Academic literature on the topic 'Virus de l'hépatite B – génétique'

Les traitements actuels visant a inhiber la replication du virus de l'hepatite b (vhb) chez les patients chroniquement infectes, et ainsi a prevenir l'evolution des hepatites b chroniques vers l'hepatocarcinome, ont une efficacite insuffisante. Des donnees recentes suggerent que les approches immunotherapeutiques, et en particulier l'immunisation par adn nu ou vaccin genetique, pourraient etre particulierement interessantes pour le controle de l'infection chronique par le vhb. Cette nouvelle approche de vaccination est basee sur l'induction de puissantes reponses immunitaires par injection de l'adn exprimant une proteine antigenique virale. L'objectif de notre travail etait d'utiliser le modele du virus de l'hepatite b du canard (dhbv), etroitement apparente au vhb, afin d'evaluer l'efficacite de la vaccination genetique pour la protection et la therapie de l'hepatite b. Dans un premier temps, nous avons mis au point l'immunisation par adn nu de canards avec un plasmide codant pour la grande proteine d'enveloppe (l) du dhbv. Nos resultats montrent que l'immunisation d'animaux adultes non infectes avec ce plasmide induit une reponse humorale forte, specifique de la proteine l du dhbv, et capable de neutraliser le pouvoir infectieux du virus. De plus, les anticorps induits sont transmis verticalement de la cane immunisee aux canetons, via l'uf, et sont capables de les proteger contre une epreuve virulente par le dhbv. Dans un deuxieme temps, nous avons demontre que la combinaison de l'immunisation par adn avec la production d'anticorps dans les ufs permet d'obtenir rapidement des quantites tres importantes d'anticorps specifiques de l'enveloppe virale et neutralisants (brevet depose). De plus, l'immunisation d'animaux nouveau-nes par adn nu non seulement n'induit pas d'immunotolerance mais est egalement capable d'induire une reponse primaire memoire superieure a celle induite par l'immunisation avec une proteine recombinante. Enfin, l'immunotherapie par adn nu d'animaux chroniquement infectes par le dhbv induit une baisse de la replication virale chez tous les animaux traites, et meme dans quelques cas l'elimination de la forme d'adn viral superenroule intrahepatique responsable de la chronicite de l'infection. L'ensemble de ces resultats suggere que l'immunisation par adn pourrait representer la base de nouvelles approches protectrices et therapeutiques de l'infection par le vhb.

Le polymorphisme génétique du virus de l’hépatite B (VHB) a déjà été étudié pourtenter de comprendre les facteurs viraux influençant l'évolution de la maladie, mais les étudessont discordantes. Ceci peut être lié au fait que les précédents travaux n’ont été menés quedans des populations avec une faible variété de génotypes et présentant des charges viralesplasmatiques (CVP) élevées.Nous avons donc étudié la variabilité du génome complet du VHB chez 422 individusinfectés chroniquement, naïfs de traitements anti-viraux et dont 38% présentaient une CVPinférieure à 103 UI/mL. L’optimisation de l’amplification par PCR du génome complet duVHB nous a permis de séquencer en technique Sanger plus de 90% du génome pour 320échantillons. Le séquençage direct a mis en évidence des co-infections. Ceci a été confirmé enséquençage clonal par pyroséquençage de 27 échantillons qui a montré des proportions departicules défectives variables mais toujours en co-infections avec des sous-populationssauvages. Le génotypage des séquences obtenues par technique Sanger a montré une grandereprésentativité des génotypes les plus fréquents (A à E) ainsi que 60 potentiels recombinantsinter-génotypiques. Cependant le séquençage clonal par pyroséquençage et clonage vectorielclassique de ces derniers montre la présence de co-infections de plusieurs génotypes ou laprésence de génotypes intermédiaires entre génotypes proches. Ceci est en défaveur derecombinaison par échange de matériel génétique comme ce qui a été suggéré dans lalittérature.Cette étude sera complétée par l’analyse de corrélation entre les polymorphismes et lesmarqueurs de mauvaise évolution de la pathologie<br>The genetic polymorphism of hepatitis B virus (HBV) has been investigated tounderstand its impact on disease evolution, with discordant results. This could be due to thenarrow range of genotype and