Academic literature on the topic 'Vaisseaux sanguins – Greffe'

Situation du sujet : En dépit des progrès réalisés en matière d'immunosuppression, la maladie vasculaire chronique (MVC) reste la première cause de perte du greffon après un an. Les modèles expérimentaux apparaissent indispensables pour une meilleure compréhension des mécanismes impliqués. Les modèles classiques sont limités par des difficultés de transposition des résultats à des situations cliniques chez l'homme. Objectif : Le but de ce travail était de développer un modèle d'étude original de la MVC. Il s'agissait de reconstituer de façon reproductible un conflit allogénique humain in vivo, chez des souris immunodéficientes. La mise au point de ce modèle supposait la réalisation de 4 étapes intermédiaires : 1. La mise en place d'un protocole de prélèvement à fins scientifiques chez les donneurs d'organes. 2. Le développement d'une technique assurant une humanisation reproductible de souris immuno- déficientes. 3. La mise au point d'une technique chirurgicale de greffe du segment artériel mésentérique humain chez la souris. 4. La mise en évidence de lésions de RVC dans le groupe de souris greffées humanisées en combinaison allogénique et l'absence de lésions dans le groupe contrôle isogénique. Matériels et méthodes : Un protocole de prélèvement de tissus humains chez les donneurs d'organes a été mis en place, à l'échelle régionale après avis favorables de l'Etablissement Français des Greffes et du Comité d'Ethique du CHU de Toulouse. Des souris SCID/Beige déficientes pour l'immunité T, B et NK ont été utilisées après vérification de l'absence d'immunité résiduelle (caractère " leaky "). Une première partie de ce travail a consisté à la mise au point du protocole d'humanisation : Des souris ont été réparties en 5 groupes recevant 5 à 100 millions de splénocytes humains et en 2 groupes recevant 5 ou 10 millions de cellules médullaires. Un prélèvement sanguin hebdomadaire permettait un typage des cellules humaines circulantes par cytométrie en flux, et dosage des IgG humaines par technique ELISA. Après sacrifice, les organes lymphoïdes étaient examinés en immunohistochimie et en cytométrie en flux à la recherche de cellules humaines. Dans une deuxième partie du travail, des souris SCID/Beige (non " leaky ") ont subi la greffe d'un segment d'artère mésentérique humaine issue de donneurs d'organes. Cinq à huit greffes ont été réalisées dans les 48 heures suivant chaque prélèvement multi organes. .
Background : In spite of progress in the field of immunosuppressive treatment, the allograft vasculopathy remains the first cause of graft loss after one year. The expérimental models appear essential for a better understanding of the implied mechanisms The traditional models are limited because of difficulties of transposition of the results to clinical situations in human. Goals : The goal of this work was to develop an original model to study AV consisting of the in vivo reconstitution in immunodeficient mice of human allogeneix conflicts. To achieve this goal, four intermediate stages were necessary : 1. The harvesting of human tissues in human cadaveric organ donors 2. The reconstitution of complete and functional human immune system in immunodeficient mice 3. The graft of human arterial grafts in mice 4. The reconstitution of expérimental groups (control, isogeneic, allogeneic) to valid the expérimental model of AV in allogeneic group and absence of AV in the control and isogeneic groups. Methods : The harvesting of human tissues in human cadaveric organ donors was organized in the whole Midi Pyrénées area after authorization of the ethic commitee of our insitution and of the French Transplantation Agency. Pièces of mesentery and segment of spleen were removed from the cadaveric organ donors. Defective SCID/Beige mice for immunity T, B and NK were used qfter checking of the absence of residual immunity (" leakiness "). A first part of this work focused on the reconsituttion of the human immune system in SCID/Beige mice : Mice were divided into 5 groups receiveing from 5 to 100 human illion splenocytes and into 2 groups receiving 5 to 10 million medullary cells. A weekly blood sample allowed typing of the circulating human cells (flow cytometry) and détection of human IgG (ELISA). After sacrifice, the lymphoid bodies were examined in immunohistochimy and flow cytometry. The second part of this work focused on the study of AV. SCID/Beige mice received infra rénal transplantation of segments of terminal collatéral of human mesenteric arteru using the " sleeve " anastomosis technique. Five to eight transplantation were carried out af in the 48 hours following each multi-organ harvesting. The transplantation was associated with an isogeneic immune reconstitution in 6 mice, while 12 mice underwent allogeneic reconstitution. .

