Drive Radioresistance in Diffuse Intrinsic Pontine Gliomas (DIPG)." Thesis, université Paris-Saclay, 2020. http://www.theses.fr/2020UPASL001.
Full textAbstract:
Les gliomes infiltrants du tronc cérébral (DIPG) sont les tumeurs cérébrales pédiatriques les plus sévères. Le traitement standard, la radiothérapie, n’est efficace que transitoirement et la réponse est hétérogène. L’objectif du projet est de définir les mécanismes de radiorésistance.Tout d’abord, la réponse in vitro à l’irradiation de modèles cellulaires de DIPG dérivés de biopsies au diagnostic a été évaluée et nous avons identifié les mutations de TP53 comme principal facteur de radiorésistance. Ce résultat a été validé in vitro à l’aide de 4 lignées isogéniques TP53WT et TP53KD. Puis, nous avons montré au niveau clinique qu’une mutation de TP53 est un biomarqueur de non-réponse à la radiothérapie. A l’aide d’un crible d’ARN interférence, nous avons identifié différentes kinases essentielles à la survie des cellules de DIPG à l’irradiation. L’inhibition de CHK1 augmente la réponse à l’irradiation spécifiquement dans les cellules TP53MUT et pourrait être considérée comme une nouvelle approche thérapeutique en combinaison avec la radiothérapie. Enfin, des modèles cellulaires résistants à l’irradiation ont été mis en place pour étudier la rechute ainsi que des outils pour modéliser les processus moléculaires de résistance et d’échappement à la radiothérapie par suivi unicellulaire de la dynamique clonale des cellules tumorales par marquage RVB.Ces résultats vont plus loin dans la compréhension de la radioresistance des DIPG. Nous avons démontré qu’une altération de TP53 est un marqueur théranostic de prédiction de radioresistance et nous avons identifié de nouvelles opportunités thérapeutiques en combinaison avec la radiothérapie pour le traitement de cette maladie pédiatrique qui demeure incurable<br>Diffuse intrinsic pontine gliomas (DIPG) are the most severe pediatric brain tumours. Though accepted as the main therapeutic, radiotherapy is only transiently efficient and not even in every patient. We previously identified a heterogeneous response to radiotherapy at diagnosis (Castel et al., 2015). The aim of the project was to define the mechanisms of radioresistance.First, we assessed in vitro response to ionizing radiations in a collection of DIPG cellular models derived from treatment-naïve biopsies and we uncovered TP53 mutation as the main driver of increased radioresistance. We validated this finding in 4 isogenic pairs of DIPG cells with TP53WT and TP53KD. Then, we demonstrated with an extended cohort of 73 DIPG patients that mutated TP53 patients had a poor response to radiotherapy. Using a kinome-wide synthetic lethality RNAi screen, we further identified target genes that can sensitize TP53MUT DIPG to ionizing radiations. CHK1 inhibition increases response to radiation specifically in TP53MUT cells and could be considered as a new therapeutic approach in this setting. Finally, we established in vitro radioresistant DIPG cells to study tumour relapse and we developed tools to model post-radiotherapy relapse through the study of clonal dynamics using single cell RGB marking.In all, this results go further in the understanding of the DIPG radioresistance. We demonstrated that a TP53 alteration is a theranostic marker to predict radioresistance and we opened new therapeutic opportunities in combination with radiotherapy for the treatment of this pediatric disease, which remains incurable
25
Silva, Ariosto Siqueira. "Uma abordagem de metodos computacionais para simulação de processos biologicos : simulação tridimensional e metabolica do desenvolvimento tumoral." [s.n.], 2008. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/316889.
Full textAbstract:
Orientador: Jose Andres Yunes<br>Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia<br>Made available in DSpace on 2018-08-11T17:40:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Silva_AriostoSiqueira_D.pdf: 3970975 bytes, checksum: 7d1f1e04224af1b835486da199d18d00 (MD5)
Previous issue date: 2008<br>Resumo: Neste trabalho criou-se uma ferramenta de simulação e modelos computacionais para estudo da carcinogênese a fim de se responder a perguntas biológicas pertinentes ao tratamento desta doença. Os modelos computacionais se basearam no modelo teórico de Evolução Somática e Invasão Mediada por Acidez, proposto por Gatenby e Gillies, e foi implementado em uma ferramenta desenvolvida pelo autor deste trabalho no âmbito deste projeto, o Tissue Simulator (TSim, www.i-genics.com). O modelo teórico de invasão mediada por acidez propõe que células tumorais possuem maior resistência a acidez, assim como produzem quantidade de ácido lático, originado da glicólise anaeróbica, suficiente para acidificar o meio extracelular, causando assim morte do tecido saudável por apoptose induzida por acidez, e facilitando a invasão do tecido saudável pelo tumor. Estudos experimentais, na literatura, mostraram que a administração de bicarbonato de sódio na água em ratos portadores de tumores reduz o número de metástases, o que seria uma indicação de que a hipótese sobre a importância da acidez na invasividade tumoral é válida. Neste estudo, criou-se um primeiro modelo computacional para testar se o aumento da concentração de bicarbonato no sangue poderia influenciar no gradiente de acidez entre o tumor (micrometástases) e o tecido saudável, e também identificaram-se as características físico-químicas de um tampão ideal a ser usado com esse propósito. O modelo teórico de Evolução Somática, adotado neste projeto, propõe que para que um tumor epitelial se torne invasivo, é necessário que suas células adquiram três fenótipos: hiperplasia, hiperglicólise e resistência a acidez. O segundo modelo criado neste trabalho consistiu na identificação de quais seriam os valores mínimos de hiperglicólise e resistência à acidez para o aparecimento da característica de invasividade em um tumor em desenvolvimento dentro de um duto epitelial (DCIS). Uma vez identificados os fenótipos mínimos para a invasão tumoral de um DCIS, restaria saber quais as mutações em enzimas ou transportadores específicos dessa via metabólica para que o dito fenótipo seja atingido. A título de exemplo de um estudo para responder perguntas desse tipo, fez-se uma análise comparativa da robustez do fluxo glicolítico em duas células distintas: uma levedura (S. Cerevisiae) e uma célula humana especializada (célula beta pancreática), cujas enzimas principais são reguladas por estratégias distintas. Este estudo foi implementado em uma ferramenta computacional disponível na literatura (Jarnac e Matlab) e resultou na publicação de um artigo. No todo, os resultados desta tese mostram que, com o uso de ferramentas computacionais e dados quantitativos da literatura, é possível criar modelos teóricoquantitativos que podem ser usados para validar teorias sobre fenômenos biológicos assim como extrapolar novas hipóteses e testá-las, integrando-se assim a modelagem computacional no processo de pesquisa científica<br>Abstract: In this work, we created a piece of software and computer models for studying carcinogenesis, in order to answer biological questions related to the treatment of this disease. The computer models were inspired in the theory of Somatic Evolution and Acid Mediated Tumor Invasion, proposed by Gatenby and Gillies, and were implemented in a tool developed by the author under the scope of this thesis, Tissue Simulator (TSim, www.i-genics.com). The theory of Acid Mediated Tumor Invasion proposes that cancer cells are more resistant to toxicity of an acidic environment that they help create by producing excess of lactic acid through anaerobic glycolysis. Acidification of the extra-cellular environment causes death of healthy tissue through acid-induced apoptosis and ultimately facilitates tumor invasion. Experimental studies, from literature, showed that administration of sodium bicarbonate in water to mice bearing tumors reduced the number of metastases, thus supporting the importance of acidity in tumor invasion. In this study a computer model was built to test if an increase in concentration of bicarbonate in blood serum could alter the pH gradient between the tumor (micrometastases) and halthy tissue, as well as to identify the chemical properties of and ideal buffer with this purpose. The theory of Somatic Evolution, proposes that epithelial tumor cells are submitted to environmental barriers and are selected for three main phenotypes: hyperplasia, hyperglycolysis and acid resistance. A second computer model was created in order to identify the minimum values of these phenotypes that allowed a DCIS to change into an invasive tumor. Once the minimum phenotypic values identified, one can study how mutations on specific enzymes can alter the flux of a metabolic pathway, such as glycolysis, to produce the altered phenotype. As an example of this, we performed a comparative study of robustness of glycolytic flux in two different cells: yeast (S. cerevisiae) and pancreatic human beta-cell, whose enzymatic regulatory strategies differ. This computer model was implemented on Matlab and Jarnac. Overall, our results show that the use of computational tools and quantitative data may be used to create theoretical-quantitative models that help adressing theories about biological systems, as well as to extrapolate and tes new hypothesis, integrating the approach of computational modeling in the scientific research process<br>Doutorado<br>Genetica Animal e Evolução<br>Doutor em Genetica e Biologia Molecular
26
Balança, Camille-Charlotte. "Contribution des réponses immunitaires adaptatives spécifiques des antigènes tumoraux à l'efficacité clinique de l'immunothérapie par inhibition de l'axe PD-1/PD-L1." Thesis, Toulouse 3, 2021. http://www.theses.fr/2021TOU30007.