plasmatic viral load in these studies.We analysed complete genome variability of circulating HBV, in 422 chronicallyinfected patients. All were naive of anti-viral treatement and 38% had a plasmatic viral loadbelow 103 UI/mL. After optimisation of full length genome PCR amplification, we obtainedSanger sequences for more than 90% of HBV genome in 320 samples. We detected by directsequencing multiples co-infections that were confirmed by clonal pyrosequencing in 27samples. Defective viruses were always observed in co-infection with wild type virus. Directsequences showed a large representation of the most frequent genotypes (A to E), but also 60potential inter-genotypic recombinants. Clonal pyrosequencing and vectorial sequencingshowed that these potential recombinants were co-infections with different genotypes orintermediate genotypes located between close genotypes. These observations are incontradiction with the hypothesis described in the literature on recombination by geneticmaterial exchange.This study will be completed by a correlation analysis between the polymorphisms andmarkers of bad prognosis during HBV-induced disease

La technique d'amplification de l'adn ou polymerase chain reaction (pcr) du fait de son extreme sensibilite a de multiples applications dans le domaine du diagnostic des infections virales et l'etude approfondie des phenomenes qui leur sont associees. Nous avons applique cette technique au diagnostic et au suivi des infections chroniques par le virus de l'hepatite b humaine (vhb) et montrer en particulier la persistance du virus apres traitement antiviral et meme apres seroconversion hbs/anti-hbs indiquant la guerison du malade. C'est cependant dans les infections atypiques ou toutes les autres techniques diagnostiques s'averent insuffisantes que la pcr est precieuse. Ainsi nous avons analyse l'hypothese de l'existence d'un agent responsable d'hepatite non-a, non-b post-transfusionnelle (hpt). Trois donneurs et 2 receveurs impliques dans deux cas d'hpt sans aucun marqueur serologique du vhb ont ete etudies. Des sequences d'adn et vhb ont pu etre identifiees dans le serum et les lymphocytes des donneurs et receveurs impliques. L'absence de changement significatif au niveau de ces sequences permet de supposer que la transmission simultanee du virus de l'hepatite c (vhc) demontree chez ces patients est a l'origine du caractere silencieux de ces infections par le vhb. Une des explications possible a la persistance du vhb dans ces infections atypiques est l'existence de virus non ou peu repliquant dans les cellules lymphoides. Nous avons donc analyser la capacite du vhb a se repliquer au sein des lymphocytes infectes et montrer la presence d'adn et d'arn viral dans ces cellules

L'infection chronique ou occulte par le virus de l'hépatite B (HBV) est l'un des facteurs de risque les plusimportants pour le développement de carcinome hépatocellulaire viro-induit. Malgré la petite taille dugénome et les contraintes imposées par l'organisation de ce génome, le HBV présente une grandevariabilité génétique qui est le résultat des erreurs générées lors de l'étape de reverse transcription maisaussi, lors des processus de sélection et d'adaptation. Durant l'infection, une relation étroite hôte-viruss'établit. La population virale est caractérisée par la présence de quasi-espèces pouvant influencerl'évolution de la maladie hépatique et favoriser les phénomènes d'échappement. Le but de notre travail aété 1) d'étudier la variabilité virale associée aux infections occultes et l'impact de certaines modificationsde l'AgHBs (sY100C) sur la reconnaissance des tests de détection enzymatiques, et l'impact des mutations(sK122R, sD144E) sur la reconnaissance des anticorps anti-HBs d'un patient 2) de développer un nouveloutil d'amplification de génomes entiers de HBV que nous avons appliqué à l'étude préliminaire de quasiespècesd'un mutant Core. Cet outil d'amplification est plus sensible que les techniques existantes, et ilpermet l'étude des propriétés moléculaires et fonctionnelles des isolats virales. En conclusion, nous avonspu montrer que les processus d'échappement sont complexes, et font intervenir des facteurs du virus et del'hôte. Ce travail contribue à l'amélioration de la compréhension de la biologie de l'infection par le HBV,et illustre la complexité des interactions hôte-virus.