En cas de grande perte de substance ischémique du membre inférieur, l’existence simultanée de problèmes de revascularisation et de couverture des pertes de substances est difficile à résoudre avec un risque élevé d’amputation du membre. Pour pallier ces difficultés nous avons proposé une nouvelle technique : le « lambeau-pontage » (LP). Cette technique correspond à la greffe d’une seule unité anatomique composée d’un axe artériel qui procure un greffon artériel et d’un lambeau musculaire irrigué par une branche collatérale de ce greffon. Au-delà de son caractère combiné cette technique présente plusieurs avantages théoriques: l'utilisation de matériel artériel autologue pour le pontage, le bénéfice hémodynamique lié à l’augmentation de débit du pontage grâce au lambeau qui y est attaché, la diminution du nombre d’anastomoses artérielles. Le but de ce travail était de définir les bases anatomiques du LP, d’explorer les effets hémodynamiques de cette technique et d’analyser la première expérience clinique. Dans un premier temps, 40 préparations anatomiques ont été réalisées sur 20 cadavres après injection de Rhodorsil. Cette étude a montré la faisabilité anatomique du LP, elle a déterminé la longueur et les diamètres du greffon artériel basé sur l’artère subscapulaire et l’artère thoracodorsale et elle a défini les variations anatomiques de la branche destinée au lambeau, représenté par le muscle dentelé antérieur. Dans un deuxième temps, nous avons démontré la faisabilité anatomique et chirurgicale et étudié l’hémodynamique du LP sur le modèle porcin. Les mesures hémodynamiques ont montré l’augmentation de 50% (p<0,05) du débit sanguin au niveau du pontage lors de l’introduction de la circulation supplémentaire liée au lambeau musculaire. Les données obtenues ont mis en évidence le comportement compilant et adaptif de l’autogreffe artérielle après sa transplantation. Dans un troisième temps, nous avons analysé les résultats cliniques de l’utilisation du LP chez 20 patients. Ces résultats ont montré que la survie des patients à 2 ans était de 94% ; la perméabilité du LP de 94% et le sauvetage de membre de 85%. Ce travail a permis de déterminer l’unité anatomique utilisable pour le LP, de démontrer les qualités hémodynamiques du LP et sa faisabilité clinique. Le résultat clinique est le sauvetage de membres jusqu'à maintenant voués à une amputation
In case of important ischemic tissue loss of the lower limb the simultaneous problems of revascularization and cover are difficult to solve without high risk of amputation of the limb. In order to overcome these difficulties we proposed a new technique: the bypass flap (BF). This technique consists in a unique anatomical unit composed of an arterial axis which yields an arterial graft and a muscle flap sustained by a collateral branch of this graft. A part from this combined aspect, the technique presents further theoretical advantages: Use of autologous arterial material for the bypass, hemodynamic advantage with the increase of the bypass flow due to the attached muscle flap, diminution of the number of arterial anastomoses. The aim of this work was to define the anatomical bases of BF, to explore the hemodynamic effects of this technique and to analyse the first clinical experience. First, 20 cadavers were used for 40 anatomical preparations after injection of Rhodorsil. The study showed the anatomical feasibility of BF. It defined length and diameter of the arterial graft based on the subscapular and the thoracodorsal arteries, and it defined the anatomical variations of the branch to the flap in the form of serratus anterior muscle. Second, we demonstrated the anatomical and surgical feasibility as well as the hemodynamic effects of BF in the porcine model. The hemodynamic measures showed the 50% increase (p<0,05) of the blood flow at the level of the bypass with the introduction of the additional branches of the muscle flap. The data thus obtained evidenced the compliance and adaptability of the arterial autograft after transplantation. Third, we analysed the clinical results of the use of BF in 20 patients. They showed a 94% survival rate at 2 years; 94% patency of BF and 85% limb salvage. This study allowed to define the anatomical unit to be used for BF, to show the hemodynamic advantages and clinical feasibility of BF. The clinical result is the salvage of limbs until now doomed to amputation