Full textAbstract:
Les lymphocytes infiltrant la tumeur (TIL) épuisés, sont caractérisés par l'expression de points de contrôle de l'immunité (PCI), par exemple PD-1. Une des approches majeures en immunothérapie, basée sur l'inhibition des PCI, s'est avérée efficace dans le contrôle de la progression tumorale dans plusieurs cancers. Malgré cette avancée, seule une proportion des patients en retire un bénéfice clinique. Afin d'améliorer les réponses à l'inhibition des PCI, il est nécessaire de comprendre les mécanismes impliqués dans l'épuisement des TIL et d'élucider quels lymphocytes T (LT) sont capables de répondre à cette immunothérapie. Au site tumoral, nous mettons en évidence que seuls les LT CD8 spécifiques des antigènes (Ag) tumoraux expriment quatre PCI ainsi que d'autres marqueurs d'épuisement et perdent la molécule de co-stimulation CD28, contrairement au LT CD8 spécifiques circulants. Les TIL CD8 spécifiques sont dysfonctionnels, néanmoins, ils possèdent un potentiel cytotoxique élevé et expriment des marqueurs de résidence. Nous montrons que l'inhibition de PD-1 a une double action sur les LT CD8 spécifiques. Elle rétablit leurs fonctions dans la tumeur et augmente leur prolifération dans la périphérie. De manière importante, l'infiltration des tumeurs par ces TIL spécifiques et épuisés est prédictive de la réponse à la thérapie et de la survie des patients traités par immunothérapie ciblant l'axe PD-1/PD-L1. Les LT CD4 auxiliaires sont essentiels pour l'amorçage de la réponse T CD8. En revanche, leur rôle effecteur dans la tumeur a été moins étudié. Ici, nous montrons que les LT CD4 spécifiques des Ag tumoraux, également épuisés au site tumoral, peuvent être identifiés par des marqueurs qui leur sont propres. Des similarités dans le programme d'épuisement des LT CD4 et CD8 ont été retrouvées. Le blocage de PD-1 sur les TIL CD4 rétablit leur activation, ce qui va permettre la maturation des cellules dendritiques et, par conséquent, l'augmentation de la prolifération des TIL CD8 spécifiques de la tumeur. Nos résultats révèlent que les TIL CD4 et CD8 spécifiques des Ag tumoraux épuisés peuvent être identifiés chez les patients par des marqueurs caractéristiques et qu'ils répondent à l'inhibition du PD-1 en rétablissant les fonctions des LT CD8 de manière directe et indirecte. Ces données identifient des biomarqueurs prédictifs de la réponse à l'immunothérapie et positionnent les LT spécifiques des Ag tumoraux comme des acteurs de la réponse clinique à l'immunothérapie bloquant le PD-1<br>Exhausted tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) are characterized by immune checkpoint (IC) expression, for instance PD-1. One of the major immunotherapy approaches, based on IC inhibition, has proved efficient in the control of tumor progression in many cancers. Despite this progress, only a proportion of patients experience clinical benefit. To improve responses to IC inhibitors, understanding mechanisms involved in TIL exhaustion and investigating which T cells are able to respond to immunotherapy are required. We investigated both CD8 and CD4 T-cell exhaustion and its relation to tumor antigen (Ag) specificity and to responsiveness to IC inhibition in cancer patients. We demonstrated that CD8 T-cell exhaustion at the tumor site was only attained by tumor Ag-specific cells that were characterized by the sequential acquisition of ICs and by CD28 loss. Their circulating counterparts expressed less ICs and at lower levels and were CD28+. Specific CD8 TILs were dysfunctional, nonetheless, they maintained high cytotoxic potential and expressed tissue residency markers. We showed that PD-1 inhibition has a dual effect on specific CD8 T cells. It rescued their effector functions at the tumor site and enhanced their proliferation in the periphery. Importantly, the quantity of exhausted and specific TILs was predictive of response to therapy and of survival in patients treated with PD-1-targeting immunotherapy. Assessment of CD4 TIL exhaustion underscored similarities with the CD8 exhaustion program, in particular their specificity for tumor Ag and sequential acquisition of ICs although ICs characterizing terminally exhausted CD4 TILs were different than those found in CD8 TILs. Importantly, PD-1 blockade on CD4 TILs restored their helper functions, leading to dendritic cell maturation and, consequently, increased tumor-specific CD8 T-cell proliferation. Our data imply that under anti-PD-1/PD-L1, effector functions of terminally exhausted CD8 TILs is rescued and the tumor site is replenished by memory CD8 T cells which proliferate following direct blockade of PD-1 and through reinvigoration of the helper activity of tumor Ag-specific CD4 T cells. Our results position tumor Ag-specific T cells as major players of responsiveness to PD-1-blocking immunotherapy and identify predictive biomarkers of response to immunotherapy
27
Granier, Clémence. "Expression de récepteurs inhibiteurs sur les lymphocytes T infiltrant les tumeurs du rein : signification biologique et clinique Multiplexed immunofluorescence analysis and quantification of intratumoral PD-1+ Tim-3+ CD8+ T cells Tim-3 expression on tumor-infiltrating PD-1+CD8+ T cells correlates with poor clinical outcome in renal cell carcinoma." Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2018. http://www.theses.fr/2018USPCB183.
Full textAbstract:
L'expression de récepteurs inhibiteurs tels PD-1, TIM-3, LAG-3, TIGIT sur les lymphocytes T participe à l'immunosuppression dans l'environnement tumoral. Le ciblage de PD-1 par les immunothérapies anti-PD-1/PD-L1 notamment révolutionne depuis peu la prise en charge de nombreux types de cancers en particulier dans le mélanome, cancer du poumon et aussi du rein. Dans la plupart des cancers comme dans celui du poumon et le mélanome, l'infiltrat CD8 et la réponse Th-1/IFN-gamma sont associés à un meilleur pronostic, contrairement aux tumeurs du rein et aux hémopathies. Les travaux de ma thèse s'intéressent à la caractérisation de l'expression des récepteurs inhibiteurs des lymphocytes, notamment PD-1 et TIM-3 dans le carcinome rénal et dans le lymphome. Mes travaux de thèse ont été réalisés avec des outils d'exploration du microenvironnement tumoral permettant une analyse multiplexe de nombreux paramètres in situ. En théorie jusqu'à 7 protéines peuvent être mises en évidence à la fois, j'ai pu mettre au point des comarquages de 4 protéines membranaires et/ ou nucléaires + Dapi ainsi que la détection d'ARN in situ dans les tumeurs. L'utilisation d'un outil technologique de microscopie à fluorescence multispectrale a permis une étude fine de la coexpression de PD-1 et Tim-3 sur les lymphocytes T CD8 (LT-CD8) grâce à la visualisation aisée de la colocalisation de ces 3 marqueurs. De la même façon, j'ai mis en évidence de l'expression de leurs ligands PD-L1 et Galectin-9 (Gal-9) dans l'environnement des tumeurs du rein. J'ai démontré que la co-expression de Tim-3 et PD-1 sur les CD8 dans le carcinome rénal avait un rôle délétère aussi bien sur le plan (i) fonctionnel puisque les LT-CD8 sécrétaient moins d'IFN-gamma, (ii) et clinique puisque les patients présentant un infiltrat de LT-CD8 double positifs pour PD-1 et TIM-3 récidivaient plus fréquemment. La présence des ligands PD-L1 et Gal-9 a été mise en évidence dans l'environnement tumoral laissant suggérer des interactions possibles avec les récepteurs inhibiteurs exprimés par les LT. J'ai également caractérisé les LT-CD8 PD-1+ TIM-3+ dans les lymphomes en combinant un marquage CD20 (quadruple + Dapi). Selon le type de lymphome, TIM-3 était coexprimé avec PD-1 à la surface des CD8 et plus ou moins au contact avec les cellules lymphomateuses CD20+. D'autre part, lorsque TIM-3 était coexprimé, les LT-CD8 étaient plus volontiers proliférant (comarquage Ki-67) en comparaison aux PD-1+ TIM-3-. Afin de poursuivre dans la caractérisation Th-1/IFN-gamma, j'ai élaboré la mise au point de la détection d'ARN dans les lymphocytes T in situ dans la tumeur, permettant de faire des liens avec leur fonctionnalité. Au total mes travaux de thèse ont permis de mettre en évidence des biomarqueurs immunologiques composites en lien avec l'expression des récepteurs inhibiteurs PD-1 et/ou TIM-3 et la perte de fonctionnalité (IFN-gamma) des lymphocytes T intratumoraux<br>It has been mainly described that the inhibitory receptors coexpression (PD-1, TIM-3, LAG-3, TIGIT) by lymphocytes in the tumor microenvironment (TME) induces a local immunosuppression. Targeting these receptors particularly PD-1 and its ligand PD-L1 is of great clinical benefit in cancer many types treatment (melanoma, renal and lung cancer in particular). In the most cases of cancer, like melanoma and lung cancer, a CD8-T cell and Th-1/IFN-gamma response is of good prognosis. But this is not the case in renal cancer and in hemopathies. My PhD work attempts to characterize clinical and biological implication of PD-1 and TIM-3 expression by intra-tumor lymphocytes in the setting of renal cancer and lymphoma. My PhD work has been conducted thanks to new methods of multiplexed characterization of the TME. Multispectral immunofluorescence lead to identify 7 parameters at the same time, and in this study I elaborated the identifications of lymphocytes markers in situ within the tumor: 4 membrane and/or nuclear proteins + nuclei (Dapi counterstain) and also coupled with the RNA detection. This tool allows me to accurately study the coexpression of PD-1 and TIM-3 at the CD8-T cell surface thanks to colocalisation identification and counting of these 3 markers. With the same method, I found that PD-L1 and Gal-9, which are PD-1 and TIM-3 ligands, were also expressed in the TME of renal carcinoma. I found that the coexpression of TIM-3 together with PD-1 in the CD8-T cells had a double relevance (i) at functional level, CD8-T cells were less able to secrete gamma-IFN (ii) at clinical level, patients harboring a higher infiltrate were more likely to relapse. The presence of PD-L1 and Gal-9 suggested interactions with inhibitory receptors of T cells. I also characterized CD8-T cells expressing PD-1 and TIM-3 in lymphomas, combining a CD20 staining (quadruple staining + Dapi). TIM-3 was more or less expressed depending of the lymphoma type near to CD20+ cells. TIM-3 PD-1 CD8-T cells were more likely Ki-67+ compared to TIM-3- cells, suggesting a more proliferative capacity. In order to continue the characterization of the Th-1/gamma-IFN-gamma immune response, I elaborate a technic to detect the gamma-IFN RNA in situ, together with lymphocytes staining, allowing the exploration of functionality within the tumor. To summarize, during my PhD work I could characterize composite immune biomarkers linked to the functionality of CD8-T cell and gamma-IFN Th-1 response
28
Moure, Sabrina Pozatti. "Avaliação do tecido conjuntivo de folículos pericoronários, cistos dentígeros e tumores odontogênicos ceratocísticos." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2007. http://hdl.handle.net/10183/11438.