L'Organisation Mondiale de la Santé estime à plus de 370 millions le nombre de porteurs chroniques du virus de l'Hépatite B (VHB). L'éradication de cette maladie, même dans les pays développés ayant accès à tous les équipements médicaux, est difficile. Ceci est due en partie à l'existence de variants du VHB. Leur étude est indispensable pour mieux comprendre la biologie du VHB et lutter toujours plus efficacement contre ce virus. Toutefois l'amplification des génomes entiers des variants du VHB est souvent difficile. Ainsi durant ma thèse je me suis intéressée à différents variants du VHB. Dans un premier temps, mon travail s'est basé sur un patient (Z1) présentant à la fois de forts taux d'AgHBs et d'anticorps anti-HBs. Les analyses moléculaires et biologiques ont montré que le patient était infecté par un VHB d'apparence sauvage. L'étude de l'affinité des anti-HBs de Z1 a permis d'établir qu'il avait développé une réponse immunitaire quasi-monoclonale vis-à-vis d'un épitope antigénique différent de celui porté par le virus circulant. Dans un second temps, j'ai développé une nouvelle technique d'amplification pour l'étude des variants de VHB difficiles à obtenir par les techniques standard de PCR. Pour ce faire, j'ai appliqué une technique innovante et hautement sensible, nommée amplification en cercle roulant (RCA). La RCA associée à une PCR spécifique du VHB amplifie l'ADNccc avec une sensibilité similaire à celle d'une PCR en temps réel. La RCA présente un avantage certain puisqu'elle permet d'obtenir le génome viral entier et non des fragments sous génomiques. L'étude d'un patient infecté par un VHB résistant à la lamivudine a validé l'efficacité, la fidélité et la haute sensibilité de la RCA. En conclusion, ce travail a montré qu'il était indispensable d'étudier de grandes cohortes de patients pour pouvoir dégager des consensus concernant les différents types de variants du VHB. La RCA devrait être un atout majeur dans l'étude des variants du VHB, et aussi pour l'étude de l'ADNccc qui est à l'origine de la persistance viral et de la propagation des mutations

L'infection chronique par le virus de l'Hépatite B (VHB) est un problème majeur de santé publique mondiale, avec plus de 350 millions de patients chroniquement infectés qui ont un risque accru de décompensation hépatique, de cirrhose et de carcinome hépatocellulaire. La pathogénèse du VHB est complexe et il semble que les variants moléculaires jouent un rôle dans ce processus. La variabilité de l'ADN VHB pendant le suivi des patients n'a presque pas été étudiée. La recombinaison entre différents génotypes VHB a été décrite dans de nombreuses études transversales, mais la fréquence des recombinaisons inter- et intragénotypiques se produisant chez un patients n'est pas connue. Nous avons étudié 32 patients positifs pour le VIH et 11 patients négatifs, pour lesquels persistait une virémie VHB malgré un traitement antiviral d'au moins un an. Le génotypage a été réalisé par hybridation en milieu liquide (INNO-LiPA) et par PCR spécifique du génotype. La variabilité de l'ADN VHB dans le temps a été examinée par l'étude du polymorphisme conformationnel des simples brins et des longueurs des fragments de restriction (RFLP-SSCP). Les séquences d'ADN VHB obtenues par le clonage d'un fragment PCR de 2800 pb ont été analysées pour les paramètres phylogénétiques (diversité et pression de sélection), et la recombinaison a été détectée par la suite de logiciels RDP. De larges fragments d'ADN VHB ont pu être amplifiés à deux temps différents chez 33 patients. Des modifications marquées de la quasiespèce survenaient chez 14 patients. Un fragment de 2800 pb a été cloné et séquencé à au moins deux temps différents chez 7 de ces patients, et chez un patient ne présentant pas de changement détectable par RFLP¬SSCP. Chez 4 (57%) des patients du groupe de 7, nous avons détecté des recombinaisons inter-ou intragénotypiques variées entre des variants de la quasiespèce initiale. Les fragments recombinants hébergeaient pour la plupart des déterminants de la résistance antivirale et reflétaient une augmentation massive de la diversité et de la pression de sélection positive de la quasiespèce totale VHB. Chez les patients co-infectés, les évènements de recombinaison de l'ADN VHB sont fréquents pendant la thérapie antivirale. Ils correspondent à une augmentation de la pression de sélection positive et à la conservation des mutations de résistance aux