Lorsque des vaisseaux autologues ne sont pas disponibles pour faire un pontage, des greffons synthétiques sont utilisés mais avec des taux d’échec élevés. En effet, malgré leurs bonnes propriétés mécaniques, la surface synthétique de ces greffons entraîne de la thrombose et de l’hyperplasie intimale ayant pour conséquence une mauvaise perméabilité du substitut à long terme pour de nombreuses applications. Par ingénierie tissulaire, des greffons vasculaires entièrement biologiques et humains ont déjà été produits par roulage de feuillets de matrice extracellulaire synthétisée par des fibroblastes dermiques humains in vitro. Grâce à une nouvelle méthode d’assemblage basée sur une approche textile, des greffons ont été produits trois fois plus rapidement. Pour ce faire, le feuillet a été découpé en fils afin de permettre la construction d’un substitut vasculaire par tissage. Cette thèse comporte trois articles. Le premier visait à montrer la composition riche de la matrice, décrire l’organisation de son réseau complexe de collagènes et démontrer que la dévitalisation par séchage de la matrice n’a pas affecté significativement cette organisation. Le deuxième avait pour but de décrire les propriétés mécaniques des fils en fonction du torsadage et/ou de l’âge de la matrice ainsi que l’effet sur la force de différents traitements nécessaires au processus de fabrication. Les différentes applications de l’approche textile dans la construction de structures complexes ainsi que les propriétés mécaniques des substituts tissés ont également été évaluées. Le troisième article a montré la faible réponse inflammatoire ainsi que le potentiel d’intégration et de remodelage de la matrice in vivo. Par ailleurs, la décellularisation n’a pas montré de résultats supérieurs à la dévitalisation, permettant ainsi de s’affranchir d’une étape de fabrication supplémentaire et potentiellement délétère à l’organisation biologique de cette matrice. En conclusion, cette thèse constitue la première démonstration de la fabrication de textiles humains mécaniquement très forts mais sans utilisation de matériel exogène. La dévitalisation couplée à l’approche textile ont permis de créer un modèle allogénique plus simple, plus rapide et moins coûteux mais avec un potentiel d’intégration in vivo intact. Ce modèle sera très prochainement étudié par implantation à long terme dans la circulation sanguine
When autologous blood vessels are not available for bypass surgery, synthetic grafts are used but display high failure rates. Indeed, despite their good mechanical properties, their synthetic surface lead to thrombosis and intimal hyperplasia, which cause poor long-term patency in many applications. Using tissue engineering, completely biological and human vascular grafts have been produced by rolling sheets of extracellular matrix synthesized by dermal human fibroblasts in vitro. Using a new assembly technique based on a textile approach, grafts were produced three-time faster. To do so, sheets were cut into yarns to construct vascular substitute by weaving. This manuscript includes three articles. The first one aimed at showing the rich composition of the matrix, describing the organization of its complex network of collagens and demonstrating that the devitalization by drying the matrix did not significantly affect this organization. The second one described the mechanical properties of the yarns depending on the twisting, matrix age or different treatments useful for the manufacturing process. It also demonstrated some of the assembly techniques possible with this human yarn, as well as its possible use as a suture or to build a vascular graft. The third article showed the survival of the yarns subcutaneously implanted for 6 month in nude rats. The implants created little inflammatory response, were mildly remodeled and kept a significant mechanical strength. Decellularization did not show results improvement compared to the simple devitalization, demonstrating that the remaining cellular fragments were not a meaningful activator of the innate immune system. To conclude, this thesis is the first demonstration of the production of human textiles, without using any exogenous material and that are mechanically very strong. Both the devitalization and the textile approach have allowed to create a simpler allogeneic model, faster and cheaper but with an intact potential of integration in vivo, that will be studied very soon with a long-term implantation of the textile in the bloodstream