Full textAbstract:
O objetivo desse estudo foi avaliar as características do tecido conjuntivo de 11 folículos pericoronários, 12 cistos dentígeros e de 14 tumores odontogênicos ceratocísticos (TOCs). A amostra foi submetida às técnicas de Hematoxilina e Eosina, Tricrômico de Masson, Picrosírius, Direct Blue e Orceína. Tricrômico de Masson foi utilizado para avaliação de diferenças de densidade e de paralelismo das fibras colágenas, bem como presença de infiltrado linfoplasmocitário. Picrosírius serviu para mensuração da quantidade de fibras colágenas; Direct Blue e Orceína, para identificação do sistema de fibras elásticas. Lâminas coradas por essas três últimas técnicas foram visualizadas em microscopia confocal a laser. Os resultados mostraram semelhança entre o folículo pericoronário e o TOC: paralelismo de fibras colágenas arranjadas em um padrão eminentemente denso, podendo conter uma camada de densidade frouxa junto ao tecido epitelial. As cápsulas de cistos dentígeros eram compostas por fibras colágenas desorganizadas, ou não paralelas, em um arranjo frouxo com presença de infiltrado linfoplasmocitário. Não foi observada marcação para fibras do sistema elástico. Com base nos resultados, conclui-se que a cápsula do TOC representa o estroma da lesão, desempenhando função de suporte e que, diferentemente, o tecido conjuntivo do cisto dentígero é parte da resposta inflamatória.<br>The aim of this study was to evaluate the connective tissue features of pericoronal follicles, dentigerous cysts and keratocystic odontogenic tumor. The sample was submitted to Hematoxylin-eosin, Masson Trichrome, Picrosirius, Direct Blue and Orcein stains. Masson Trichrome was performed to distinguish collagen fibers density and parallelism, as well as chronic infiltrate presence. Picrosirius was performed to collagen fibers quantification; Direct Blue and Orcein, to elastic system fibers identification. Picrosirius, Direct Blue and Orcein staining slides were observed by means confocal laser scanning microscope. Results showed similar features between pericoronal follicle and keratocystic odontogenic tumor: parallel collagen fibers, more tightly packed collagen fibers, and sometimes a soft layer beneath epithelial tissue. Dentigerous cyst capsule was composed by wound collagen fibers, soft packed, associated to chronic inflammatory infiltrate. It was not observed elastic system fibers labeling. Based on results, it was concluded that keratocystic odontogenic tumor capsule represent the lesion stroma, playing a support role. This finding is different from dentigerous cyst where connective tissue is produced by inflammatory response.
29
LEE, REN-SHIANG. "I. Caracterisation phenotypique et fonctionnelle des lymphocytes t infiltrant les tumeurs de la thyroide. Ii. Utilisation du fragment b de la toxine de shigella pour le ciblage de proteines exogenes dans une voie de presentation restreinte par le complexe majeur d'histocompatibilite de classe i." Paris 6, 1998. http://www.theses.fr/1998PA066673.
Full textAbstract:
Sur le plan clinique, l'evolution des tumeurs thyroidiennes meme metastatiques est souvent lente suggerant une possible immunosurveillance. J'ai donc entrepris la caracterisation phenotypique et fonctionnelle des lymphocytes t infiltrant les tumeurs (til) de la thyroide. Contrairement aux til extraits d'autres tumeurs, les conditions de culture des til thyroidiens impliquaient la presence de cellules nourricieres ce qui suggerait la necessite de signaux de costimulation souvent importants lors d'activation de cellules au repos ou anergiques. Les lymphocytes t derives de ces tumeurs exprimaient simultanement les antigenes cd4 et cd8 dans plus de 15% des cas, phenotype retrouve que dans quelques situations auto-immunes dont les thyroidites auto-immunes. La majorite de ces til presentaient une cytotoxicite non restreinte par les molecules du complexe majeur d'histocompatibilite (cmh) et ce phenomene etait associe a l'expansion d'une population cd3 +cd56 +. Devant l'absence de mise en evidence de lymphocytes t specifiques de cellules tumorales autologues, nous avons developpe un vecteur d'immunisation - le fragment b de la toxine shiga - qui permet la translocation cellulaire de proteines exogenes en partie dans une voie non endosomale. Un peptide mage-1 derive d'un antigene tumoral et fusionne au fragment b est presente de facon restreinte par des molecules du cmh de classe i a des lymphocytes t cytotoxiques tandis que la proteine mage-1 ou le peptide mage-1 fusionne a d'autres molecules ne sont pas routes dans cette voie de presentation. Par rapport aux autres outils de ce type, notamment les vecteurs viraux, ce vecteur presente differents avantages lies a sa non toxicite et a sa moindre immunogenicite. Par le type de ciblage de cellules presentatrices (lymphocytes b, cellules dendritiques), ce vecteur pourrait orienter des reponses immunologiques differentes de celles ou seules les cellules dendritiques sont selectionnees lors de protocoles de vaccination. Enfin la capacite de ce fragment b de la toxine de shiga d'induire des phenomenes d'apoptose sur certaines cellules tumorales renforce son interet dans des perspectives d'utilisation comme vaccin anti-tumoral.
30
Poizot-Martin, Isabelle. "Signalisation induite par les molécules HLA de classe II dans les cellules B lymphoïdes normales et malignes folliculaires." Université Joseph Fourier (Grenoble), 2000. http://www.theses.fr/2000GRE10170.
Full textAbstract:
Les lymphomes b non-hodgkiniens font partie des rares tumeurs a exprimer des molecules hla de classe ii. Ceci leur permet d'interagir directement avec les lymphocytes t cd4+ qui infiltrent la tumeur (til-t). La signalisation induite par les molecules hla-dr peut induire soit l'apoptose, soit la proliferation. La premiere partie de ce travail a ete d'etudier le role joue par les molecules hla de classe ii dans l'interaction entre les til-t cd4+ et les lymphocytes b malins de lymphome folliculaire. Par l'intermediaire des molecules hla de classe ii, des clones de til-t cd4+ sont capables d'induire l'activation des lymphocytes b malins et leur entree en phase g1 du cycle cellulaire (induction du ki-67). Afin de determiner si les lymphocytes b malins presentent des anomalies intrinseques les empechant de progresser dans le cycle cellulaire, nous avons etudie dans une deuxieme partie l'effet d'une signalisation induite par les molecules hla-dr dans des lymphocytes b normaux. Nous avons d'abord montre que l'orientation vers une voie apoptotique ou proliferative ne depend pas de l'etat d'activation du lymphocyte b, mais de la capacite du ligand a regrouper les molecules hla-dr a la surface de la cellule. En effet, un ac anti-hla-dr couple a des billes de sepharose (qui mime la relation avec un lymphocyte t cd4+) induit la proliferation des lymphocytes b normaux alors qu'un ac anti-hla-dr couple a un ac secondaire, induit l'apoptose, sans entree prealable dans le cycle cellulaire. Ces resultats montrent que dans les lymphocytes b tumoraux, l'entree en cycle correspond bien a un debut de proliferation et non a un prelude a l'apoptose. Nous avons replace la signalisation hla-dr dans un contexte physiologique : les lymphocytes b recoivent d'abord un signal induit par l'interaction d'un antigene sur le recepteur a l'ag du lymphocyte b, ce qui induit une proliferation. Ensuite, ils interagissent avec des lymphocytes t cd4+, entrainant une signalisation par les molecules hla-dr dans le lymphocyte b. La proliferation induite par la stimulation du recepteur a l'ag est regulee negativement par co-stimulation avec un ac anti-hla-dr lie a un ac secondaire. Ceci se traduit au niveau du cycle cellulaire, par une diminution de la phosphorylation de la proteine prb due a une diminution d'expression des cdk2, 4 et 6 et des cyclines e et a, et a un retard d'expression de la cycline d2. Les cdkis p21 et p27 ne sont pas impliques. Nos resultats montrent qu'un signal induit par hla-dr est suffisant pour induire une proliferation. L'absence de proliferation dans les lymphocytes b tumoraux suggerent fortement la presence d'une (ou plusieurs) anomalie(s) intrinseque(s) empechant la progression dans le cycle cellulaire. Ce blocage semble etre general puisqu'il n'affecte pas que la voie hla de classe ii mais egalement la voie il4/cd40.
31
Courau, Tristan. "Impacts de la production de VEGF et de TGF Bêta par les cellules tumorales sur la réponse immunitaire aux tumeurs et la mise en place de la tolérance dominante par les lymphocytes T régulateurs." Thesis, Paris 6, 2015. http://www.theses.fr/2015PA066586.
Full textAbstract:
Ma thèse a pour but d'étudier l'impact des molécules immunosuppressives TGFβ et VEGF exprimées par les cellules tumorales dans la tolérance mise en place contre les tumeurs par les lymphocytes T régulateurs (Tregs). Pour cela, j'ai utilisé des lignées tumorales murines de mélanome B16 invalidées pour l'expression de TGFβ ou de VEGF par shRNA. J'ai pu observer que les invalidations induisent de profondes modifications de la réponse immunitaire contre les tumeurs, qui se traduisent par une forte diminution de son bras régulateur et une forte augmentation de son bras effecteur. Ces modifications sont le fait d'évènements très précoces et différents entre le VEGF et le TGFβ. Le ciblage simultané de TGFβ et de VEGF induit alors un rejet spontané des tumeurs chez 40% des animaux inoculés, et leur ciblage additionnel dans la stratégie thérapeutique utilisant les anticorps anti-PD-1 et anti-CTLA-4 induit un effet additif important. Nos résultats montrent donc que le VEGF et le TGFβ exprimés par les tumeurs sont des facteurs importants pour la tolérance immunitaire aux tumeurs et particulièrement pour la mobilisation des Tregs, et qu'il y a un fort rationnel à chercher à combiner leur ciblage avec les différentes stratégies thérapeutiques anti-tumorales existantes<br>My thesis aims at studying the impact tumor-derived immunosuppressive molecules TGFβ and VEGF on the dominant tolerance establishment by regulatory T cells (Tregs). For this I used murine B16 melanoma tumor cell lines knocked-down by shRNA for the expression of TGFβ or VEGF. I observed that these silencings induce dramatic changes in the immune response against tumors, which result in a large decrease of its regulatory arm and a strong increase of its effector arm. These changes result from very early mechanisms that differ between VEGF and TGFβ silencings. Accordingly, simultaneous targeting of TGFβ and VEGF induces significant tumor rejection, and their additional targeting in the anti-PD-1 / anti-CTLA-4 therapeutic strategy brings obvious additive effect. Globally, our results show that tumor-derived VEGF and TGFβ are important factors for the mobilization of Tregs and more generally for immune tolerance to tumors, and that there is a strong rational to combine their targeting with the different existing anti-tumor therapies
32
Spehner, Laurie. "Caractérisation des réponses immunitaires périphériques des cancers épithéliaux exprimant les papillomavirus humains." Thesis, Bourgogne Franche-Comté, 2019. http://www.theses.fr/2019UBFCE011.