antiviraux. Dans cette population et à l'échelle individuelle, la recombinaison est une source significative de variabilité génétique du VHB<br>Hepatitis B virus (HBV) chronic infection remains a challenging global health problem, with more than 350 million people chronically infected and at risk of hepatic decompensation, cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. HBV pathogenesis is complex and it appears that molecular variants play a role in this process. The variability of HBV DNA over times has been scarcely studied. Recombination between different HBV genotypes has been described in many cross-sectional studies, but the frequency of inter- and intra-genotypic recombination in individual patients is unknown. We studied 32 HIV-positive and 11 HIV-negative patients who remained HBV viremic on antiviral therapy for at least one year. Genotyping was based on line-probe assays and genotype specific PCR. The variability of HBV DNA over time was examined with restriction-length and single-strand conformational polymorphism (RFLP-SSCP). HBV DNA sequences obtained by cloning a 2800-bp PCR fragment were analyzed for phylogenetic parameters (diversity and selection pressure), and recombination was detected with RDP softwares. Large fragments of HBV DNA could be amplified at two different time points in 33 patients. Marked quasispecies modifications occurred in 14 patients. In 7 of these latter patients and in one patient with no change detectable by SSCP-RFLP, the 2800-bp fragment was cloned at at least two time points. In 4 (57%) of the former 7 patients, we detected various inter- or intra-genotypic recombination events between subvariants present in the initial quasispecies. Recombinant fragments mostly harbored antiviral resistance determinants and reflected a massive increase in diversity and in positive selection pressure on the entire HBV quasispecies. In coinfected patient, HBV DNA recombination events are frequent during antiviral therapy corresponding to increased positive selection pressure on the HBV quasispecies and to conservation of antiviral resistance mutations. In this population and at the individual level, recombination is a significant source of HBV genetic variability

L'efficacité des thérapies actuelles étant insuffisante, l'infection chronique par le Virus de l'Hépatite B (VHB) est la cause majeure mondiale de décès par atteintes hépatiques. Il apparaît que la combinaison de molécules antivirales à des approches immunothérapeutiques, comme les vaccins à ADN, sont des thérapies prometteuses contre l'infection chronique par le VHB. L'objectif de ce travail était d'utiliser le modèle du VHB du canard (DHBV), virus apparenté au VHB, pour tester l'efficacité de thérapies associant des analogues de nucléoside (adéfovir, ADV ou lamivudine, 3TC) à des vaccins à ADN codant pour les protéines virales structurales. Tout d'abord, chez des animaux chroniquement infectés, nous avons évalué l'efficacité d'une bithérapie associant un traitement par l'ADV au vaccin par ADN codant pour la grande protéine d'enveloppe du DHBV (pCI-preS/S). Nous avons démontré une tendance à un effet additif de l'ADV et de pCI-preS/S où une inhibition de 51% de la réplication intrahépatique a été observée pour la bithérapie contre 14% et 38% pour les monothérapies respectives. Ensuite, chez des animaux non infectés, nous avons caractérisé la réponse humorale induite par un vaccin codant pour la protéine de la capside du DHBV (pCI-C) et analysé la spécificité de ces anticorps à ceux présents lors d'une infection chronique. Ainsi, nous avons démontré que ce vaccin à ADN est capable d'induire de puissantes réponses humorales spécifiques. De plus, nous avons identifié les régions antigéniques majeures de la protéine de la capside du DHBV reconnues à la fois par ces anticorps induits et par ceux présents lors d'une infection chronique. Enfin, nous avons étudié l'efficacité à induire une élimination virale complète, d'une bithérapie associant l'administration de 3TC aux deux vaccins pCI-preS/S et pCI-C. A la fin de la thérapie, l'analyse du taux d'ADN virale intrahépatique par PCR en temps réel montre que 23% des animaux qui ont reçu la thérapie par ADN, associée ou non à l'administration de 3TC, ont complètement éliminé l'infection virale. Ainsi, la thérapie associant les vaccins à ADN codant pour les protéines structurales du VHB apparaît intéressante contre les infections chroniques par le VHB.