Full textAbstract:
L’augmentation de l’incidence et l’absence de ressources thérapeutiques pour les formes non opérables de patients atteints d’un cancer HPV+ est un enjeu important. La forte immunosurveillance au sein des tumeurs associées aux HPV ainsi que la présence d’antigènes viraux associée à l’oncogenèse de ces cancers devraient privilégier le développement de stratégies d’immunothérapies comme la vaccination anti tumorale ainsi que le transfert adoptif de TILs. Ces avancées technologiques incitent à mieux comprendre les réponses immunitaires dans ces pathologies et à développer des stratégies combinant les immunothérapies pour le traitement de l’ensemble des cancers liés aux HPV. Nous avons dans un premier temps recherché les antigènes de tumeurs associés au pronostique de patients atteints d’un cancer du canal anal. Les patients ont été traités par une combinaison de chimiothérapies dont son bénéfice thérapeutique a été démontré par notre équipe. Le monitoring des réponses T spécifiques dans le sang périphérique de ces patients a permis de montrer que la Télomérase est un antigène de tumeur associé au SCCA ; et que la présence de LT Th1 spécifiques de la Télomérase est un facteur prédictif de la survie sans progression à 12 mois. Nos données ont également mis en évidence l’influence des M-MDSC sur les réponses immunitaires T spécifiques de nos antigènes ainsi que sur la survie des patients atteints d’un SCCA. Aucun effet des Treg n’a été observé sur les réponses immunitaires et la survie dans cette maladie. Les M-MDSC sont un facteur pronostique de la réponse au traitement des patients atteints d’un SCCA traités par chimiothérapies. Le second travail de cette thèse a permis de valider la faisabilité d’isoler des TILs à partir de prélèvements biopsiques issus de patients atteints d’un cancer HPV+. Les réponses immunitaires T spécifiques des oncoprotéines d’HPV16 sont corrélées dans 50 et 60% des cas entre le sang périphérique et la tumeur. Le dernier objectif de ce travail de thèse a permis de démontrer l’immunogénicité de la protéine SALL4, un facteur de transcription associé à la pluripotence et à l’auto-renouvèlement des cellules souches embryonnaires. Nous avons généré une technologie d’analyse des réponses CD4 Th1 anti-SALL4 permettant le suivi des réponses immunes chez les patients atteints d’un adénocarcinome digestif. Nos travaux ont également permis de montrer une faible fréquence de LT spécifiques de SALL4 dans le sang périphérique de patients atteints d’un SCCA. Ces résultats suggèrent que la présence de réponses spécifiques de SALL4 dans le sang périphérique de patients atteints d’un SCCA pourrait être l’objet d’une immunosurveillance menant à une diminution de la fréquence des LT CD4 SALL4+. Il serait intéressant d’analyser la présence de LT spécifiques de cet antigène dans des formes précoces de cancers HPV+<br>The increased incidence and the lack of therapeutic resources for non-operable forms of HPV+ cancer patients constitutes a major challenge. High immunosurveillance in HPV-associated tumors and the presence of viral antigens associated with oncogenesis of these cancers should focus on the development of immunotherapy strategies such as anti-tumor vaccination and adoptive transfer of TILs. These technological advances encourage a better understanding of immune responses in these pathologies and aim to develop strategies combining immunotherapies for the treatment of all HPV-related cancers. We first looked for tumor antigens associated with the prognosis of patients with anal canal cancer. The patients were treated with a combination of chemotherapy whose therapeutic benefit was demonstrated by our team. Monitoring specific T-immune responses in the peripheral blood of these patients has shown that telomerase is a tumor antigen associated with SCCA; and moreover that the presence of Telomerase-specific LT Th1 is a predictor of progression-free survival at 12 months. Our data also highlighted the influence of M-MDSC on the T-specific immune responses of our antigens as well as on the survival of patients with SCCA. As a result, M-MDSCs are a prognostic factor in the response to treatment of patients with metastatic SCCA treated with chemotherapy. The second work of this thesis validated the feasibility of isolating TILs from biopsy samples from patients with HPV-associated cancer. The specific T immune responses of HPV16 oncoproteins are correlated in 50 and 60% of cases between peripheral blood and tumor. The final objective of this thesis work demonstrated the immunogenicity of the SALL4 protein, a transcription factor associated with pluripotency and self-renewal of embryonic stem cells. We have generated anti-SALL4 CD4 Th1 response analysis technology to monitor immune responses in patients with digestive adenocarcinoma. Our work has also shown a low frequency of SALL4-specific T responses in the peripheral blood of patients with SCCA. These results suggest that the presence of specific SALL4 responses in the peripheral blood of SCCA patients could be subject to immunomonitoring resulting in a decrease in the frequency of CD4 LT SALL4+. It would be interesting to analyze the presence of specific LT of this antigen in the early forms of HPV-related cancers
33
Petitprez, Florent. "Integrated analysis and clinical impact of immune and stromal microenvironments in solid tumors Quantitative analyses of the tumor microenvironment composition and orientation in the era of precision medicine Transcriptomic analysis of the tumor microenvironment to guide prognosis and immunotherapies Tumor microenvironment quantification tool draws a comprehensive map of the tumor microenvironment of non-hematologic human cancers The mMCP-counter method to estimate abundance of tissue-infiltrating immune and stromal cell populations using gene expression in murine samples Immune sub-classes in sarcoma predict survival and immunotherapy response Intra-tumoral tertiary lymphoid structures are associated with a low risk of hepatocellular carcinoma early recurrence Association of IL-36γ with tertiary lymphoid structures and inflammatory immune infiltrates in human colorectal cancer Immune-based identification of cancer patients at high risk of progression Tumor-infiltrating and peripheral blood T-cell immunophenotypes predict early relapse in localized clear cell renal cell carcinoma PD-L1 expression and CD8+ T-cell infiltrate are associated with clinical progression in patients with node-positive prostate cancer Intratumoral classical complement pathway activation promotes cancer progression". Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2018. http://www.theses.fr/2018USPCB104.
Full textAbstract:
Les tumeurs sont composées de cellules malignes et d'une grande variété de cellules non-tumorales, en particulier des cellules immunitaires qui forment le micro-environnement tumoral (MET). Il a été démontré que la composition du MET était associée au devenir clinique des patients, en termes de survie et de réponses thérapeutiques. Avec le développement récent des immunothérapies qui ciblent des éléments spécifiques du MET, l'immunité anti-tumorale a soulevé un intérêt majeur. Plusieurs méthodologies ont été mises au point afin d'étudier la composition du MET, avec une précision toujours plus grande. En particulier, des méthodes comme MCP-counter permettent d'exploiter les données transcriptomiques de la tumeur entière afin de quantifier les différentes populations qui composent le MET. Le volet méthodologique de ce travail de thèse a ainsi consisté à proposer une amélioration de MCP-counter, en particulier pour l'analyse de données RNA-Seq. Une adaptation de la méthode pour des données issues de modèles murins (mMCP-counter) est également proposée. MCP-counter permet d'analyser rapidement le MET de larges séries de tumeurs. Un second volet de cette thèse consiste en l'application de cette méthode pour établir une classification immunitaire des sarcomes des tissus mous, un type de cancer rare, hétérogène et agressif. Cette classification immunitaire a permis de mettre en évidence des groupes de tumeurs faiblement ou fortement infiltrés, ainsi qu'un groupe marqué par une forte vascularisation. De manière intéressante, la classification immunitaire permet de prédire la réponse des patients aux immunothérapies. Ce travail a aussi démontré un rôle important des structures lymphoïdes tertiaires (SLT). Les SLT sont des structures de type noeud lymphatique composées de lymphocytes B et T qui se forment dans la tumeur ou à proximité de celle-ci. Au sein des SLT, une réponse immunitaire anti-tumorale peut se former et maturer. L'intérêt porté aux SLT est de plus en plus important pour de nombreux types de cancers. Dans la plupart des types de cancer, une forte infiltration de la tumeur par des lymphocytes T, en particulier CD8+, est associée à une meilleure survie des patients. Cependant, le carcinome rénal à cellules claires et le cancer de la prostate sont des exceptions à cette règle. En effet, dans ces deux cancers urologiques, la présence dans la tumeur de lymphocytes T est associée à une survie plus courte des patients, ainsi qu'à une rechute et une progression plus précoce. Ces exceptions sont détaillées dans une troisième partie de cette thèse, par une description minutieuse du MET, ainsi que par l'analyse de l'implication du système du complément. Dans leur ensemble, les résultats présentés dans cette thèse démontrent qu'en combinant différentes méthodes d'analyse, in silico, in situ et in vivo, il est possible d'obtenir une vision extrêmement complète du MET. La connaissance des types cellulaires présents dans la tumeur ainsi que leur orientation fonctionnelle permet de guider le soin apporté aux patients et d'améliorer leur devenir clinique. La description complète du MET ouvre la voie à une médecine personnalisée pour les patients atteints de cancer<br>Tumors are composed not only of malignant cells but also contain a vast variety of non-malignant cells, notably immune cells forming the tumor microenvironment (TME). The composition of the TME was shown to be associated with clinical outcome for cancer patients, in terms of survival and therapeutic responses. With the relatively recent development of immunotherapies targeting specific elements of the TME, tumor immunology has risen a strong interest and holds a strong therapeutic potential. Several methodologies have been developed to study the composition of the TME with an increased precision. Notably, some methods such as MCP-counter enable the use of the tumor bulk transcriptome to quantify cell populations composing the TME. The methodological aspect of this PhD project consisted in setting up an enhanced version of MCP-counter that can be readily applied to RNA-Seq data, as well as propose an adaptation of the method for mouse models. Using MCP-counter, the TME of large series of tumors can be easily analyzed. The application part of this PhD work consisted of applying MCP-counter to establish an immune-based classification of soft-tissue sarcoma, a rare, aggressive and heterogeneous cancer type. The immune classification notably allowed to identify immune low and high groups, and a group characterized by a strong vasculature. Interestingly, the classification was notably found to be predictive of the patients' response to immunotherapies. It also highlighted an important role of tertiary lymphoid structures (TLS). TLS are lymph-node-like structures composed of T and B cells that form within the tumor or in close proximity. They are a site of formation and maturation of antitumoral immune responses. TLS are raising a growing interest in many malignancies. In most cancer types, a strong infiltration by T cells, in particular CD8+ T cells, is associated with a favorable clinical outcome. However, clear-cell renal cell carcinoma and prostate cancer are exceptions to this general rule. Indeed, in these urological cancers, an increased infiltration by T cells is associated with a decreased patient survival and with earlier relapse and disease progression. In a third part of this thesis, these exceptions are investigated with more details by scrutinizing the TME, and questioning the implication of the complement system. Overall, this thesis presents how the combination of several analysis methods, in silico, in situ and in vivo, can help achieve an extremely precise description of the TME. Knowing accurately what cell populations and what their functional orientation can help guide patients care and improve clinical outcome. Complete description of the TME opens the way towards personalized medicine for cancer patients
34
Wu, Tao. "Evaluation préclinique de thérapies innovantes pour le carcinome hépatocellulaire et l'infection chronique par le virus de l'hépatite C." Thesis, Strasbourg, 2014. http://www.theses.fr/2014STRAJ123/document.