La population du virus de l’hépatite B (VHB) a été classée en huit génotypes allant de A à H. Des études récentes ont montré que le génotype E du VHB (VHB/E) prédomine sur un vaste territoire allant du Sénégal à l'Angola. La République centrafricaine (RCA) est située en zone de forte endémie où la prévalence de l’infection chronique par le VHB est estimée à 15,4% chez les adultes. Une étude menée chez 196 patients atteints d’hépatite B chronique a permis d’obtenir 66 séquences complètes ou partielles d’ADN des VHB. L’analyse phylogénétique a montré que 62 souches appartenaient au génotype E, une au génotype A1 et 3 au génotype D. Une souche était un recombinant des génotypes E/D. Comme dans la plupart des pays d’Afrique Sub-saharienne le génotype E du VHB prédomine nettement en RCA, avec une faible variabilité (1,67%) sur l’ensemble des souches du génotype E déjà décrites. Ces résultats sont en faveur d’une introduction récente du génotype E dans l’espèce humaine avec un essaimage rapide dans les populations concernées. Une origine simienne de ces souches est possible étant donné les identités de séquences entre l’ADN du VHB/E et l’ADN du VHB du chimpanzé. La deuxième partie du travail est une étude clinique et biologique chez 68 patients hospitalisés pour une suspicion de carcinome hépatocellulaire (CHC). Tous les patients recrutés (100%) étaient infectés par le VHB. L’échographie a permis de confirmer un CHC chez 43 patients et la cytoponction a permis un diagnostic de certitude chez 14 malades. L’antigène HBs (AgHBs) était présent chez 10 de ces 43 patients et 7 sur ces 10 étaient co-infectés par le VHD. La moyenne du dosage de l’alpha-foetoprotéine était de 10394 UI/mL. Chez les 25 autres patients, 21 avaient de l’AgHBs, parmi ceux-ci 11 étaient co-infectés par le VHD. La moyenne du dosage de l’AFP était de 9 UI/mL. Le CHC est donc fréquent en RCA et les patients consultent à un stade terminal de la maladie. Ce travail confirme aussi la relation entre VHB et CHC en RCA. Le VHD est associé aux formes graves d’hépatite B chronique. Les prélèvements de sérum et de lésions hépatiques qui ont été obtenus permettront par la suite d’étudier la variabilité du gène X et ses relations avec le CHC<br>Hepatitis B virus (HBV) strains have been classified into eight genotypes A to H. Recent studies have shown that the HBV genotype E (HBV/E) predominates in a vast crescent spanning from Senegal to Angola. The Central African Republic (CAR) is an endemic country for HBV infection and prevalence of chronic infection in adults is estimated to be about 15.4%. A survey of 196 patients attending local hospital with symptoms of hepatitis has permitted to obtain 66 complete or partial sequences of HBV DNA. Phylogenetic analyses have shown that 62 strains belonged to Genotype E while one was of genotype A1, and three of genotype D. One strain presented a recombination between genotypes E and D. Genotype E is thus predominant in RCA as in most Sub-Saharan countries. The variability of strains is limited not only among CAR strains but when all strains isolated so far are compared (1.67 %), suggesting a recent introduction of HBV in the human species with a rapid expansion. A simian origin of the genotype E is possible considering the DNA sequence identities with chimpanzee HBV DNA. The second part of this study is a clinical and biological survey of 68 patients attending the “Hôpital de l’Amitié” of Bangui for a suspicion of hepatocellular carcinoma (HCC). All the patients (100 %) have been infected by HBV. Echography confirmed the suspicion of HCC in 43 patients and cytopathology ascertained the diagnosis for 14 patients for whom cytoponction was feasible. Hepatitis B surface antigen (HBsAg) was present in 10 of these 43 patients, of whom 7 were co-infected with HDV. The average level of alpha-fetoprotein (AFP) was 10394 UI/mL. For the 25 other patients, HBsAg was detected in 21 of whom 11 were co-infected with HDV. Low level of AFP was observed (mean: 9UI/mL). This study shows that HBV related HCC is common in the country and that patients come to hospital late in the evolution of this disease. This study also confirms the association between HBV and HCC in CAR. HDV is associated with severe symptoms of hepatitis B. Serum and HCC lesions samples will be used to study variability of X gene and its relation with HCC

Madagascar fait partie de la zone de haute endémicité pour l‟hépatite B dont le profil de circulation varie selon la ruralité de la zone d‟habitation. De par son insularité et les origines de ses peuplements, nous avons supposé que ce profil de circulation du VHB était dû à la variabilité du VHB et à l‟hétérogénéité du profil de transmission. Ce projet de thèse a pour objectif principal de déterminer les facteurs épidémiologiques et moléculaires influençant la dynamique de transmission et l‟évolution vers les complications de l‟infection par le virus de l‟hépatite B à Madagascar. Résultats : la séroprévalence globale pondérée en Ag HBs est de 6,9% avec des variations allant de 0% à 26% selon les zones géographiques considérées. La prévalence augmente en s‟éloignant des grandes villes et des principales routes nationales les reliant et chez les individus à faible statutsocio-économique. L‟étude du flux génétique des souches virales de l‟hépatite B montre que les zones les plus reculées représentent un réservoir pour la dissémination du virus. L‟infection par le virus de l‟hépatite B est responsable de 31% des maladies hépatiques chroniques rencontrées dans les services hospitaliers investigués à Antananarivo. L‟introduction du VHB s‟est probablement faite au cours du XIXème siècle. Sa propagation à l‟intérieur du pays a pris une allure exponentielle durant les années 80s probablement durant les épidémies de paludisme et suite à des réutilisations des matériels d‟injections. Conclusion : Les résultats de ces différents travaux nous ont permis de plaider pour une politique de lutte visant en particulier les zones très reculées de l‟île où la prévalence en AgHBs est la plus importante<br>Madagascar is part of endemic region of HBV. Distribution is different in rural and urban area. The historic of human settlement and its insularity might impact distribution and molecular characteristic of HBV in Madagascar, we then supposed that difference observed in distribution and prevalence of HBV were due to viral variability and different pattern of viral transmission. Therefore, the main objective of this thesis was to determine molecular and epidemiological pattern that may influence dynamic transmission and complications of infection. Results: weighted prevalence of HBsAg was 6.9%. It varied from 3% to 26% according to area of sampling. Populations with a low socio-economic status and those living in rural areashad a significantly higher seroprevalence of HBsAg. Gene flow study showed rural area remain important in virus diffusion.HBV infection was found to be responsible of 31% of chronic liver disease encountered in the main public hospital in the capital of the country. Because of its recent emergence, its introduction dated from XIX century during colonization period. Its expansion during 1980s might be due to use of unsafe injection material mainly during malaria epidemic. Conclusion: The result of these work allowed us to advocate for a policy of struggle, in particular in the very remote areas of the island where the HBsAg prevalence is the most important and where care and preventive measures such as vaccinations are scarce

Avec de 400 millions de porteurs chroniques dans le inonde, le Virus de l'Hépatite B (VHB) reste un problème majeur de santé publique. Notre groupe de recherche a suggéré un impact de la variabilité génétique du VHB, impliquant la synthèse de particules virales défectives (dVHB), sur la pathogenèse hépatique. Ces Dvhb sont générées après encapsidation et rétro-transcription d'un ARN viral épissé. Cet ARN épissé code également pour HBSP du VHB. Chez des patients chroniquement infectés, notre groupe a montré, que les dVHB et la présence d'anticorps anti-HBSP étaient associés avec la sévérité de l'atteinte hépatique. Cependant, l'association dVHB/sévérité de la maladie hépatique est toujours sujette à controverse. Le but de notre travail a été : 1) de quantifier la proportion en dVHB au cours de la progression de la maladie hépatique. Nous avons quantifié les dVHB chez des patients en phase aiguë de l'infection ou chez des porteurs chroniques du VHB, et recherché l'implication de facteurs viraux intervenant dans sa régulation. Nous avons confirmé une association entre proportion en dVHB et sévérité de la maladie hépatique, et nous avons pu identifier des mutations au sein d'une région du génome viral (HPRE), associées à une augmentation de la proportion en dVHB. 2) Ces travaux de recherche ont également permis de mettre en évidence que la protéine HBSP était impliquée dans la voie de signalisation du TFNα. Cette dernière, en modulant les voies NFkB et JNK, intervient dans une diminution de la sécrétion des antigènes viraux. Cette dérégulation de la voie de signalisation du TNF pourrait participer au contrôle de l'inflammation hépatique durant l'infection virale par le VHB. De plus, cette dérégulation de la voie de signalisation du TNF pourrait également intervenir au cours du processus de fibrose hépatique, ou nous avons observé un rôle anti-fibrotique de la protéine HBSP<br>With almost 400 million chronic carriers, Hepatitis B Virus (HBV) is a major issue of world public health. Our group suggested an impact of genetic variability of HBV, included defectives particles (dHBV) synthesis, in liver pathogenesis. These particles, generated after packaging and retro-transcription of a spliced viral RNA, are defective for replication. Moreover, this spliced RNA also encodes for HBSP protein. In chronic carriers, our group showed that proportion of dHBV and HBSP antibodies are correlated with the severity of liver disease. However, the association between proportion of dHBV and severity of liver disease is still a matter of debate. Our goal was: 1) to quantify the proportion of dHBV during the course of liver disease, and to search for the implication of viral factors in its regulation. During this study, we confirmed the correlation between proportion of dHBV and severity of liver disease, and we identified mutations in a region of the viral genome (HPRE), involved in an increasing of proportion of dHBV in vivo and in vitro. 2) Our work also revealed that HBSP protein is implicated in TNFa signaling pathway. Modulating NFKB and JNK pathways, HBSP interfered in viral antigen secretion. This deregulation of TNFα signaling pathway could participate into the control of hepatic inflammation during HBV infection. In addition, deregulation of TNFα pathway could also interfere in hepatic fibrosis, where we observed an anti-fïbrotic effect of HBSP protein