Full textAbstract:
L’infection par le virus de l’hépatite C (VHC) représente un problème majeur de santé publique du fait de sa prévalence élevée et de la sévérité de ses complications, cirrhose et carcinome hépatocellulaire (CHC). Les objectifs du projet de thèse sont (i) de mettre en place et caractériser des modèles orthotopiques de CHC chez le petit animal (xénogreffe orthotopique de la lignée de CHC humaine Huh-7 exprimant le gène rapporteur de la luciférase chez la souris immunodéficiente) et chez le gros animal (transplantation autologue d’hépatocytes de cochon préalablement transformés ex vivo par transfert par voie lentivirale d’une combinaison de six oncogènes) et (ii) d’apporter la preuve de concept d’une approche innovante d’immunothérapie adoptive allogénique du CHC et de l’infection chronique par le VHC, par administration de lymphocytes génétiquement modifiés (LGM) allogéniques exprimant un gène de toxicité conditionnelle, ou gène suicide. Un tel gène suicide permet le contrôle des LGM, conduisant à leur élimination conditionnelle en cas d’effets secondaires indésirables. Ainsi, nous avons montré que, à dose élevée, ces LGM exercent in vitro une activité cytotoxique vis-à-vis de lignées de CHC humaines et in vivo une activité anti-tumorale vis-à-vis de tumeurs orthotopiques Huh-7. A faible dose, les LGM présentent une activité anti-virale vis-à-vis du VHC sans induire de toxicité. Ces résultats ouvrent la perspective à une approche originale d’immunothérapie du CHC, associée aux traitements actuels et de prévention de la réinfection du greffon hépatique par le VHC lors de la transplantation<br>The hepatitis C virus (HCV) infection is a major problem of public health, due to its high prevalence and to the severity of its complications, cirrhosis and hepatocellular carcinoma (HCC). The aims of the thesis project are (i) to set up and characterize orthotopic HCC models in the small animal (orthotopic transplantation in immunodeficient mice of the human HCC cell line Huh-7, expressing the luciferase reporter gene) and in the large animal (autologous transplantation of porcine hepatocytes previously ex vivo-transformed by lentiviral-meidated transfer of a combination of six oncogenes) and (ii) to provide the proof-of-concept of an innovative adoptive allogeneic immunotherapy approach for the treatment of HCC and prevention of liver graft reinfection by HCV, through the administration of allogeneic suicide gene-modified lymphocytes (GML). Such a suicide gene allows for the control of GML, leading to their conditional elimination in case of undesirable side effects. Thus, we have demonstrated that, at high dose, these GML present an in vitro cytotoxic activity toward HCC cell lines and an in vivo antitumoral effect against orthotopic Huh-7 tumors. At low level, the GML have an antiviral activity against HCV, without toxicity against target cells. These results open the perspective for an original approach of immunotherapy for the treatment of HCC in association with current treatments and for the prevention of liver graft reinfection by HCV at time of liver transplantation
35
Lemdani-Aichoun, Kathia. "Optimisation de la réponse immune après traitement locorégional de tumeurs colorectales murines." Thesis, 2018. http://www.theses.fr/2018SACLS374.
Full textAbstract:
Les métastases hépatiques compliquent l'évolution de 50% des cancers colorectaux (CCR). Plus de la moitié des patients présentent une récidive à distance avec métastases occultes pour lesquelles une chirurgie peut être réalisée dans moins de 20% des cas. L'ablation par radiofréquence (RFA) induit une réponse lymphocytaire T qui n'est pas évaluée après une intervention chirurgicale seule. L'immunothérapie combinée à la RFA pourrait potentialiser cet effet conduisant à une réponse tumorale à distance. Nous proposons une approche qui combine la RFA avec hydrogel thermoreversible libérant des agents immunomodulateurs (GMCSF et BCG) sur le site du traitementPremièrement, nous nous sommes intéressés à la sélection et à la caractérisation de la formulation optimale d’hydrogel par des techniques physicochimiques. Les propriétés de l'hydrogel ont été étudiées par rhéologie et des tests de muco-adhésion ont été mis en place. Le temps de résidence de l'hydrogel et de la protéine dans la zone tumorale a été démontré par imagerie optique. De plus, la cinétique de libération et l'intégrité du GMCSF encapsulé ont été déterminées. Ensuite, nous avons démontré l’efficacité de l’association de la RFA avec le dépôt local de l’hydrogel immunomodulatuer sur un modèle murin de cancer colorectal. En effet, nous avons observé une survie améliorée des animaux et régression complète des tumeurs distantes chez les animaux traités par la combinaison complète. Cette réponse est caractérisée par un niveau élevé de sécrétion de cytokines pro-inflammatoires par les cellules T CD4 et TCD8 et une augmentation de l’infiltrat lymphocytaire dans les tumeurs. Ceci a permis d'envisager une association avec l'immunothérapie anti-PD1 dans le traitement de macrométastases échappant au traitement combiné RFA avec l’hydrogel immunomodulateur. En effet, l’immunothérapie dans le traitement du cancer colorectal métastatique présente une efficacité limitée chez les patients. Notre travail propose a démontré que l’efficacité de l’immunomodulation locale dans l’amélioration des réponses immunitaires dans le cancer colorectal. Ces résultats permettent de reconsidérer l’utilisation de l’immunothérapie chez les patients atteints de CCR métastatique non MSI<br>Liver metastases complicate the progression of 50% of colorectal cancers (CRC). More than half of the patients have recurrent remissions with occult metastases for which surgery can be performed in less than 20% of cases. Radiofrequency ablation (RFA) induces a T lymphocyte response that is not observed after surgery alone. Combined immunotherapy with RFA may potentiate this effect leading to a distant tumor response. We propose an approach that combines RFA with thermoreversible hydrogel releasing immunomodulatory agents (GMCSF and BCG) at the treatment site.First, we focused on the selection and characterization of the optimal hydrogel formulation by physicochemical techniques. The properties of the hydrogel were studied by rheology and mucoadhesion tests were set up. The residence time of the hydrogel and the protein in the tumor zone was demonstrated by optical imaging. In addition, the release kinetics and integrity of the encapsulated GMCSF were determined. Then, we demonstrated the effectiveness of the combination of RFA with the local deposition of the immunomodulatory hydrogel on a mouse model of colorectal cancer. Indeed, we observed improved survival of animals and complete regression of distant tumors the complete treatment group. This response is characterized by a high level of pro-inflammatory cytokine secreted by CD4 and TCD8 T cells and an increase Lymphocytes infiltrating tumors. The immune escape of large lesions was reversed by association with anti-PD1 immunotherapy Indeed, immunotherapy in the treatment of metastatic colorectal cancer has limited efficacy in patients. Our work has demonstrated the effectiveness of local immunomodulation in improving immune responses in colorectal cancer. These results make it possible to reconsider the use of immunotherapy in patients with non-MSI metastatic CRC
36
Carvalho, Maria Isabel da Silva. "Advances in canine mammary cancer: a role for inflammatory infiltrate in tumor microenvironment." Doctoral thesis, 2017. http://hdl.handle.net/10348/7640.
Full textAbstract:
Tese de Doutoramento em Ciências Veterinárias<br>A inflamação faz parte dos principais “hallmarks” associados ao cancro e tem um papel
relevante na carcinogénese mamária, relacionando-se com a agressividade tumoral e pior
prognóstico. Nos tumores mamários dos canídeos (TMC) os estudos que se debruçam
sobre o efeito das células imunitárias no prognóstico são escassos. Neste contexto, o
presente trabalho foi realizado com o objetivo de fomentar o conhecimento sobre o papel
das vias de sinalização compartilhadas pelo infiltrado de linfócitos T/macrófagos e
importantes biomarcadores tumorais na progressão, agressividade e prognóstico destes
tumores.
A imunossupressão associada ao infiltrado de linfócitos T no tumor tem sido explicada
pela capacidade inibitória das células T reguladoras (Treg) que impedem as atividades
citotóxicas anti-tumorais. Com base nestas evidências, caracterizámos por
imunohistoquímica as células Treg intratumorais (FoxP3+), bem como algumas
citoquinas relacionadas com elas: TGFβ e IL-35. Os nossos resultados demonstraram que
a maior imunorreactividade para o FoxP3 está presente em tumores com fenótipos mais
agressivos: elevado grau histológico de malignidade (GHM), presença de embolos
intravasculares e metástases nos linfonodos. Adicionalmente, mostrámos que as células
Treg FoxP3+ intratumorais estão associadas com uma menor sobrevida total (ST), por
análise univariada e multivariada. As células Treg secretam citoquinas inibidoras (TGFβ
e IL-35), induzindo a tolerância aos tumores. Os nossos resultados sugerem uma
associação entre o TGFβ e parâmetros de agressividade tumoral, refletindo o seu
envolvimento na transformação maligna. Demonstraram também uma correlação positiva
entre o FoxP3 intratumoral, os níveis de TGFβ, VEGF e CD31. Além disso, tumores com
abundante TGFβ e com elevada expressão simultânea de TGFβ/FoxP3, FoxP3/VEGF,
TGFβ/VEGF foram associados ao menor tempo de ST e a classe de tumores TGFβ/FoxP3
elevados revelou-se como um fator independente de mau prognóstico na análise
multivariada. A IL-35 é uma citoquina secretada pelas células Treg que inibe a
proliferação e função das células T. Demonstrámos que a sobre-expressão da IL-35 está
associada com o estádio clínico mais avançado e com um prognóstico desfavorável na
análise univariada e multivariada. Foi possível constatar, pela 1ª vez nos TMC, o valor
prognóstico independente das células FoxP3+ Treg e da classe de tumores TGFβ/FoxP3 elevados. A IL-35 evidenciou-se ainda como um novo biomarcador capaz de prever a
evolução clínica dos TMC.
No seguimento deste trabalho, realizámos um amplo estudo que incidiu sobre as vias de
sinalização compartilhadas pelo infiltrado de linfócitos T/macrófagos e importantes
biomarcadores tumorais no microambiente dos TMC. Com esse propósito estudámos
biomarcadores celulares importantes na carcinogénese mamária (COX-2, EGFR e c-kit),
que estão frequentemente sobre-expressos ou mutados nos TMC. Constatámos uma
associação significativa da imunoexpressão elevada da COX-2 com os linfócitos T CD3+
e macrófagos MAC387. Tumores com elevada expressão de COX-2/CD3 e COX-2/MAC
estão associados com variáveis de agressividade tumoral e menor ST. Demonstrámos
ainda que a expressão simultânea de COX-2+/EGFR+ está associada com maior número
de células T CD3+ intratumorais e foi observada uma associação significativa e uma
correlação positiva entre os linfócitos T CD3+ e a expressão de c-kit. Tumores com alta
expressão de c-kit apresentaram maior número de células T CD3+ estando associados a
um GHM elevado, presença de êmbolos intravasculares, metástases nos linfonodos e
menor ST. Os resultados demonstram que as vias de sinalização que envolvem a COX-2,
o EGFR e o c-kit são importantes, não só para a remodelação do microambiente do tumor
mamário, mas também como alvos para a terapia imunológica anti-tumoral.
Para complementar o trabalho, foi realizada uma experiência de co-cultura in vitro onde
se pretendia demonstrar a potencial participação bidirecional das células tumorais e
células imunitárias na regulação da COX-2. Os resultados mostraram que a co-cultura
entre a linha celular de carcinoma mamário de cão Sh1b e as células mononucleares de
sangue periférico de cão (PBMCs) induziram uma tendência para a sobre-expressão de
COX-2 nas células cancerígenas. Por sua vez, a expressão de COX-2 pelos PBMCs, entre
eles predominantemente macrófagos CD68+, foi significativamente atenuada pela cocultura
com Sh1b. Em conformidade, a co-cultura com CD68+ THP1 diferenciada
(dTHP1) provocou um aumento da produção intracelular de COX-2 pelas células Sh1b.
A expressão intracelular de COX-2 pela dTHP1 diminuiu quando estas células foram
tratadas com meio condicionado das células Sh1b. Estes resultados representam um
avanço significativo na compreensão do papel da COX-2 na remodelação do
microambiente tumoral nos TMC, nomeadamente através da imunomodulação dos
macrófagos associados ao tumor.
Globalmente, o presente trabalho demonstrou que, à semelhança do cancro de mama da
mulher, também nos TMC as células inflamatórias no microambiente do tumor são
capazes de orquestrar programas facilitadores da progressão tumoral.<br>Cancer related inflammation is part of the major cancer hallmarks and has an important
role in mammary carcinogenesis being involved in tumor aggressiveness and poor clinical
outcome. In dogs only few studies have yet concentrated on the influence of immune cells
in clinical outcome of dog mammary tumor patients. In this context, the present work was
conducted with the main aim of up-to-date knowledge about the roles of the intertwined
signaling pathways shared by T-lymphocytic/macrophage infiltrates and important tissue
biomarkers in canine mammary tumors (CMT) progression, aggression and prognosis.
Immunosuppression associated with tumor infiltrating T-lymphocytes (TILs) has been
explained by the compartment of regulatory T-cells (Treg) that inhibit anti-tumor
cytotoxic activities. Based on these evidences, first, we assessed, by
immunohistochemistry, the characterization of intratumoral Treg cells, as well as some
cytokines related by them: TGFβ and IL-35. Our results demonstrated that FoxP3 was
present in tumors with more aggressive phenotypes: high histological grade of
malignancy (HGM), presence of neoplastic intravascular emboli and presence of lymph
node metastasis. Additionally, also showed that intratumoral FoxP3+ Treg cells were
associated with shorter overall survival (OS), both in univariate and multivariate analysis.
Tregs can secrete inhibitory cytokines (TGFβ and IL-35), inducing tumors tolerance.
Present work suggests a link between TGFβ and parameters of tumor aggressiveness,
reflecting its involvement in CMT malignant transformation. Our data demonstrated also
a positive correlation between intratumoral FoxP3, TGFβ levels, VEGF and CD31.
Moreover tumors with abundant TGFβ and with concurrent high expression of
TGFβ/FoxP3, FoxP3/VEGF, TGFβ/VEGF were associated with shorter OS time and the
TGFβ/FoxP3 tumors class retained the association with worse survival in multivariate
analysis, arising as an independent predictor of poor prognosis. IL-35 is a Treg cellsecreted
cytokine that inhibits T-cells proliferation and function and to the best of our
knowledge, this is the first study that investigates the role of IL-35 in CMT development
and clinical outcome. Our results showed that IL-35 overexpression was significantly
associated with advancement of tumor stage and unfavorable prognosis by univariate and
multivariate survival analysis. Interestingly our findings indicate, for the first time in dog
mammary tumors, the independent prognostic value of FoxP3+ Treg cells and
TGFβ/FoxP3 tumors class. Additionally the IL-35 seems to be a new biomarker to predict
the CMT clinical outcome.
For a more comprehensive approach about the role of immune cells in dog mammary
carcinogenesis, we perform a wide study focused on the intertwined signaling pathways
shared by T-lymphocytic/macrophage infiltrates and important tissue biomarkers in
mammary tumor microenvironment. We focused on relevant cell biomarkers in
mammary carcinogenesis, the COX-2, EGFR and c-kit which are often overexpressed or
mutated in this type of tumor. Present data demonstrated a significant association of high
COX-2 immunoexpression with CD3+ T-lymphocytes and MAC387 macrophages.
Tumors with concurrent high COX-2/CD3 and high COX-2/MAC expression were
associated with variables of tumor aggressiveness and shorter OS. Current results also
demonstrated that the concurrent COX-2+/EGFR+ expression was associated with higher
numbers of intratumoral CD3+ T-cells. Furthermore a significant association and a
positive correlation between CD3+ T-lymphocytes and c-kit expression were observed.
Tumors with high c-kit expression showed higher counts of CD3+ T-cells and were
associated with high HGM, presence of neoplastic intravascular emboli, presence of
lymph node metastasis, angiogenesis and shorter OS. The findings indicate that COX-2,
EGFR and c-kit pathways are important not only for the remodeling of mammary tumor
microenvironment but also could be a very important targets for tumor immunological
therapy.
Finally, in an in vitro co-culturing experiment, was our aim to prove the potential
bidirectional crosstalk between tumor cells and immune cells on COX-2 regulation. Our
data showed that co-culturing of canine mammary carcinoma cell line Sh1b and canine
peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) induced a trend of COX-2 overexpression
in mammary cancer cells. In turn, COX-2 expression by PBMCs, among them
predominantly CD68+ macrophages, was significantly attenuated by co-culture with
Sh1b. In accordance, co-culture with CD68+ differentiated THP1 (dTHP1) prompted an
intracellular production of COX-2 in Sh1b cells. The intracellular COX-2 expression
from dTHP1 decreased when they were treated with conditioned medium from cultured
Sh1b cells. Present results represents a significant advance on understanding the possible
role of COX-2 in inducing a cancer tolerogenic microenvironment in CMT namely
through a cancer associated macrophages immunomodulation.
Overall present work demonstrated that, similarly to human breast cancer, also in CMT
the inflammatory responses in mammary cancer sites are able to orchestrate hallmark-facilitating programs in tumor microenvironment.<br>FCT (“Fundação para a
Ciência e a Tecnologia”) and POPH-QREN/FSE
(“Programa Operacional Potencial Humano-Quadro de Referência Estratégico Nacional/Fundo Social Europeu”)
37
"L’anergie des lymphocytes T infiltrant les tumeurs est réversible : influence de la localisation du récepteur T par rapport au co-récepteur CD8." Université catholique de Louvain, 2009. http://edoc.bib.ucl.ac.be:81/ETD-db/collection/available/BelnUcetd-01082009-214540/.
Full text
38
Feng, Gou Jin, and 馮國津. "The role of major histocompatibility complex class II -expressing infiltrates in the CD4 T cell-regulated early tumor neovascularization." Thesis, 2013. http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/80499004472216082220.
Full textAbstract:
碩士<br>長庚大學<br>生物醫學研究所<br>101<br>Neovascularization is essential for tumor progression. Although tumor neovessels are known to be under host CD4 T cell surveillance, what makes the neovessels susceptible to CD4 T immunity remains unclear. The aim of this study is to understand the relationship among tumor blood vessels, CD4 T cells and MHCII-expressing tumor infiltrates. Previously, we have established a transplantable tumor model driven by EBV oncogene N-LMP1 in the immunocompetent mice. In the model system, we found that N-LMP1 is immunogenic, capable to induce CD4 T cell immunity to inhibit tumor early neovessel formation. To further understand the CD4 T-mediated regulation of tumor neovascularization, we hypothesized that there are MHCII-expressing cells involved in the neovessel formation, causing the susceptibility of the process for CD4 T immunosurveillance. To test the hypothesis, mice were vaccinated with N-LMP1 to induce CD4 T response (immune group) on day (-4). Mice receiving PBS were used as non-immune control group. Both groups of mice were challenged with tumor fragment on day 0. Seven days later, tumor vessels were labeled in vivo by perfusion of gelatin pre-mixed with india ink. Frozen tumor tissue sections were then immunostain for MHCII. Afterwards, images taken from the white field and fluorescent channel were quantified by computer software Image J. Total tumor area, new tumor area, vessel count and vessel total area were all inhibited in the immune group. While 70% of the total vessels were MHCII+ in the non-immune group, the number and area of MHCII+ vessels were greatly inhibited after immunization. In the meantime, MHCII- vessels were found unaffected. To further study the relationship among MHCII+ cells, neovascularization andCD4 T cells, we sorted or depleted MHCII+ cell population from monosuspended tumor tissue cells, mixed the cells with matigel to test the neovessel formation in the immune and control mice. The results from ultrasound and tissue section demonstrated that MHCII+ cells induced blood vessel formation, and the process of which was inhibited by immunization. Afterwards, the MHCII+ vessels from tumor sections were categorized according to vessel diameter to further analyze the immune target vessels. Veinlet (21~30µm diameters) and arteriole (11~21µm diameters) were found most affected by immunization. Finally, by using flow cytometry, the major tumor tissue cell alteration in immune group was found within CD31-MHCII+ and CD31+MHCIIhigh cell populations, suggesting that both the MHCII-expressing endothelial and microenvironmental cells are targeted by CD4 T cells. Taken together, this study highlights the critical role of MHCII+ tumor infiltrates in the early tumor neovascularization, which makes neovessels susceptible for CD4 T cell surveillance. Vascular MHCII expression may therefore be used as a biomarker for immune-sensitive tumor neovascularization. In addition, MHCII-expressing tumor infiltrating cells may serve as targets for future tumor vaccine development.
39
Partlová, Simona. "Nádorové mikroprostředí a význam protinádorové imunity pro klinický průběh lidských nádorových onemocnění." Doctoral thesis, 2017. http://www.nusl.cz/ntk/nusl-304030.
Full textAbstract:
Cancer development and progression vary depending on tumor type, localization, invasion, immunogenicity and the ability of immune system to become activated. There are frequent interactions between tumor cells and immune cells, occuring locally at the site of primary tumor or distally through paracrine signalling of various mediators and cytokines. The main subject of this PhD thesis is to study key factors and aspects of immune response in cancer patients. In the first part, we analyzed immune cells infiltrating tumor tissues of ovarian cancer patients at different stages of disease. We focused on the dynamics of immune response, primarily on frequency of individual T lymphocyte populations in peripheral blood and tumor infiltrating T lymphocytes in tumors of early and advanced stages of ovarian cancer. We found that during disease progression there is a gradual decrease of proinflammatory Th17 and Th1 immune responses and a specific recruitment of regulatory T cells to the tumor site, which results in a significant immune suppression in the tumor microenvironment. In the second part, we demonstrated that the character of immune response in HPV-positive head and neck cancer patients is very different from the patients with tumors not associated with HPV infection. In HPV-positive patients, significantly...
40
Pelletier, Sandy. "Le "Transforming Growth Factor" (TGF)-a comme antigène tumoral potentiel pour le cancer du rein." Thèse, 2007. http://hdl.handle.net/1866/15414.
Full text
41
Novák, Jaromír. "Imunoskóre ve 3D tkáních." Master's thesis, 2020. http://www.nusl.cz/ntk/nusl-436103.
Full textAbstract:
Solid tumors are complex structures comprising besides the cancer cells vasculature, extracellular matrix (ECM), soluble molecules and a plethora of various other cell types. These components form a so-called tumour microenvironment. From the numerous cell types that are part of tumor microenvironment, tumor infiltrating lymphocytes (TILs) play a major role in patient prognosis. Their presence is also of major importance with regard to new biological therapies based on immune checkpoint inhibitors. Crucial role of TILs is also reflected by the new approaches in cancer diagnostics namely by Immunoscore method (currently used in clinical settings). Immunoscore is based on localization and quantification of CD3+ and CD8+ TILs in thin histological sections of tumor tissue. The question remains to which extent the information obtained from 2D slices reflects the situation in tumor microenvironment considering its spatial heterogeneity. The development of new methodological approaches allowing evaluation of histological information in 3D is the key to answer this question. The theoretical part of this work first describes the heterogeneity of the tumor microenvironment and the role of immune cells within it. Then, the role of spatial heterogeneity and its possible influence on the histopathological...
42
Correia, Jorge André Agostinho Alves. "Abordagem ao cancro da mama triplo negativo : paradigma atual e perspetivas futuras." Master's thesis, 2018. http://hdl.handle.net/10451/42297.
Full textAbstract:
Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2018<br>O cancro da mama triplo-negativo (TNBC) insere-se num conjunto heterogéneo de tumores definido pela ausência de expressão do recetor de estrogénio (ER), recetor de progesterona (PR) e recetor do fator de crescimento epidermal humano 2 (HER2). O TNBC caracteriza-se por uma história natural agressiva, sendo responsável por cerca 20% de todos os cancros da mama invasivos. Tem sido associado à raça africana, idade mais jovem, obesidade, alto grau histológico e estadio mais avançado à data do diagnóstico. Considerando a escassez de moléculas alvo e farmacologia dirigida, o tratamento sistémico padrão baseia-se em regimes quimioterapêuticos de antraciclina e taxanos. O TNBC evidencia alta quimio-sensibilidade, tal como comprovam as elevadas taxas de resposta completa patológica (pCR) obtidas após a quimioterapia neoadjuvante. Este tipo de abordagem, nalguns casos, permite ainda a realização de cirurgia conservadora da mama. Subsequentemente, observam-se taxas mais elevadas e precoces de recidiva à distância comparativamente com os restantes subtipos de cancro da mama, apresentando uma taxa sobrevivência precária, uma vez que as opções terapêuticas limitadas estão associadas a uma fraca resposta e de curta duração. Recentemente, foram identificadas características moleculares preponderantes no sentido de subdividir o espectro do TNBC mais aprofundadamente, possibilitando o desenvolvimento de terapêuticas sistémicas dirigidas de acordo com as suas diferentes subclasses e distintas vias biológicas alteradas, tais como a proliferação, reparação do DNA, apoptose, angiogénese, imuno-modelação e metástase. Consequentemente, várias são as abordagens atualmente sob investigação, entre elas inibidores de checkpoint imune, agentes da família das Platinas, inibidores Poli-ADP-ribose polimerase (PARP), inibidores da via PI3K-Akt-mTOR, inibidores do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), inibidores do recetor do fator de crescimento epidermal (EGFR) e inibidores do recetor androgénio (RA). Até 20% das doentes diagnosticadas apresentam mutações na linhagem BRCA, denominado o fenótipo “BRCAness”, que pode ser utilizado para selecionar casos com maior probabilidade de responder a terapias de danificação do DNA, como as Platinas e/ou inibidores da PARP. Existe um subgrupo de TNBC que evidencia elevado grau de linfócitos infiltrantes do tumor (TIL), correlacionando-se com menor risco de recidiva da doença e maior probabilidade de sucesso da quimioterapia. Neste contexto, alguns inibidores de checkpoint imune, incluindo os inibidores PD-1 e PD-L1, estão sob investigação no cenário de TNBC metastático. Durante esta revisão, serão discutidos a epidemiologia, fatores de risco, história natural da doença, variáveis prognósticas, estadiamento, características imagiológicas, clínicas, biopatológicas e moleculares do TNBC. Adicionalmente, serão abordadas as opções de terapêuticas preconizadas atualmente e possíveis estratégias de tratamento futuras, desenvolvidas de acordo com as características particulares de cada subtipo de TNBC e que em breve poderão assumir uma considerável preponderância na obtenção de outcomes mais profícuos.<br>Triple-negative breast cancer (TNBC) is a heterogeneous group of tumors defined by the lack of expression of estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR) and human epidermal growth factor receptor 2 (HER2). TNBC is characterized by an aggressive natural history and accounts for around 20% of all invasive breast cancers. It has been associated with African race, younger age, obesity, histologic higher grade and more advanced stage at diagnosis. Due to lack of drug-targetable receptors, chemotherapy with anthracycline and taxane-based chemotherapy has been the mainstay of the recommended systemic treatment. TNBC is sensitive to chemotherapy as demonstrated by high pathological complete response (pCR) rates achieved after neoadjuvant chemotherapy. This approach also allows for breast-conserving surgery, in some cases. Subsequently, early and higher rates of distant relapse are observed in TNBC when compared to other breast cancer subtypes, showing poor overall survival, since treatment options are few, response rates are weak and lack durability. Important molecular characteristics have now been identified that can further subclassify TNBC, possibly providing alternative systemic target-therapies for each subclass that encompasses several biological processes, such as proliferation, DNA repair, apoptosis, angiogenesis, immune modulation and metastasis. Various therapeutic approaches are consequently being investigated, including immune checkpoint inhibitors, platinum compounds, poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) inhibitors, PI3K pathway inhibitors, vascular endothelial growth factor (VEGF) inhibitors, epidermal growth factor receptor (EGFR) inhibitors and androgen receptor (AR) inhibitors. Up to 20% of patients diagnosed have germline BRCA mutations, called “BRCAness” phenotype, which can be used to select patients likely to respond to DNA-damaging therapy, such as platinums and/or PARP inhibitors. A subgroup of TNBCs shows a high degree of tumor-infiltrating lymphocytes (TIL), that also correlates with a lower risk of disease relapse and a higher likelihood of benefit from chemotherapy. Immune checkpoint inhibitors, including PD-1 and PD-L1 inhibitors, are under investigation in the setting of metastatic TNBC. In this review, it will be analyzed the epidemiology, risk factors, natural history, prognostic variables, staging, imagiological features, clinical, biopathologic and molecular characteristics of TNBC. Furthermore, it will be discussed current standard treatment options and emerging therapeutic strategies that aim to match each distinct subclasses of TNBC, which are of utmost importance as researchers design future approaches to improve patient outcome.
43
Grange, Cécile. "Étude de l’expression de la molécule d’adhérence CD146 dans les lymphocytes T." Thèse, 2014. http://hdl.handle.net/1866/11250.
Full textAbstract:
Les tumeurs solides sont infiltrées par des cellules immunes (TIIC) dont la nature, la
fonction et la composition varient d’un patient à l'autre. Ces cellules inflammatoires
influencent l'invasion tumorale en contrôlant la croissance et le potentiel métastatique d’une
tumeur. Ainsi, il est proposé d’utiliser cette infiltration comme outil diagnostic et pronostic de
routine.
Certaines cellules sont bien connues pour jouer un rôle important dans le contrôle de la
progression tumorale, comme c’est le cas des lymphocytes T cytotoxiques CD8+ alors que
d’autres possèdent un rôle contradictoire. Étant donné la dépendance des tumeurs sur
l’équilibre entre ces différentes cellules, il est important d’identifier les fonctions précises des
cellules immunes au sein de la tumeur. De nombreuses études sont réalisées afin d’identifier
des marqueurs descriptifs du phénotype et la fonction des cellules immunes dans la tumeur.
Ce projet de doctorat se divise en deux parties : 1- Identifier la méthode de
désagrégation des tissus tumoraux altérant le moins la biologie des TIIC pour leur
caractérisation. 2- Caractériser l’expression de la molécule d’adhérence CD146 dans les TIIC
et en identifier l’origine.
L’identification de marqueurs pour la caractérisation phénotypique et fonctionnelle des
TIIC a été réalisée, entre autres, par la détection de protéines exprimées par la cellule. Dans la première partie de ce projet, nous avons démontré que les méthodes utilisées pour désagréger les tissus tumoraux dans le but d’isoler les TIIC induisent des changements dans la biologie de ces cellules ce qui peut fausser les conclusions qui en dérivent. Nous avons donc comparé l'impact de trois méthodes de désagrégation : une dissociation mécanique utilisant la MédimachineTM et deux digestions enzymatiques utilisant une collagénase de type I seule ou combinée à de la collagénase de type IV et de la DNase I de type II. Nous nous sommes intéressés à l'effet de ces méthodes sur des paramètres tels que la viabilité cellulaire, l’altération des protéines de surface et la capacité des cellules à proliférer. Nous avons démontré que ces méthodes affectent la viabilité des cellules de manière comparable, alors que la détection de certaines protéines de surface et la capacité de proliférer est réduite/inhibée par les traitements enzymatiques. Nous concluons qu’une méthode mécanique utilisant la MédimachineTM est mieux adaptée à la caractérisation des TIIC afin de conserver leurs propriétés.
Dans la deuxième partie de notre projet, nous avons adapté cette méthode à la caractérisation des TIIC. Nous avons porté une attention particulière à la molécule
d’adhérence CD146 dont l’implication dans la migration des cellules immunes à travers
l’endothélium vers les sites d’inflammation est de plus en plus étudiée dans les maladies autoimmunes.
Nous avons mis en évidence une augmentation des proportions de cellules immunes
exprimant CD146 dans les tumeurs comparativement au sang de patients de cancers. Cette
expression est induite par les cellules tumorales tout en étant accrue par la nécrose de celles-ci.
Nous démontrons que ces cellules sont majoritairement des lymphocytes T CD4+ présentant
un profil immunosuppressif.
En conclusion, nos résultats suggèrent que CD146 participe à la mise en place du
contexte immunitaire dans la tumeur et augmente la capacité de migration des lymphocytes T
CD4+. L’induction par les cellules tumorales de cette molécule d’adhérence dans les cellules
suppressives pourrait contribuer aux mécanismes immunorégulateurs mis en place par la
tumeur. CD146 pourrait être un marqueur d’intérêt pour l’identification des cellules
immunosuppressives et pour le développement de nouvelles thérapies.<br>Solid tumors are infiltrated by immune cells (TIIC), which vary in function and
proportion from patient to patient. These inflammatory cells may contribute positively or
negatively to tumor invasion, by controlling the growth and the metastatic potential of tumors.
It has therefore been proposed to use infiltration as a diagnostic and prognosic tool.
Certain cells play an important role in the control of tumor progression, as is the case
of cytotoxic CD8+ T lymphocytes, whereas others present an ill-defined role. Since the
progression of tumors depends on the balance between these cell types, it is important to
identify their specific functions within the tumor. Many studies have therefore focused on
identifying markers, which are suggestive of phenotype and function of immune cells in the
tumor.
This project is divided into two parts: 1 – The identification of a tumor tissue
disaggregation method which induced minimal effects on TIIC biology. 2 – The
characterization of the expression of the adhesion molecule CD146 in TIIC and understand its
regulation.
Marker identification for phenotypic and functional characterization of TIIC is carried
out by detection of cell proteins. In the first part of this project, we showed that methods used
to disaggregate tumor tissue in order to isolate TIIC induce changes in cell biology, which
may alter results. We thus compared the effects of three disaggregation methods: mechanical
disruption using MedimachineTM and two enzymatic digestions using a type I collagenase
alone or combined with type IV collagenase and type II DNase I, on parameters such as cell
viability, cell surface marker detection and cell proliferation. We showed that these methods
affect cell viability in a comparable manner, whereas the detection of certain surface proteins
and proliferative capacity of cells was reduced by enzymatic treatments. We concluded that a
mechanical method using MedimachineTM is more suitable for the characterization of TIIC.
In the second part of our project, we adapted this method to the characterization of
TIIC. We focused on CD146, an adhesion molecule that was shown to be involved in immune cell migration in autoimmune disease. We demonstrated an increase of CD146+ immune cells
in tumors compared to the blood of the same patients. This expression was shown to be
induced by tumor cells and increased by necrosis. We showed that these cells are
predominantly CD4+ T lymphocytes with an immunosuppressive profile.
In conclusion, our results suggest that CD146 is involved in the establishment of the
tumor immune environment and may increase the migratory capacity of CD4+ T cells toward
tumors. Tumor cell induction of this adhesion molecule by suppressor cells could contribute to
the immunoregulatory mechanisms established by tumors. CD146 may be a useful marker for
the identification of immunosuppressive cells and development of new therapies.
44
McNicoll, Yannic. "L'impact de l'infiltration lymphocytaire sur le pronostic de l'adénocarcinome du pancréas." Thèse, 2014. http://hdl.handle.net/1866/11548.
Full textAbstract:
L’objectif principal de cette étude est de déterminer la valeur pronostique de l’infiltrat lymphocytaire dans l’adénocarcinome du pancréas.
Les densités des lymphocytes T CD3+, CD4+, CD8+, FOXP3+ et CD45RO+ intratumoraux (T) et péritumoraux (PT) de 111 spécimens ont été mesurées avec des micromatrices tissulaires. Un Index Lymphocytaire (IL) a été créé basé sur les valeurs des CD4+ T, CD8+ PT et le ratio CD3+ T/PT regroupant les patients selon que les tumeurs présentaient aucune (IL---), 1 à 2 (IL+/-) ou les 3 caractéristiques immunitaires favorables (IL+++). La survie médiane des patients atteints d’un cancer du pancréas est significativement différente selon la catégorie d’index lymphocytaire; elle était de 14 mois pour IL---, de 19 mois pour IL +/- et de 29 mois pour IL+++ (p=0,01). L’IL est un facteur indépendant de survie en analyse multivariée ainsi que la différenciation tumorale et l’utilisation d’un traitement adjuvant.
L’IL est un facteur pronostique de survie des adénocarcinomes du pancréas réséqués et devrait pouvoir permettre une meilleure classification des patients.<br>The main objective of this project was to determine the prognostic significance of T-lymphocytes densities in pancreatic adenocarcinoma.
Using tissue microarrays, CD3+, CD4+, CD8+, CD45RO+, and FOXP3 T-cells were quantified by immunohistochemistry in the intratumoral (T) and peritumoral (PT) compartments of 111 specimens.
An immune score (IS) based on T CD4+ and PT CD8+ counts and T/PT CD3+ ratio grouped patients into IS---, IS+/- and IS+++ if none, 1 or 2, or all 3 of the favorable immune features were present, respectively. Patients have different overall survival (OS) depending on their IS status. Patients IS--- have a median OS of 14 months and of 19 months and 29 months for those IS+/- and IS+++ respectively (log-rank p=0.01). By multivariate analysis, IS was independently associated with survival as were the histological grade and adjuvant therapy.
An immune score that combines specific T-cell location and density may have prognostic value in patients with resected pancreatic adenocarcinoma, independently from current pathologic features.
45
Krösel, Juliane Franziska. "Die Charakterisierung der induzierbaren Stickstoffmonoxidsynthase im murinen RENCA-Nierenzellkarzinommodell unter spezieller Berücksichtigung tumorassoziierter Makrophagen, der Gefäßdichte und Tumorhypoxie." Doctoral thesis, 2013. http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-000E-0B5B-A.
Full textAbstract:
Einleitung: Ziel dieser Arbeit war es, das RENCA-Nierenzell-Karzinommodell anhand der Hypoxie-induzierten Nekrosen, der Makrophageninfitration sowie der iNOS-Expression und –aktivität zu charakterisieren.
Methoden: Für die Erzeugung lokaler Tumoren, wurden Balb/c-Mäusen in vitro kultivierte RENCA-Zellen subkutan appliziert. Die Quantifizierung des Makrophageninfiltrates sowie die Charakterisierung der Hypoxie im Tumorgewebe erfolgten mittels immunhistochemischer Färbungen. Für die Darstellung der Stickstoffmonoxid-Aktivität kamen neben der Immunhistochemie die Reverse Transkriptase Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) zur Anwendung. Der Nitrit-Gehalt der Tumorproben wurde mittels Griess-Reaktion bestimmt.
Ergebnisse: Spontan hypoxische Tumornekrosen sind assoziiert mit einer signifikant geringeren Gefäßdichte. Das Ausmaß der Nekrosen korreliert mit dem Alter der Tumoren. Alte Tumoren (28 Tage) zeigen eine höhere Makrophageninfiltration als junge Tumoren (12 bis 19 Tage). Obwohl die iNOS-Expression auf Proteinebene keinen signifikanten Unterschied zwischen alten und jungen Tumoren ergab, findet sich auf mRNA-Ebene eine signifikant erhöhte iNOS-Expression in alten Tumoren. Hinsichtlich der αActinin-4-Expression konnte kein signifikanter Unterschied gesehen werden.
Schlussfolgerung: Bei annähernd gleicher iNOS- und αActinin-4-Expression beziehungsweise erhöhter iNOS-mRNA-Expression ist die Konzentration an Nitrit in Tumoren mit hypoxischer Nekrose reduziert. Daraus kann man schließen, dass die Aktivität der NO-Synthase unter hypoxischen Bedingungen reduziert ist. Dies stützt wiederum die Vermutung, einer die iNOS-Aktivität steuernden normoxie-abhängigen Assoziation von αActinin-4 und iNOS. Die Aktivitätsinhibierung der iNOS könnte somit ein Mechanismus sein, durch den Hypoxie die Zytotoxizität von TAM inhibiert. Die abnehmende Gefäßdichte mit zunehmendem Tumoralter könnte möglicherweise auf eine Regression der Tumorgefäße zurückzuführen sein. Denkbar wäre, dass die Gefäßregression durch makrophagenabhängige Zytokine begünstigt wird.